鄭 玲，王朋林，陳凱麗，劉林科，王榮軍，張龍現(xiàn)，寧長(zhǎng)申，菅復(fù)春

(河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院，河南鄭州 450002)

我國(guó)羊品種資源豐富，在全國(guó)各地區(qū)均有分布。近年來(lái)，隨著現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整，科技的進(jìn)步和市場(chǎng)需求的增加，我國(guó)養(yǎng)羊業(yè)得到迅速發(fā)展[1]，養(yǎng)羊已成為農(nóng)牧民增收的重要途徑之一。然而羊腸道寄生蟲(chóng)感染情況較為普遍，且被感染羊的臨床癥狀并不明顯，所以很容易被人們忽視，羊群感染寄生蟲(chóng)后，一般情況下只有少數(shù)羊表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀[2]，大部分羊往往呈慢性消耗性經(jīng)過(guò)，造成飼料轉(zhuǎn)換率降低，隱形飼養(yǎng)成本增加。為了解我國(guó)部分地區(qū)羊腸道寄生蟲(chóng)感染情況，探討分析羊腸道寄生蟲(chóng)的流行特征，減少腸道寄生蟲(chóng)對(duì)羊群的侵害，保護(hù)養(yǎng)羊業(yè)的健康發(fā)展，本研究于2017年6月至2018 年12月采集了我國(guó)部分地區(qū)的羊糞便樣品，并對(duì)樣品中的寄生蟲(chóng)感染情況進(jìn)行調(diào)查，旨在為我國(guó)羊腸道寄生蟲(chóng)的防控提供參考依據(jù)，推動(dòng)我國(guó)養(yǎng)羊業(yè)健康發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品來(lái)源 2017年6月至2018年12月對(duì)河南、陜西、遼寧、內(nèi)蒙古、貴州、新疆6省(自治區(qū))放牧或舍飼羊群隨機(jī)采集糞便樣品935份，其中陜西68份，河南292份，遼寧35份，內(nèi)蒙23份，貴州108份，新疆409份。每份樣品采集10 g～20 g，采集后保存于潔凈自封袋中，記錄其采集地點(diǎn)，采樣時(shí)間，臨床癥狀等樣品信息。將采集好的樣品帶回實(shí)驗(yàn)室，保存于4 ℃冰箱備檢。

1.1.2 主要儀器設(shè)備 低速自動(dòng)平衡臺(tái)式離心機(jī)(H1650-W)，杭州哈析儀器儀表有限公司產(chǎn)品；電子天平(AB204-N)、架盤(pán)藥物天平(JYT-10)，天津市德安特傳感技術(shù)有限公司產(chǎn)品；微分干涉顯微鏡(DP73)，歐聯(lián)自動(dòng)化設(shè)備有限公司產(chǎn)品；高壓蒸汽滅菌器(MLS-3750)，廣東精譜實(shí)業(yè)有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 離心沉淀法 稱(chēng)取糞便樣品5 g～10 g置于燒杯中，加35 mL蒸餾水后充分浸泡，用60目銅篩過(guò)濾，濾液置離心管中，3 500 r/min離心5 min，棄去上清液體，用玻璃棒挑取少許沉淀，均勻涂布在載玻片上，加入蓋玻片后在100倍、400倍顯微鏡下觀察。此類(lèi)方法主要用于用于檢查吸蟲(chóng)卵、線(xiàn)蟲(chóng)卵等。

1.2.2 盧戈氏碘液染色法 用滴管吸取1滴～2滴盧戈氏碘液放于載玻片上，用玻璃棒蘸取經(jīng)離心沉淀后的糞便樣品少許，涂布于載玻片上，使其與碘液混合均勻，蓋上蓋玻片在400倍顯微鏡下觀察。本方法主要適用于檢查賈第蟲(chóng)包囊和阿米巴包囊。

1.2.3 飽和蔗糖溶液漂浮法 取5 g～10 g新鮮糞便置燒杯中，加入35 mL蒸餾水后充分浸泡，將糞液攪拌至混勻后，用60目銅篩過(guò)濾到50 mL離心管中,3 500 r/min離心5 min，棄去上清液，向沉淀中加入30 mL飽和蔗糖溶液，充分?jǐn)噭蚝螅? 500 r/min離心15 min,用鐵絲吊環(huán)圈輕輕蘸取表層液體于液于潔凈的載玻片上，加蓋玻片后置400倍顯微鏡下觀察。本方法適用于檢查隱孢子蟲(chóng)卵囊、環(huán)孢子蟲(chóng)卵囊、線(xiàn)蟲(chóng)卵及球蟲(chóng)卵囊等[3-5]。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用 SPSS 21.0 軟件采用 χ2檢驗(yàn)比較不同地區(qū)羊腸道寄生蟲(chóng)感染率的差異。當(dāng)P>0.05，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異不顯著；當(dāng)P<0.05，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著；當(dāng)P<0.01，為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 羊腸道寄生蟲(chóng)總體感染情況

采用顯微鏡檢測(cè)法，對(duì)本次研究中采集的935份羊糞便樣品進(jìn)行觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，總感染率為83.9%(784/935)。共檢出7類(lèi)寄生蟲(chóng)(部分蟲(chóng)卵或卵囊見(jiàn)圖1)，其中艾美耳球蟲(chóng)和阿米巴原蟲(chóng)為感染優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種，感染率分別為 81.1%(758/935)和11.2%(105/935)，毛首線(xiàn)蟲(chóng)、類(lèi)圓線(xiàn)蟲(chóng)、細(xì)頸線(xiàn)蟲(chóng)、莫尼茨絳蟲(chóng)、歧腔吸蟲(chóng)的感染率分別為3.2%(30/935)、9.2%(86/935)、0.4%(4/935)、2.4%(22/935)和0.1%(1/935)(表1)。

A.細(xì)頸線(xiàn)蟲(chóng)蟲(chóng)卵;B.艾美耳球蟲(chóng)卵囊;C.歧腔吸蟲(chóng)卵;D.毛首線(xiàn)蟲(chóng)蟲(chóng)卵;E.貝氏莫尼茨絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵;F.類(lèi)圓線(xiàn)蟲(chóng)蟲(chóng)卵G.阿米巴包囊;H.擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵A.Nematodirus egg;B.Eimeria oocyst;C.Egg of Dicrocoelium; D.Egg of Trichocephalus spp;E.Moniezia benedeni egg;F.Strongyloides egg;G.Cyst of Amoeba sp;H.Moniezia expansa egg

表1 我國(guó)部分地區(qū)羊腸道寄生蟲(chóng)感染情況

2.2 羊腸道寄生蟲(chóng)混合感染情況

935份樣品中有166份樣品混合感染了2～4種腸道寄生蟲(chóng)，混合感染率為17.8%(166/935)。其中同時(shí)感染2種寄生蟲(chóng)的占混合感染的74.7%(124/166)，尤以球蟲(chóng)和阿米巴混合感染最為常見(jiàn)。同時(shí)感染3種寄生蟲(chóng)的占混合感染的20.5%(34/166)，以球蟲(chóng)、阿米巴原蟲(chóng)、類(lèi)圓線(xiàn)蟲(chóng)混合感染為主。同時(shí)感染4種寄生蟲(chóng)的占混合感染的比例為5.4%(9/166)。以球蟲(chóng)、阿米巴原蟲(chóng)、類(lèi)圓線(xiàn)蟲(chóng)、毛首線(xiàn)蟲(chóng)最為常見(jiàn)。

2.3 不同地域羊腸道寄生蟲(chóng)感染情況

本次采樣地點(diǎn)共涉及河南、貴州、陜西、遼寧、內(nèi)蒙古、新疆6個(gè)省(自治區(qū))，以陜西省和遼寧省羊腸道寄生蟲(chóng)感染率最高，均達(dá)到100%。河南省次之，感染率為92.1%(269/292)，新疆地區(qū)的感染率最低，為75.5%(309/409)。內(nèi)蒙和貴州的感染率分別為87.0%(20/23)和79.6%(86/108)。河南歧腔吸蟲(chóng)的感染率為0.3%，其他地區(qū)未檢測(cè)出歧腔吸蟲(chóng)。

2.4 不同氣候條件下羊腸道寄生蟲(chóng)感染情況

本次采樣地點(diǎn)涉及我國(guó)具有明顯氣候特征差異的4個(gè)地區(qū)，即西北地區(qū)、東北地區(qū)、中部地區(qū)及西南地區(qū)[6]。中部地區(qū)和東北地區(qū)寄生蟲(chóng)總感染率較高，分別為93.6%和94.8%。西南地區(qū)和西北地區(qū)總感染率相似，分別為79.6%和75.5%。不同氣候特征下各地區(qū)寄生蟲(chóng)感染情況見(jiàn)表2。

表2 不同氣候條件下羊腸道寄生蟲(chóng)感染情況

3 討論

本研究對(duì)我國(guó)6個(gè)省(自治區(qū))的12個(gè)羊場(chǎng)的羊腸道寄生蟲(chóng)感染情況進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果顯示羊腸道寄生蟲(chóng)總體感染率為 83.9%(784/935)，這一結(jié)果明顯高于安徽及周邊地區(qū)羊腸道寄生蟲(chóng)54.99%的感染率[7]，低于鄭雙鍵等[8]、溫海燕等[9]報(bào)道的甘肅和山東菏澤羊腸道寄生蟲(chóng)的感染率(分別為94.35%和100%)，與甘肅地區(qū)和河南開(kāi)封地區(qū)[10]感染的優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種相同，均為阿米巴原蟲(chóng)和艾美耳球蟲(chóng)。本次調(diào)查只在河南檢出歧腔吸蟲(chóng)，根據(jù)以往對(duì)安徽、河南、江蘇和山東部分地區(qū)[11]羊腸道寄生蟲(chóng)感染情況調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，也僅在安徽和河南地區(qū)發(fā)現(xiàn)了吸蟲(chóng)感染的情況，安徽和河南在地理位置上處于相鄰的接壤關(guān)系，具有相似的地理環(huán)境和氣候特征，均呈現(xiàn)夏季雨水充沛的氣候特點(diǎn)，便于吸蟲(chóng)的中間宿主陸地螺和補(bǔ)充宿主螞蟻的繁衍，在放牧羊群吃草時(shí)，易將含有囊蚴的螞蟻食入而感染[12]。為減少羊群感染吸蟲(chóng)的機(jī)會(huì)，應(yīng)至少在初冬和春、夏各進(jìn)行一次驅(qū)蟲(chóng)。放牧?xí)r，也盡量選擇地勢(shì)高且干燥的草地放牧。

由統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示，6個(gè)不同省(自治區(qū))間羊腸道寄生蟲(chóng)感染情況差異顯著(P<0.01)。可能是由于我國(guó)地域遼闊，各省(自治區(qū))之間存在明顯的地理環(huán)境差異，各場(chǎng)區(qū)之間養(yǎng)殖水平和飼養(yǎng)管理模式也存在較大差別[13]。在我國(guó)具有典型氣候特征的4個(gè)地區(qū)中，西北地區(qū)寄生蟲(chóng)總體感染率最低，可能由于西北地區(qū)氣候較其他地區(qū)，氣候干燥，降雨量少，較其他地區(qū)，不利于寄生蟲(chóng)的生長(zhǎng)繁殖，而中部地區(qū)和西南地區(qū)空氣潮濕，夏季降雨量集中，符合寄生蟲(chóng)生長(zhǎng)所需環(huán)境需求，寄生蟲(chóng)感染率相對(duì)更高。而東北地區(qū)雖然降雨量不多，但蒸發(fā)少，空氣濕潤(rùn)度較高，同樣有利于寄生蟲(chóng)的生活繁殖。

對(duì)我國(guó)新疆、內(nèi)蒙古、遼寧等6省(自治區(qū))羊腸道寄生蟲(chóng)流行病學(xué)調(diào)查共發(fā)現(xiàn)7類(lèi)寄生蟲(chóng)，總感染率達(dá)83.9%。中部和東北地區(qū)寄生蟲(chóng)總感染率較西南和西北地區(qū)高，不同地區(qū)和地理環(huán)境下寄生蟲(chóng)感染率差異明顯。表明我國(guó)肉羊腸道寄生蟲(chóng)病現(xiàn)狀不容樂(lè)觀，仍需加強(qiáng)羊腸道寄生蟲(chóng)病的防控。