陳 浩
廣東省梅州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科 514071
有核紅細(xì)胞(Nucleated red blood cell,NRBC)也稱(chēng)為幼稚紅細(xì)胞,是指血液中還未完全成熟的紅細(xì)胞,其內(nèi)含有細(xì)胞核,可分為以下四種類(lèi)型:原始紅細(xì)胞、早幼紅細(xì)胞、中幼紅細(xì)胞和晚幼紅細(xì)胞[1-2]。正常情況下,成年人外周血中并不含有NRBC,若提示血液NRBC陽(yáng)性,則屬于病理現(xiàn)象[3]。NRBC檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性常與先天性紅細(xì)胞生成異常及新生兒溶血等疾病的發(fā)生相關(guān)聯(lián),其臨床上最常見(jiàn)的原因有[4-5]:(1)血液中紅細(xì)胞數(shù)目急劇減少,如急性的大失血,因機(jī)體外周血紅細(xì)胞數(shù)目大量減少,骨髓中尚未完全成熟的NRBC就會(huì)提前進(jìn)入血液中,用來(lái)快速補(bǔ)充外周血減少的紅細(xì)胞。(2)血液系統(tǒng)相關(guān)惡性腫瘤疾病的發(fā)生,相關(guān)腫瘤疾病會(huì)引起幼稚的紅細(xì)胞在骨髓內(nèi)大量增殖,導(dǎo)致機(jī)體正常的造血功能受到抑制,且大部分NRBC會(huì)提前釋放到外周血中,最終也會(huì)引起NRBC比例偏高。因此,若機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)了NRBC比例偏高的情況,就應(yīng)該及時(shí)檢查是否有急性溶血或急性出血等情況[5]。目前,臨床上主要以顯微鏡鏡檢的方式來(lái)檢測(cè)NRBC,但由于細(xì)胞計(jì)數(shù)相對(duì)較復(fù)雜,且其計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確度在很大程度上受技術(shù)人員的主觀(guān)因素影響,檢查步驟十分費(fèi)時(shí),無(wú)法快速地提供患者準(zhǔn)確的NRBC相關(guān)數(shù)據(jù)[7-8]。所以,現(xiàn)階段尋找一種快速且準(zhǔn)確的NRBC檢測(cè)方法以代替?zhèn)鹘y(tǒng)鏡檢方法已成為臨床研究上的一大熱點(diǎn)[9]。本文旨在探討全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀對(duì)有核紅細(xì)胞檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值,為后期臨床應(yīng)用提供參考。具體報(bào)道如下。
1.1 標(biāo)本來(lái)源 選取2018年5月—2019年12月期間在我院經(jīng)分析儀檢測(cè)提示血液中有核紅細(xì)胞(NRBC)為陽(yáng)性的56例患者為觀(guān)察對(duì)象,其中男29例,女27例,年齡16~67歲,平均年齡(36.67±1.67)歲,詳細(xì)資料見(jiàn)表1。使用EDTA-K2抗凝采血管(成都瑞琦科技實(shí)業(yè)股份有限公司)采集上述患者靜脈血2.0ml,并于2h內(nèi)完成檢測(cè)。
表1 患者一般臨床資料歲)
1.2 儀器與試劑 XN-1000(B1)全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀(希森美康醫(yī)用電子有限公司);采血針及EDTA-K2抗凝采血管(成都瑞琦科技實(shí)業(yè)股份有限公司);瑞氏染液(珠海貝索生物技術(shù)有限公司);光學(xué)顯微鏡(奧林巴斯BX43)。形態(tài)學(xué)檢查人員由2名主管以上職稱(chēng),且長(zhǎng)期從事骨髓形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)的人員擔(dān)任。
1.3 方法 分析儀檢測(cè):在血液標(biāo)本準(zhǔn)備完好的條件下,技術(shù)人員嚴(yán)格按照XN-1000(B1)全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀的操作說(shuō)明書(shū)來(lái)檢測(cè)患者血液標(biāo)本,且必須在2h期間完成檢測(cè),儀器操作時(shí)NRBC計(jì)數(shù)及NRBC百分比應(yīng)通過(guò)NRBC通道進(jìn)行檢測(cè)。 顯微鏡觀(guān)察:先取1支試管,加入4.0ml稀釋液,再用校準(zhǔn)過(guò)的微量吸量管吸取末梢血20μl,并擦去吸管外部余血,將20μl全血吹入稀釋液,立即混勻,接著進(jìn)行人工涂片和瑞式染色,并將準(zhǔn)備好的計(jì)數(shù)板及蓋玻片擦干凈,將蓋玻片覆蓋于計(jì)數(shù)板上,用滴管吸取混勻的紅細(xì)胞懸液充入計(jì)數(shù)室,靜置2~3min后,用高倍鏡計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)四角和正中的5個(gè)中方格的紅細(xì)胞邊線(xiàn)上的細(xì)胞按“計(jì)上不計(jì)下,計(jì)左不計(jì)右”的原則計(jì)數(shù)。
1.4 觀(guān)察及檢測(cè)指標(biāo) (1)分析儀檢測(cè)和顯微鏡檢測(cè)在血液標(biāo)本中檢測(cè)出NRBC就視為陽(yáng)性,若無(wú)則為陰性。并以鏡檢結(jié)果為“金標(biāo)準(zhǔn)”,儀器檢測(cè)及顯微鏡觀(guān)察均陽(yáng)性者為真陽(yáng)性,兩者均陰性者為真陰性,并分別計(jì)算真陽(yáng)性率及真陰性率,真陽(yáng)性率=儀器檢測(cè)NRBC陽(yáng)性準(zhǔn)確人數(shù)/鏡檢NRBC陽(yáng)性人數(shù),真陰性率=鏡檢NRBC陰性準(zhǔn)確人數(shù)/儀器檢測(cè)NRBC陰性人數(shù)。(2)儀器檢測(cè)樣本高、中、低值定義[10]:高值:NRBC計(jì)數(shù)絕對(duì)值>20×109/L,中值:NRBC計(jì)數(shù)絕對(duì)值在(10~20)×109/L之間,低值:NRBC計(jì)數(shù)絕對(duì)值≤10×109/L。并分別計(jì)算低、中和高值樣本的變異系數(shù)(CV)以評(píng)價(jià)XN-1000(B1)全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀的批內(nèi)精密度。
2.1 XN-1000(B1)全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀批內(nèi)精密度 按照NRBC計(jì)數(shù)數(shù)目將標(biāo)本分類(lèi):患者可分為低值(20例)、中值(13例)和高值(23例),分析儀的低、中、高值標(biāo)本NRBC百分比的批內(nèi)精密度詳見(jiàn)表2。
表2 XN-1000(B1)全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀批內(nèi)精密度(%)
2.2 XN-1000(B1)全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀與顯微鏡分類(lèi)計(jì)數(shù)結(jié)果相關(guān)性 對(duì)56例患者的血液標(biāo)本行全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果真陽(yáng)性率為89.80%(44/49),且真陰性率為85.71%(6/7),詳見(jiàn)表3。
表3 分析儀與顯微鏡計(jì)數(shù)陽(yáng)性與陰性結(jié)果(n)
人體血液中出現(xiàn)NRBC提示機(jī)體正處于一種病理狀態(tài),因此,機(jī)體外周血NRBC的相關(guān)數(shù)據(jù)檢測(cè)在臨床上具有重要意義。近年來(lái),全自動(dòng)血液分析儀的出現(xiàn)使其成為一種檢測(cè)NRBC的新技術(shù),并在臨床上得到廣泛應(yīng)用[11-12]。其中XN-1000(B1)全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀是希森美康醫(yī)用電子有限公司生產(chǎn)的新型血液分析儀之一,被廣泛應(yīng)用于臨床檢測(cè)NRBC。XN-1000(B1)在進(jìn)行人體外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)僅需經(jīng)過(guò)獨(dú)立的NRBC通道即可完成計(jì)數(shù),并將結(jié)果以百分比和絕對(duì)值2個(gè)參數(shù)報(bào)告顯示出來(lái),NRBC的數(shù)量和分布狀況可通過(guò)散點(diǎn)圖直觀(guān)顯示[13]。同時(shí)XN-1000(B1)全自動(dòng)血液分析儀可通過(guò)全新的演算規(guī)則,不再需要以往特殊的試劑或染液就可直接提供精準(zhǔn)的NRBC檢測(cè)結(jié)果[14-15]。
本文通過(guò)探討全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀對(duì)有核紅細(xì)胞檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值發(fā)現(xiàn)XN-1000(B1)全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀和人工鏡檢法檢測(cè)NRBC具有較高的相關(guān)性,說(shuō)明全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀在檢測(cè)NRBC上與鏡檢法都具有良好的檢測(cè)效果,準(zhǔn)確性高,結(jié)果可靠;同時(shí)分析儀檢測(cè)低、中和高值標(biāo)本的NRBC百分比批內(nèi)精密度分別為12.38%、9.82%和6.62%,檢測(cè)結(jié)果真陽(yáng)性率為89.80%,真陰性率為85.71%,充分體現(xiàn)了全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀具有較高的精密度,真陽(yáng)性率符合我院期望,且在數(shù)據(jù)處理方面可見(jiàn)全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀具有獨(dú)特的優(yōu)越性,可直接顯示NRBC相關(guān)數(shù)據(jù),便于觀(guān)察,達(dá)到節(jié)約時(shí)間的效果。
綜上所述,全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀應(yīng)用于有核紅細(xì)胞檢測(cè)具有準(zhǔn)確度高,重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),與傳統(tǒng)鏡檢方法相比較,該儀器可快速進(jìn)行血液分析,操作簡(jiǎn)便,并可在短時(shí)間內(nèi)得出準(zhǔn)確度較高的數(shù)據(jù),且便于觀(guān)察,在一定的程度上還節(jié)約了相關(guān)試劑的使用,降低醫(yī)療成本,為臨床檢驗(yàn)NRBC提供了一種新的思路,值得在臨床上推廣應(yīng)用。