劉曉峰 曹馨元 尹永霞 王波 黃文華

摘 要 目的：制備百花花楸果中β-谷甾醇（簡稱為“Sit”）及其衍生物，并考察其抗抑郁活性。方法：以百花花楸果實為原料，經(jīng)過75%乙醇和20%KOH溶液提取，并經(jīng)萃取結(jié)晶后得到Sit。以Sit的C3位羥基作為結(jié)構(gòu)修飾位點，以二氯甲烷為反應溶劑、4-二甲氨基吡啶為催化劑、1-（3-二甲胺基丙基）-3-乙基碳二亞胺為脫水劑，分別加入4種有機酸（水楊酸、2-四氫糠酸、苯丙氨酸、山梨酸），通過羧合反應生成相應的酯類衍生物Sit-S、Sit-T、Sit-P、Sit-Sr，并采用紅外和核磁共振等波譜技術(shù)鑒定其化學結(jié)構(gòu)。根據(jù)懸尾實驗和強迫游泳實驗初步探討Sit及其4種衍生物的抗抑郁活性，然后再根據(jù)懸尾實驗和自發(fā)運動能力實驗篩選抗抑郁活性較好的化合物的有效劑量。將篩選出的該化合物單用以及分別與阿戈美拉汀[40 mg/kg，5-羥基色胺（5-HT）和5-HT 2C受體拮抗劑]、氟哌啶醇[0.2 mg/kg，非選擇性D2受體拮抗劑]和荷包牡丹堿[4 mg/kg，競爭性γ-氨基丁酸（GABA）拮抗劑]聯(lián)用，腹腔注射給藥60 min后，進行懸尾實驗，然后通過酶聯(lián)免疫吸附法檢測小鼠腦組織中5-HT、多巴胺（DA）、GABA水平，初步探索該化合物的抗抑郁作用機制。實驗均設(shè)置空白對照組，腹腔注射等量10%丙二醇溶液。結(jié)果：經(jīng)波譜技術(shù)鑒定，Sit與4種有機酸成功地反應生成了相應的酯類衍生物。在Sit及其4種衍生物中，Sit-S組小鼠在懸尾實驗和強迫游泳實驗中的不動時間均最短，且顯著短于空白對照組（P<0.05）。Sit-S的篩選結(jié)果顯示，其抗抑郁的有效劑量為4 mg/kg，且與空白對照組比較不影響小鼠的自發(fā)活動（P>0.05）。該劑量作用下，Sit-S可顯著縮短小鼠在懸尾實驗中的不動時間（P<0.01），顯著提高小鼠腦組織中5-HT、DA和GABA水平（P<0.05或P<0.01），但該作用效果可被阿戈美拉汀、氟哌啶醇和荷包牡丹堿不同程度地逆轉(zhuǎn)。結(jié)論：Sit的水楊酸酯衍生物Sit-S具有良好的抗抑郁活性，其作用機制可能是通過提高腦組織中5-HT、DA和GABA水平所介導的。

關(guān)鍵詞 百花花楸果;β-谷甾醇;衍生物;抗抑郁活性

ABSTRACT OBJECTIVE： To prepare β-sitosterol （shorted for “Sit”） and its derivatives from the fruit of Sorbus pohuashanensis， and to investigte their antidepressant activities. METHODS： Using the fruit of S. pohuashanensis as raw material， extracted with 75% ethanol and 20%KOH solution， Sit was obtained after extraction and crystallization. C3 hydroxyl group of Sit was used as the structural modification site， CH2Cl2 was used as the reaction solvent， DMAP was used as catalyst， EDCI was used as dehydrating agent， 4 kinds of organic acids （salicylic acid， 2-tetrahydrofuranic acid， phenylalanine， sorbic acid） were added to make the carboxylation reaction to produce ester derivatives Sit-S， Sit-T， Sit-P and Sit-Sr. The chemical structure of its derivatives were elucidated by IR and NMR. The tail suspension test and the forced swimming model were used to preliminarily explore the antidepressant active components of Sit and 4 kinds of derivatives; tail suspension test and the spontaneous exercise capacity test were used to screen effective dose of the compounds with antidepressant active. The compound was used alone or in combination with agomelatin [40 mg/kg， 5-hydroxytryptamine （5-HT） and 5-HT 2C receptor antagonist]， haloperidol [0.2 mg/kg， non-selective D2 receptor antagonist] and bicuculline [4 mg/kg， competitive γ-aminobutyric acid （GABA） antagonist]， respectively. Sixty minutes after intraperitoneal injection， tail suspension test was performed. The levels of 5-HT， dopamine （DA） and GABA in brain tissues of mice were detected by ELISA. The blank control group was given intraperitoneal injection of 10% propylene glycol solution. RESULTS： By spectrum technology， the corresponding ester compounds were synthesized by the reaction of Sit with four kinds of organic acids. Among Sit and its four derivatives， the immobility time of Sit-S group was the shortest in tail suspension test and forced swimming test， which was significantly shorter than that of blank control group （P<0.05）. Screening results of Sit-S showed that the effective antidepressant dose was 4 mg/kg， and it did not affect the spontaneous activity of mice compared with the blank control group （P>0.05）. With this dose， Sit-S could significantly shorten the immobility time of mice in tail suspension test （P<0.01）， and can significantly increase the levels of 5-HT， DA and GABA in the brain tissue of mice （P<0.05 or P<0.01）， but its effect can be reversed by agomelatine， haloperidol and bicuculline to different extent. CONCLUSIONS： Sit salicylate derivatives Sit-S exhibits good antidepressant activity， and its mechanism of action may be mediated by increasing the levels of 5-HT， DA and GABA.

2.3 Sit衍生物的合成

按照文獻報道的方法[15]，本研究選用二氯甲烷為反應溶劑、DMAP為催化劑、EDCI為脫水劑，分別加入不同有機酸（水楊酸、2-四氫糠酸、苯丙氨酸、山梨酸），使之發(fā)生羧合反應生成酯類化合物。以水楊酸β-谷甾醇酯（Sit-S）為例的合成過程：將水楊酸41.4 mg和Sit 83.0 mg在5 mL二氯甲烷中混合后，加入脫水劑EDCI 76.8 mg脫水10 min后，加入催化劑DMAP 7.4 mg，將該溶液加熱回流6 h;減壓除去溶劑，將殘余物先在常溫下通過硅膠254色譜柱洗脫，然后再采用石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯（7 ∶ 7 ∶ 1，V/V/V）洗脫，得到淺黃色油狀膠體（95.8 mg），即為Sit-S。同法制備2-四氫糠酸、苯丙氨酸、山梨酸與Sit生成的酯類衍生物Sit-T、Sit-P、Sit-Sr。通過HPLC法確定4種衍生物的純度均大于98%。Sit的母核及其衍生物的結(jié)構(gòu)見圖2。

2.4 Sit衍生物的結(jié)構(gòu)確證

采用傅里葉變換紅外光譜法（IR）和核磁共振氫譜（1H-NMR）、碳譜（13C-NMR）等技術(shù)對化合物進行結(jié)構(gòu)確證。

2.4.1 Sit-T 分子式為C34H56O4，分子量為528。IR光譜：2 964～2 888 cm-1處有飽和烷烴的碳氫單鍵伸縮振動信號（υCH），提示存在飽和烷烴基團;1 738 cm-1處有羰基碳氧雙鍵的伸縮振動信號（υC=O），提示存在羰基; ? 1 629 cm-1處有碳碳雙鍵的伸縮振動信號，提示存在碳碳雙鍵（υC=C）;1 384、1 372 cm-1處有甲基碳氫變形振動信號，提示有多個甲基存在。1H-NMR（300 MHz， CDCl3）δ：5.377（d，1H，J=4.8 Hz，6-H），4.681（m，1H，2″-H），4.433（m，1H，3-H），4.025（dd，1H，J=7.2、14.4 Hz，5″-Ha），3.940（m，1H，5″-Hb），1.010（s，3H，10-CH3），0.922（d，3H，2′-CH3），0.859（t，3H，5′-CH3），0.813（d，6′，6′-CH3），0.668（s，3H，13-CH3）;2.343～0.753處的信號為甾體母核、甾體17側(cè)鏈和2-四氫糠酸中其他飽和碳上的氫信號。13C-NMR（75 MHz，CDCl3）δ：172.67（C1′），139.41（C5），122.68（C6），76.79（C2″），74.33（C3），69.17（C5″），56.63（C14），56.01（C17），49.99（C9），45.82（C24），42.25（C13），39.67（C12），37.95（C4），36.89（C1），36.51（C10），36.06（C20），33.91（C22），31.81（C3″），30.12（C7，8），29.16（C25），28.13（C2），27.63（C23），26.13（C15），25.09（C4″），24.20（C16），23.04（C28），20.96（C11），19.70（C26），19.20（C27），18.98（C21），18.70（C18），11.89（C29），11.76（C19）。

2.4.2 Sit-P 分子式為C37H59NO3，分子量為565。IR光譜：3 450 cm-1處有氨基氮氫單鍵的伸縮振動信號，提示有氨基存在;3 044 cm-1處有碳氫鍵伸縮振動信號，提示有碳氫鍵的存在;1 734、1 722 cm-1處有羰基碳氧雙鍵伸縮振動信號，提示有羰基存在;1 670 cm-1處有雙鍵碳碳骨架伸縮振動信號，提示甾體母核中有雙鍵的存在; ? ? ?1 384、1 370 cm-1處有甲基碳氫變形振動信號，提示有多個甲基存在。1H-NMR（300 MHz，CDCl3）δ：7.311（m，2H，3′，5′-H），7.276（m，2H，2′，6′-H），7.140（m，1H，4′-H），5.371（d，1H，J=4.8 Hz，6-H），5.034（d，1H，J=8.1 Hz，2′-NH），4.642（m，1H，3-H），3.080（m，1H，2′-H），1.416[s，3H，1[″][″]-（CH3）3]，1.001（s，3H，18-H），0.936（d，3H，J=6.6 Hz，21-H），0.873（t，3H，J=7.2 Hz，29-H），0.828（d，6H，J=6.6 Hz，26，27-H），0.679（s，3H，19-H）;2.383～0.767 處的信號為甾體母核、甾體17側(cè)鏈和2-丁基羰基氨基苯丙酸基團中其他飽和碳上的氫信號。13C- NMR（75 MHz，CDCl3）δ：171.14（C1′），154.98（C1[″][′]），139.30（C5），136.06（C1″），129.36（C3″，5″），128.34（C2″，6″），126.82（C4″），122.78（C6），79.62（C1[″][″]），73.52（C3），56.59（C14），55.95（C17），54.46（C2′），49.92（C9），45.74（C24），42.22（C13），39.63（C12），37.83（C4），36.91（C3′），36.82（C1），36.47（C10），36.07（C20），33.85（C22），31.81（C7），31.76（C8），29.07（C25），28.23[C1[″][″]-（CH3）3]，28.17（C2），27.59（C23），25.99（C15），24.21（C16），22.99（C28），20.94（C11），19.76（C26），19.20（C27），18.98（C21），18.71（C18），11.91（C29），11.78（C19）。

2.4.3 Sit-Sr 分子式為C35H56O3，分子量為524。IR光譜：3 075 cm-1處有碳氫伸縮振動信號，提示有碳氫鍵的存在;2 975～2 877 cm-1處有飽和烷烴的碳氫單鍵伸縮振動信號（υCH），提示有飽和烷烴基存在;1 733 cm-1處有羰基碳氧雙鍵伸縮振動信號，提示有羰基的存在;1 644 cm-1處有碳碳雙鍵骨架伸縮振動信號，提示甾體母核中有雙鍵存在;1 383、1 369 cm-1處有甲基碳氫變形振動信號，提示有多個甲基存在。1H-NMR（300 MHz，CDCl3）δ：7.259（dd，1H，J=9.9，15.3 Hz，3′-H），6.213（dd，1H，J=9.9，15.3 Hz，4′-H），5.759（d，1H，J=15.3 Hz，2′-H），5.367（m，1H，6-H），5.357（m，1H，5′-H），4.675（m，1H，3-H），1.839（d，3H，J=5.7 Hz，6′-H），1.011（s，3H，18-H），0.914（d，3H，J=6.3 Hz，21-H），0.851（t，3H，J=7.2 Hz，29-H），0.806（d，6H，J=6.6 Hz，26，27-H），0.661（s，3H，19-H）;2.347～0.745處的信號為甾體母核、甾體17側(cè)鏈和（2E，4E）-己烷-2，4-二壬基中其他飽和碳上的氫信號。13C-NMR（75 MHz，CDCl3）δ：166.67（C=O），144.68（C3′），139.70（C5），139.00（C5′），129.77（C4′），122.54（C6），119.43（C2′），73.67（C3），56.64（C14），55.98（C17），49.98（C9），45.78（C24），42.26（C13），39.68（C12），38.17（C4），36.98（C1），36.57（C10），36.11（C20），33.88（C22），31.86（C7），31.82（C8），29.09（C25），28.21（C2），27.82（C23），26.01（C15），24.25（C16），23.01（C28），20.98（C11），19.78（C26），19.29（C27），18.99（C21），18.73（C18），18.60（C6′），11.94（C29），1.81（C19）。

2.4.4 Sit-S 分子式為C36H54O4，分子量為550。IR光譜：3 450 cm-1處有羥基氫氧伸縮振動信號，提示有羥基存在;3 080 cm-1處有碳氫化合物伸縮振動信號，提示有飽和烷烴基團的存在;2 964 ～2 876 cm-1處有飽和烷烴的碳氫單鍵伸縮振動信號（υCH），提示有飽和烷烴基團存在;1 724 cm-1處有羰基碳氧雙鍵伸縮振動信號，提示有羰基存在;1 614 cm-1處有雙鍵碳碳骨架伸縮振動信號，提示甾體母核中有雙鍵的存在;1 604、1 582 cm-1處有碳碳雙鍵伸縮振動信號（υArC=C），提示有苯環(huán)存在;1 384、1 372 cm-1處有甲基碳氫變形振動信號，提示有多個甲基存在。1H-NMR（300 MHz，CDCl3）δ：10.836（s，1H，2″-H），7.781（dd，1H，J=1.5，7.8 Hz，6″-H），7.377（dt，1H，J=1.5，7.8 Hz，5″-H），6.896（dd，1H，J=0.9，8.4 Hz，3″-H），6.807（dt，1H，J=0.9，8.4 Hz，4″-H），5.356（d，1H，J=4.5 Hz，6-H），4.818（m，1H，3-H），0.988（s，3H，10-CH3），0.864（d，3H，2′-CH3），0.798（t，3H，5′-CH3），0.752（d，6′，6′-CH3），0.612（s，3H，13-CH3）;2.403～0.630 處的信號為甾體母核、甾體17側(cè)鏈中其他飽和碳上的氫信號。13C-NMR（75 MHz，CDCl3）δ：168.60（1′），160.76（C2″），138.30（C5），134.39（C4″），128.86（C6″），122.08（C6），117.90（C5″），116.51（C3″），111.90（C1″），74.26（C3），55.70（C14），55.11（C17），49.09（C9），44.89（C24），421.34（C13），38.75（C12），37.11（C4），35.99（C1），35.64（C10），35.15（C20），32.99（C22），30.93（C7），30.89（C8），28.25（C25），27.23（C2），26.80（C23），25.22（C15），23.30（C16），22.12（C28），20.07（C11），18.80（C26），18.33（C27），18.08（C21），17.80（C18），10.99（C29），10.86（C19）。

2.5 Sit及其衍生物對抑郁模型小鼠的抗抑郁活性考察

本課題組前期預實驗結(jié)果顯示，Sit-T、Sit-P、Sit-Sr和Sit-S在1～20 mg/kg的劑量范圍內(nèi)均有一定的抗抑郁樣活性，故本研究初步選取2.5、10 mg/kg作為給藥劑量，考察Sit及其4種衍生物的抗抑郁活性。分別取2批小鼠（每批88只），均隨機分為空白對照組（10%丙二醇溶液）和Sit及其4個衍生物（Sit-T、Sit-P、Sit-Sr、Sit-S）的低、高劑量組（劑量均為2.5、10 mg/kg，以10%丙二醇溶液為溶劑溶解），每組8只。各組小鼠均腹腔注射給藥，給藥體積均為1.0 mL。給藥1 h后，各取1批小鼠分別進行懸尾實驗和強迫游泳實驗[16-17]。（1）懸尾實驗：將小鼠的尾巴懸掛固定在一個距離地面約40 cm的水平桿上，小鼠頭部朝下呈倒懸狀。每只小鼠均用不透明的硬紙板隔開，小鼠距離其周圍空間不少于15 cm。觀察小鼠的扭攀掙扎情況，當其四肢靜止不動時，記錄其不動時間。（2）強迫游泳實驗：將小鼠單獨放置在一個水位高15 cm的開放型玻璃瓶（14 cm×30 cm×25 cm）內(nèi)，水溫為（24±2） ℃。從小鼠入水后開始計時，總實驗時間為6 min，記錄后4 min內(nèi)小鼠的持續(xù)不動時間（即小鼠在水中停止掙扎或呈漂浮狀態(tài)，僅使頭部露出水面的不動時間）。上述不動時間越長，表明小鼠抑郁狀況越嚴重。采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析，結(jié)果以x±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。各組小鼠懸尾實驗和強迫游泳實驗的不動時間測定結(jié)果見表1。

結(jié)果顯示，與空白對照組比較，Sit低劑量組，Sit-T低劑量組，Sit-P低、高劑量組，Sit-Sr低劑量組和Sit-S低、高劑量組小鼠在懸尾實驗中的不動時間顯著縮短（P<0.05或P<0.01），而Sit高劑量組小鼠在懸尾實驗中的不動時間顯著延長（P<0.05）;Sit-T低劑量組，Sit-Sr低劑量組和Sit-S低、高劑量組小鼠在強迫游泳實驗中的不動時間顯著縮短（P<0.05）。結(jié)果提示，衍生物Sit-S對小鼠不動時間影響最為顯著，故后續(xù)研究中重點對Sit-S的抗抑郁作用進行考察。

2.6 Sit-S抗抑郁有效劑量的篩選

分別另取2批小鼠（每批48只），均隨機分為空白對照組（10%丙二醇溶液）和Sit-S不同劑量組（0.5、1、2、4、6 mg/kg，以10%丙二醇溶液為溶劑制備），每組8只。各組小鼠均腹腔注射給藥，給藥體積均為1.0 mL。給藥1 h后，各取1批小鼠分別進行懸尾實驗和自發(fā)運動能力測試實驗[18]。（1）懸尾實驗：方法同“2.5”項下，測定各組小鼠的不動時間。（2）自發(fā)運動能力測試實驗：將小鼠放置于小鼠自主活動測試儀器中，觀察每只小鼠在黑暗、安靜的環(huán)境中的自發(fā)運動活性。在小鼠適應3 min后，觀察并記錄其在后續(xù)4 min內(nèi)的自主活動次數(shù)。按照“2.5”項下統(tǒng)計學方法進行數(shù)據(jù)分析。各組小鼠的不動時間和4 min內(nèi)的自主活動次數(shù)測定結(jié)果見表2。

結(jié)果顯示，與空白對照組比較，2、4、6 mg/kg Sit-S組小鼠的不動時間均顯著縮短（P<0.05或P<0.01），而4 min內(nèi)的活動次數(shù)差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。這提示，2、4、6 mg/kg劑量下，Sit-S具有較好的抗抑郁作用，并且不會影響小鼠的自主活動，其中以4 mg/kg劑量的效果最好，故本項目組后續(xù)選擇此劑量進行作用機制研究。

2.7 Sit-S抗抑郁作用的機制研究

將剩余40只小鼠隨機分為空白對照組（10%丙二醇溶液）、Sit-S組（4 mg/kg，以10%丙二醇溶液為溶劑制備）、荷包牡丹堿+Sit-S組[4 mg/kg荷包牡丹堿（競爭性GABA 拮抗劑）+4 mg/kg Sit-S]、阿戈美拉汀+Sit-S組[40 mg/kg阿戈美拉汀（5-HT和5-HT 2C受體拮抗劑）+4 ?mg/kg Sit-S]、氟哌啶醇+Sit-S組[0.2 mg/kg氟哌啶醇（非選擇性D2受體拮抗劑）+4 mg/kg Sit-S]，每組8只。3種拮抗劑的給藥劑量均按照臨床成人用量換算而得。各組小鼠均腹腔注射給藥，給藥體積均為1.0 mL。給藥60 min后，按“2.5”項下方法進行懸尾實驗，測定其不動時間。懸尾實驗結(jié)束后，將小鼠脫頸處死，于無菌操作臺上取出其腦組織，用生理鹽水沖洗干凈，稱質(zhì)量，并加入約9倍體積（mL/g）的生理鹽水，勻漿，然后以10 000 ?r/min離心10 min，取上清液，在-80 ℃條件下凍存，待測。采用ELISA法測定小鼠腦組織中5-HT、DA、GABA水平，具體操作嚴格按照相應試劑盒說明書進行。按照“2.5”項下方法進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。各組小鼠不動時間和腦組織中5-HT、DA、GABA水平測定結(jié)果見表3。

結(jié)果顯示，與空白對照組比較，Sit-S組小鼠的不動時間顯著縮短（P<0.01），腦組織中5-HT、DA、GABA水平顯著升高（P<0.05或P<0.01）。與Sit-S組比較，3種抑制劑聯(lián)用組小鼠的不動時間均有一定延長，其中阿戈美拉汀+Sit-S組、氟哌啶醇+Sit-S組的不動時間顯著延長（P<0.05），并且阿戈美拉汀+Sit-S組的5-HT水平、氟哌啶醇+Sit-S組的DA水平和荷包牡丹堿+Sit-S組的GABA水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01）。

3 討論

本研究以百花花楸干燥成熟果實為材料，經(jīng)過75%乙醇和20%KOH溶液提取，并經(jīng)萃取、結(jié)晶得到了Sit。為提高Sit 的生物利用度和藥理活性，本項目組對Sit進行了衍生化，最終得到了Sit-T、Sit-P、Sit-Sr、Sit-S等4種酯類衍生物，并通過NMR和IR法驗證了各衍生物的結(jié)構(gòu)。同時，采用懸尾實驗和強迫游泳實驗對Sit及其衍生物的抗抑郁活性進行了篩選。結(jié)果表明，Sit的水楊酸酯衍生物Sit-S（4 mg/kg）可顯著縮短懸尾實驗和強迫游泳實驗中的小鼠不動時間，表現(xiàn)出優(yōu)良的抗抑郁活性。此外，為了排除小鼠不動時間的減少是由于藥物對其運動能力的影響所致，本研究還進行了小鼠自發(fā)運動能力測試實驗，結(jié)果顯示Sit-S不影響小鼠的自發(fā)活動。

5-HT不但可以與腦組織中的其他中樞神經(jīng)相互作用，參與機體對外界刺激的適應和調(diào)節(jié)，而且也是情緒、睡眠和其他生理活動的重要調(diào)節(jié)因子，5-HT水平的增加對抑郁癥的恢復具有積極的作用[19-21]。本研究發(fā)現(xiàn)，Sit-S給藥后可明顯升高小鼠腦組織中5-HT水平，但聯(lián)用阿戈美拉汀（5-HT受體拮抗劑）后，可以有效逆轉(zhuǎn)Sit-S的這種作用，表明Sit-S可通過5-HT途徑發(fā)揮其抗抑郁作用。DA受體廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，其中D2受體是DA參與抑郁生物調(diào)控的重要物質(zhì)，在抑郁癥的發(fā)生和恢復中也起著至關(guān)重要的作用[22-24]。有研究表明，重癥抑郁患者的下丘腦組織中DA含量極少，給予抗抑郁藥物治療后，其DA水平開始上調(diào)，同時功能也趨于正常[25]。本研究發(fā)現(xiàn)，給予Sit-S后可顯著升高小鼠腦組織中DA水平，但聯(lián)用氟哌啶醇（非選擇性D2受體拮抗劑）后，能明顯消除Sit-S的抗抑郁作用。該結(jié)果證實了Sit-S的抗抑郁作用是由D2受體的激活所引起的。GABA是神經(jīng)元傳遞信息電路中重要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，當其與GABA受體（GABARs）結(jié)合后，會促進電路中Cl-流出、Ca2+流入，從而強化神經(jīng)元樹突生長和突觸發(fā)生，這一功能保證了細胞間興奮性信息的成功傳遞[26-27]。因此，補充GABA含量可以有效減輕抑郁癥。本研究發(fā)現(xiàn)，給予Sit-S后可顯著升高小鼠腦組織中GABA水平，而聯(lián)用荷包牡丹堿（抑制性神經(jīng)遞質(zhì) GABA拮抗劑）后，可一定程度上逆轉(zhuǎn)Sit-S的抗抑郁作用，但是作用不顯著。該結(jié)果提示Sit-S的抗抑郁樣作用可能部分由GABA能系統(tǒng)介導的。

綜上，本研究成功從百花花楸果實中分離、制備了Sit，并合成了4種酯類衍生物。其中，Sit與水楊酸經(jīng)羧合反應得到的酯類衍生物Sit-S具有良好的抗抑郁活性，其作用機制可能是通過提高腦組織中5-HT、DA和GABA水平所介導的。

參考文獻

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