朱太彩 張水榮 王 丹

在婦科惡性腫瘤患者中，宮頸癌的發(fā)病率較高，在合并有HPV16或者其他高危型HPV病毒感染的人群中，遠期宮頸高級別病變或者宮頸癌的發(fā)病率顯著上升[1-2]。近年來，腫瘤調(diào)控蛋白的改變在宮頸癌的發(fā)病機理研究中越來越受到關(guān)注。腫瘤調(diào)控蛋白的改變，能夠在癌細胞的生物學(xué)特征的調(diào)控、癌細胞內(nèi)信號通路的激活等方面發(fā)揮作用。泛素特異性蛋白22(USP22)的表達，能夠通過影響到癌細胞腫瘤蛋白的泛素化修飾過程，惡化腫瘤細胞生物學(xué)特征，最終加劇癌細胞的持續(xù)異常分裂過程[3]。葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(Glut1)是葡萄糖轉(zhuǎn)運相關(guān)蛋白，能夠通過提高癌細胞膜上葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白的激活程度，促進癌細胞信號物質(zhì)的轉(zhuǎn)運，提高腫瘤細胞的核DNA分裂速度[4]。本次研究收集我院病理中心收集的90例宮頸癌組織標(biāo)本、90例宮頸上皮瘤變組織標(biāo)本，探討了USP22、Glut1蛋白的表達情況。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集我院2016年5月至2018年1月收集的90例宮頸癌組織標(biāo)本、90例宮頸上皮瘤變組織標(biāo)本。入選標(biāo)準(zhǔn)：①宮頸癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會婦產(chǎn)科學(xué)分會制定的標(biāo)準(zhǔn)；②所有標(biāo)本均為手術(shù)后獲?。虎凼中g(shù)前患者未接受放化療、免疫學(xué)治療；④本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關(guān)醫(yī)學(xué)倫理規(guī)定，經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，對研究對象的各項資料嚴(yán)格保密。排除標(biāo)準(zhǔn)：①轉(zhuǎn)移性宮頸、卵巢或其他部位惡性腫瘤患者；②未經(jīng)病理學(xué)檢查證實；③既往具有放化療病史；④基礎(chǔ)資料不完整，難以進行統(tǒng)計學(xué)分析。宮頸癌患者年齡38～68歲，平均(55.2±9.8)歲；FIGO分期：Ⅰ期22例、Ⅱ期39例、Ⅲ期25例、Ⅳ期4例；腫瘤組織學(xué)分級：G1級22例、G2級36例、G3級32例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移39例；病理學(xué)類型：鱗癌75例、腺癌15例；病灶最大徑≥4 cm 40例、<4 cm 50例。CIN患者年齡30～65歲，平均(53.9±10.4)歲，CINⅠ級20例、CINⅡ級47例、CINⅢ級23例。2組患者的年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 免疫組化染色判定

Glut1蛋白陽性染色表達于細胞核中、USP22蛋白的陽性著色表達于細胞質(zhì)和細胞核中。①根據(jù)染色的程度分為0～3分：0分為未染色；1分為僅僅淡黃色染色；2分為棕黃色染色；3分為染色呈褐色、黑色；②根據(jù)染色的細胞占比結(jié)果：1分為占比≤10%；2分為占比范圍>10%～50%；3分為占比范圍>50%～75%；4分為占比>75%；其中染色程度×陽性細胞分值得到的積分<3則為陰性、≥3則為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 宮頸癌組織和CIN組織中的USP22、Glut1蛋白比較

宮頸癌組織中的USP22、Glut1蛋白陽性表達率分別為62.22%、65.56%，CIN組織中的USP22、Glut1蛋白陽性表達率分別為24.44%、30.00%，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 宮頸癌組織和CIN組織中的USP22、Glut1蛋白比較(例，%)

2.2 宮頸癌組織中的USP22、Glut1蛋白表達與病理學(xué)特征的關(guān)系

宮頸癌組織中的Glut1蛋白陽性表達率在不同的TNM分期、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織中存在顯著差異(P<0.05)，宮頸癌組織中的USP22蛋白陽性表達率在不同的TNM分期、不同組織學(xué)分級、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織中存在顯著差異(P<0.05)，見表2。

2.3 宮頸癌組織中的USP22、Glut1蛋白表達相關(guān)性 經(jīng)Spearman秩相關(guān)分析，宮頸癌組織中的Glut1蛋白表達與USP22蛋白表達呈顯著的正相關(guān)關(guān)系(γ=0.495，P<0.05)，見表3。

3 討論

宮頸惡性腫瘤的發(fā)病居于婦科惡性腫瘤的前三位，近年來雖然宮頸病變的早期篩查，能夠在宮頸癌的預(yù)防和早期檢出方面發(fā)揮顯著作用[5-6]，但部分經(jīng)濟欠發(fā)達地區(qū)，宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險仍然呈現(xiàn)出了一定的上升趨勢[7]。有研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者的遠期無瘤生存時間或者無進展生存期均無明顯的改善，中晚期宮頸癌患者的5年內(nèi)病死率較高。通過對宮頸癌臨床病理特征的評估，可以為臨床上宮頸癌的診療提供可靠的參考。腫瘤蛋白的檢測，具有較為便捷的特征，其在疾病的早期診斷或者預(yù)后參考方面均具有一定的價值。雖然宮頸鱗狀上皮細胞抗原能夠在宮頸癌的診療過程中發(fā)揮一定的作用，但是依靠宮頸鱗狀上皮細胞抗原來評估宮頸癌臨床病理特征的一致性率較低，其與宮頸癌臨床分期進展或者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的符合程度較低[8]。

USP22是泛素化修飾蛋白，其能夠在癌細胞內(nèi)腫瘤調(diào)控蛋白的激活及蛋白結(jié)構(gòu)的修飾方面發(fā)揮作用，從而影響到宮頸上皮細胞的轉(zhuǎn)錄和異常增殖過程。相關(guān)的分子生物學(xué)方面研究表明，USP22能夠影響到癌細胞內(nèi)P16/AKT或者E6/E7蛋白的激活，最終影響到高危型HPV病毒顆粒的整合進程[9]。Glut1蛋白能夠在癌細胞ATP能量利用代謝方面發(fā)揮作用，干預(yù)到腫瘤細胞膜內(nèi)側(cè)癌基因的激活程度。Glut1蛋白對于葡萄糖轉(zhuǎn)運體上ATP結(jié)合酶的影響，能夠提高癌細胞內(nèi)紡錘體異常分裂的風(fēng)險，加速癌細胞非對稱分裂。雖然有部分研究者探討了Glut1蛋白在宮頸癌患者中的表達情況，但多數(shù)研究者局限于Glut1蛋白的流行病學(xué)分析[10]，缺乏對相關(guān)指標(biāo)與宮頸癌臨床病理特征的探討。

表2 宮頸癌組織中的Glut1、USP22蛋白表達與病理學(xué)特征的關(guān)系(例，%)

表3 相關(guān)性分析結(jié)果/例

本次研究的主要方式在于通過免疫組化探討了USP22、Glut1蛋白的表達情況，研究發(fā)現(xiàn)在宮頸癌病灶組織中，USP22、Glut1蛋白的表達陽性率水平明顯高于宮頸上皮內(nèi)瘤變的患者，統(tǒng)計學(xué)差異較為顯著，表明USP22、Glut1在宮頸癌的發(fā)生過程中存在明顯的高表達態(tài)勢。USP22、Glut1的高表達，能夠在影響宮頸癌細胞的形態(tài)學(xué)特征、生物學(xué)特征等方面發(fā)揮相應(yīng)的作用，從而提高了腫瘤細胞的浸潤力與粘附力。還有部分研究者也嘗試去探討Glut1蛋白在宮頸癌患者中的表達情況，發(fā)現(xiàn)在宮頸癌患者中，Glut1蛋白的表達陽性率水平可平均上升30%～45%，另外Glut1蛋白的表達還具有顯著的病情依賴性，在宮頸癌惡病質(zhì)較為明顯或者短期內(nèi)病死風(fēng)險較高的患者中，Glut1蛋白的表達可持續(xù)上升[11]。本次研究還重點探討了USP22、Glut1蛋白的表達與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)USP22蛋白在宮頸癌臨床分期較晚的患者、發(fā)生了顯著盆腔內(nèi)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或者組織學(xué)分級不佳的患者中，其表達陽性率較高，提示了USP22蛋白的表達與宮頸癌的病情關(guān)系。USP22不僅能夠通過泛素化影響到腫瘤細胞的浸潤和粘附過程，同時可以提高腫瘤細胞浸潤和突破宮頸基膜組織的能力，促進癌細胞浸潤宮旁組織，最終促進臨床分期的進展；USP22對于癌細胞粘附能力的影響，能夠提高癌細胞粘附盆腔淋巴結(jié)的風(fēng)險，進而提高淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的可能[12-13]；在不同的TNM分期、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，Glut1蛋白的表達同樣具有顯著的差異，提示Glut1蛋白的表達也能夠影響到宮頸癌的臨床病理特征的進展。Glut1蛋白對于宮頸癌的病情影響，主要在于其能夠影響到葡萄糖載體運輸、能量代謝利用及癌細胞周期調(diào)控等過程[14-15]。相關(guān)關(guān)系分析可見，在宮頸癌組織中，USP22、Glut1蛋白的表達具有顯著的正相關(guān)關(guān)系，表明USP22、Glut1在影響宮頸癌發(fā)生過程中可能具有一定的協(xié)調(diào)刺激作用。

在宮頸癌組織中，USP22、Glut1蛋白的表達明顯上升。USP22、Glut1蛋白的表達與宮頸癌患者的臨床分期或者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等特征有關(guān)。臨床上必要時可以通過檢測USP22、Glut1蛋白，協(xié)助整體評估宮頸癌的病情。