路芳，章海風(fēng)

1. 長(zhǎng)春醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校（長(zhǎng)春 130031）；2. 揚(yáng)州大學(xué)旅游烹飪學(xué)院（揚(yáng)州 225127）

山楂作為食藥兼用的植物資源，其果實(shí)、葉和枝干具有抗氧化、抗腫瘤、抗糖尿病以及內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)的功效[1]。山楂果皮和果肉已被驗(yàn)證含有多種酚類(lèi)物質(zhì)，主要為酚酸類(lèi)、花青苷類(lèi)、黃酮醇苷類(lèi)、原花青素類(lèi)4種化合物[2]。山楂由于栽培地域不同，其所含的化學(xué)物質(zhì)也存在差異[3]，所以篩選適合種植與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富山楂品種也是至關(guān)重要的。基于此，對(duì)山楂中所含有的活性物質(zhì)的多樣性進(jìn)行總結(jié)，旨在為以后的山楂品種篩選與山楂品質(zhì)的鑒定提供理論基礎(chǔ)。

1 山楂的藥理作用

山楂（Crataegus）屬在全球有1 000多個(gè)物種，分布于亞洲、非洲、美洲、北美洲等。目前我國(guó)具有的山楂種類(lèi)為18個(gè)種和6個(gè)變種[4]，分布于我國(guó)的各個(gè)地方，其中以我國(guó)的河南省、山西省產(chǎn)量最高。在我國(guó)可以作為藥用的山楂只有2種，分別是山楂（Crataegus pinnatifidaBge）和山里紅（Crataegus pinnatifidavar.majorN.E.Br.）[5]。2005年山楂的果實(shí)和葉被中國(guó)藥典收錄[6]。

山楂在我國(guó)的應(yīng)用廣泛，具有很悠久的應(yīng)用歷史，在東晉的《肘后備急方》[7]、明代的《本草綱目》[8]等醫(yī)學(xué)藥方中都具有詳細(xì)藥用方法的介紹。從1980年以后，歐洲的一些醫(yī)學(xué)家開(kāi)始對(duì)山楂中的花與葉的提取物的藥理作用進(jìn)行研究。山楂在臨床應(yīng)用上的研究主要是對(duì)輕度充血性心力衰竭患者進(jìn)行輔助性的治療，結(jié)果表明山楂對(duì)輕度充血患者具有明顯的效果，其效果表現(xiàn)在提高運(yùn)動(dòng)的耐受率、降低血壓、調(diào)節(jié)心率、降低心源性猝死的發(fā)生率[9-10]，從而得出結(jié)論：山楂的提取物對(duì)充血性心衰的作用效果并不低于一些強(qiáng)心性藥物，并且山楂的提取物具有較低的副作用[11]。在我國(guó)，山楂葉子作為制作益心酮的主要成分，通過(guò)臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，山楂具有防止人體的動(dòng)脈硬化，調(diào)節(jié)血糖、血脂、血壓，改善人體的心腦血管系統(tǒng)的功效；同時(shí)，山楂黃酮具有抗氧化、抗炎、鎮(zhèn)痛、利尿、護(hù)肝的作用[12-20]。除此之外，山楂還具有抗氧化、抗炎、鎮(zhèn)痛等作用。山楂在人體心腦血管疾病方面的主要藥用成分為酚類(lèi)物質(zhì)，但是山楂中的酚類(lèi)物質(zhì)還受到山楂的種類(lèi)、山楂不同的部位、不同生長(zhǎng)階段等方面的影響[21]。

2 山楂中酚類(lèi)的種類(lèi)

在1950年之前，我國(guó)對(duì)于山楂的研究主要集中于山楂中的維生素、三萜類(lèi)活性物質(zhì)的研究。隨著后期的社會(huì)發(fā)展，我國(guó)的醫(yī)學(xué)家也開(kāi)始注意山楂對(duì)人體的心腦血管系統(tǒng)的作用，并開(kāi)始對(duì)酚類(lèi)中的有效成分進(jìn)行分析。從山楂中，可分離出150多的活性物質(zhì)[22]，其中包括一些有機(jī)酸、甾醇類(lèi)、三萜類(lèi)、黃酮類(lèi)，從而表明山楂類(lèi)植物的花和葉中含有多種酚類(lèi)物質(zhì)。

黃酮是山楂中主要的藥用成分之一，黃酮種類(lèi)豐富多樣，包含黃酮及其苷類(lèi)、雙氫黃黃酮醇、異黃酮醇類(lèi)、酮苷類(lèi)、花色苷類(lèi)、聚合黃酮類(lèi)和橙酮類(lèi)。常見(jiàn)的幾種黃酮類(lèi)的分子式見(jiàn)圖1。

圖1 山楂內(nèi)常見(jiàn)的化學(xué)物質(zhì)

在山楂的黃酮研究過(guò)程中，研究較多的黃酮包括斛皮素、蘆丁、金絲桃苷、牡荊素、牡荊素-2-O-鼠李糖苷、牡荊-4-O-葡萄糖苷、山奈酚、乙酰牡荊素-4-鼠李糖苷、乙?；登G素、6-O-乙?；登G素、3-O-β-D-吡喃半乳糖、（6-1）-α-L-鼠李糖槲皮素、α-L-鼠李糖槲皮素，3-O-β-D-吡喃葡糖，（6-1）-7-O-α-L-鼠李糖-3-O-β-D-葡糖山萘酚、4-O-鼠李糖蘆丁等[23]。高光躍等[24]比較了山楂葉與果實(shí)中的黃酮的量，結(jié)果表明山楂葉中所含有的酚類(lèi)比例遠(yuǎn)高于山楂果實(shí)中的酚類(lèi)。

在山楂中，研究人員還發(fā)現(xiàn)了綠原酸、咖啡酸等酚類(lèi)化學(xué)物質(zhì)。賈亞楠[25]從山楂中分離出具有芳香性的物質(zhì)，被稱(chēng)為紅果酸，該類(lèi)物質(zhì)可以被稱(chēng)為酚類(lèi)次生代謝產(chǎn)物。Sun等[26]研究表明紅果酸具有抗氧化功能，表明山楂具有作為抗氧化藥物開(kāi)發(fā)的潛力。

3 山楂中各種酚類(lèi)的檢測(cè)方法及質(zhì)量控制的指標(biāo)

山楂中酚類(lèi)物質(zhì)目前的檢測(cè)方法有毛細(xì)管電泳法、分光光度法、HPLC法、薄層層析法和LC-Ms法等[27-32]?，F(xiàn)在，我國(guó)檢測(cè)黃酮的方法主要為比色法，其中以酚類(lèi)蘆丁作為對(duì)照物，以亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉作為比色法的顯色劑，該方法在500 nm波長(zhǎng)處測(cè)定。不同的人采用不同的顯色劑。周元芬等[33]用AlCl3作為顯色劑，測(cè)定山楂葉中的黃酮含量，為35%。張文莉等[34]使用蘆丁作為對(duì)照，使用硝酸鋁作為顯色劑，得到的黃酮含量為86%。同樣的試驗(yàn)材料，得到的黃酮總量差異較大。原因在于樣品測(cè)定過(guò)程中，一些酚類(lèi)容易吸收光譜，導(dǎo)致黃酮的測(cè)定結(jié)果受到嚴(yán)重的干擾，所以比色法測(cè)定黃酮準(zhǔn)確度很低。

高效液相色譜（HPLC）法作為最新的檢測(cè)黃酮的方法，它具有高準(zhǔn)確度、高靈敏度、高精密度的優(yōu)點(diǎn)，在藥品、化妝品、食品等領(lǐng)域已被廣泛應(yīng)用。HPLC檢測(cè)方法是我開(kāi)發(fā)新產(chǎn)品、產(chǎn)品質(zhì)量控制以及分析檢測(cè)的首選方法。該方法在檢測(cè)山楂黃酮中的檢測(cè)技術(shù)已經(jīng)成熟，HPLC中的部分操作方法已被國(guó)家藥典檢測(cè)機(jī)構(gòu)使用采納[35]。原花青素為山楂中的另一種酚類(lèi)，由于原花青素在山楂中存在多種形式，人們測(cè)量難以將其定性。在一些研究中，原花青素成分已從山楂中初步分離得到。Gabriela等[36]使用甲醇作為流動(dòng)相，測(cè)定原青花素類(lèi)，但是原青花素類(lèi)酚類(lèi)并未得到很好分離。之后又有學(xué)者使用乙腈和去離子水為流動(dòng)相，對(duì)山楂中的2, 6聚體進(jìn)行OPC成分檢測(cè)，在檢測(cè)時(shí)需要提前將聚酰胺中的一些物質(zhì)進(jìn)行去除，此方法復(fù)雜，并且不能對(duì)黃酮與原青花素類(lèi)進(jìn)行檢測(cè)。Gabriela等[36]發(fā)明一種新型的測(cè)定方法，可以同時(shí)測(cè)定黃酮與花青素在山楂中的比例，這種方法可以特異性指定花青素的成分，這種方法進(jìn)行一次樣品分析所需要的時(shí)間為4 h。

黃酮與原花青素是山楂最重要的藥用成分，一些歐洲國(guó)家將原花青素、黃酮作為山楂藥品質(zhì)量的檢測(cè)指標(biāo)[37-38]。《中華人民共和國(guó)藥典》則以蘆丁、金絲桃苷2種酚類(lèi)作為質(zhì)量控制的指標(biāo)[3]，一些研究山楂的學(xué)者曾經(jīng)也針對(duì)使用這兩種酚類(lèi)作為質(zhì)控指標(biāo)提出過(guò)自己的見(jiàn)解[39-40]。趙彩云等[41]使用聚酰胺層析法對(duì)山楂的混亂品種進(jìn)行分析，以牡荊素鼠-李糖苷作為山楂品質(zhì)的代表性組分，山楂中的金絲桃苷所占的比例較低，牡荊素鼠李糖苷與蘆丁含量較高。所以后面一些研究者將前面2種物質(zhì)作為山楂的質(zhì)檢指標(biāo)[41-42]。英錫相[43]比較了不同產(chǎn)地的山楂，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地的牡荊素鼠李糖苷與蘆丁所含的比例具有很大的差異，并提出在臨床應(yīng)用方面，不能用不同產(chǎn)地的藥物進(jìn)行混用，以保證臨床上使用的藥物的藥效與安全性。由此可見(jiàn)，我國(guó)的山楂質(zhì)控方面存在一些缺陷，應(yīng)對(duì)不同產(chǎn)地的山楂進(jìn)行徹底研究，使我國(guó)的山楂產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)完善。

4 山楂中原青花素成分的研究

目前，對(duì)于山楂的研究，研究人員已分離出30種原花青素類(lèi)成分，山楂的不同部位所含的原青花素種類(lèi)相同，但是所含的原青花素的比例和含量存在明顯的差異[44-45]。山楂主要存在的原花青素為二聚體和三聚體，其中二聚體主要包括有B2和B5兩種，而三聚體主要包括C1[46-47]。目前研究過(guò)原花青素的種類(lèi)主要有云南山楂、山楂、伏山楂，這三種山楂中的原花青素種類(lèi)十分相似，但是它們每一種的原花青素所占的比例又存在較大的差異。在國(guó)外，歐洲山楂也進(jìn)行過(guò)詳細(xì)的原花青素成分測(cè)定，其中包含9種原花青素成分，原花青素B4也只有在這種山楂中報(bào)道過(guò)[48]。

除了上述的原花青素成分，有報(bào)道稱(chēng)我國(guó)的山楂中也含有PC類(lèi)的多酚。但由于相關(guān)文獻(xiàn)極少，而且PC類(lèi)多酚也極其難以分離，所以是否存在這類(lèi)PC類(lèi)多酚，需要進(jìn)行進(jìn)一步的研究[47]。

研究表明，山楂在一年的生長(zhǎng)過(guò)程中，其多酚含量最多的是每年的6月份或者是每年的8-9月份。所有人工種植的山楂中所檢測(cè)到的多酚均高于野生山楂所產(chǎn)生的多酚，具體見(jiàn)圖2。

圖2 不同時(shí)期山楂葉片多酚含量變化

5 山楂中的黃酮成分的研究

山楂中的黃酮研究始于歐洲，最為常見(jiàn)的是采用高效液相色譜（HPLC）法對(duì)山楂進(jìn)行測(cè)定，研究發(fā)現(xiàn)一般的山楂中含有的黃酮主要以碳苷黃酮的形式存在，在山楂中牡荊素衍生物類(lèi)含量最為豐富，然后是含有氧苷黃酮的斛皮素衍生物。在西方國(guó)家，山楂的產(chǎn)量較低，所以并沒(méi)有人對(duì)不同季節(jié)采收山楂對(duì)山楂中黃酮產(chǎn)量影響進(jìn)行研究。我國(guó)開(kāi)始有大批山楂研究人員開(kāi)始對(duì)不同的季節(jié)采收的山楂進(jìn)行黃酮測(cè)定，不同的研究者得出的山楂采集最佳時(shí)間并不相同[49-50]。

不同的研究者分析山楂最佳采集時(shí)間，但是他們結(jié)果中的采集最佳時(shí)間并不相同，其中大部分的研究者建議在每年的在8-10月采集山楂，在山楂果實(shí)成熟之后采集山楂[51-52]，也有研究者提出4-5月份采集，此時(shí)為黃酮含量最高的采集最佳時(shí)間[53-54]，除此之外也有報(bào)道稱(chēng)6-8月份為最好的采集時(shí)間[55-56]。根據(jù)試驗(yàn)表明，采集不同種類(lèi)山楂，采集最高黃酮的最佳時(shí)間不同，栽培山楂當(dāng)?shù)毓芾聿块T(mén)應(yīng)當(dāng)負(fù)責(zé)幫忙協(xié)助當(dāng)?shù)氐脑耘嗾?，測(cè)量出當(dāng)?shù)氐纳介淖罴巡杉臅r(shí)間。

不同品種的山楂黃酮含量也存在差異，通過(guò)研究大金星、大紅、敞口、大旺和野生山楂5種山楂在不同的月份黃酮含量的變化，由圖3可知，人工種植的山楂黃銅含量高于野生山楂黃銅的含量，每年的8月份是該地采集山楂的最佳時(shí)期。

圖3 不同時(shí)期山楂中黃酮的含量變化

6 展望

山楂的應(yīng)用在我國(guó)已有很久的應(yīng)用歷史，隨著生活水平的提高，人們開(kāi)始注意一些藥食同源的食品，山楂已被我國(guó)藥典機(jī)構(gòu)列入藥食同源的植物，除了具有特有的口感之外，其還具有降低血糖、抗氧化和防衰老的作用。在抗氧化、抗糖尿病方面，山楂具有藥用價(jià)值開(kāi)發(fā)的潛力，除了上述黃酮類(lèi)具有調(diào)節(jié)人體的心腦血管系統(tǒng)疾病的明顯作用，近年來(lái)又發(fā)現(xiàn)山楂中含有紅果酸（Eucomic），一些外國(guó)學(xué)者發(fā)現(xiàn)紅果酸可以增強(qiáng)細(xì)胞色素C的氧化作用，并在一定程度上具有延緩人體衰老的作用[26]，可作為未來(lái)的天然抗氧化藥物開(kāi)發(fā)。

7 結(jié)語(yǔ)

山楂作為食品常出現(xiàn)在人們的面前，被大家熟悉與認(rèn)知，在食用口感方面也得到廣大消費(fèi)者的認(rèn)可。但是如何高效地利用山楂中的有效化合物還有待研究。山楂采集的最佳時(shí)間為每年的8-9月份，因?yàn)榇藭r(shí)是山楂中酚類(lèi)及多種活性物質(zhì)含量最高的時(shí)期。隨著社會(huì)的發(fā)展，人們對(duì)食藥同源的物質(zhì)更加青睞，為山楂的發(fā)展帶來(lái)前所未有的機(jī)遇，特別是未來(lái)山楂在藥品方面的開(kāi)發(fā)。