何登坤，朱 夢(mèng)，朱 蕊

(江蘇九旭藥業(yè)有限公司，221200，江蘇，徐州)

0 引言

鹽酸丁卡因化學(xué)名為4-(丁氨基)-苯甲酸-2-(二甲氨基)乙酯鹽酸鹽，主要用于表面麻醉。在鹽酸丁卡因制備的過(guò)程中，使用了甲苯、乙醇和丙酮等有機(jī)溶劑，但甲苯中可能存在苯，而這些溶劑在藥物中殘留會(huì)增加藥品的毒副作用，因此需要對(duì)藥品在生產(chǎn)中引入的殘留溶劑進(jìn)行檢測(cè)[1]，以保證藥品的安全性。

目前，對(duì)于有機(jī)殘留溶劑的檢測(cè)，有GC法[2-7]、GC-MS法[8]。有文獻(xiàn)報(bào)道使用頂空-氣相色譜法[9]對(duì)鹽酸丁卡因中可能存在的殘留溶劑進(jìn)行檢測(cè)。

為了控制本品的質(zhì)量，保證藥品的療效與安全，本研究結(jié)合制備工藝，根據(jù)ICH Q3C(R7)及2020版中國(guó)藥典通則[10]中對(duì)殘留溶劑的進(jìn)行控制，用頂空-氣相色譜法對(duì)本品中可能存在的甲苯、苯、乙醇和丙酮有機(jī)溶劑的殘留量進(jìn)行了測(cè)定。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 7890B型氣相色譜儀(安捷倫科技有限公司)，梅特勒XSE205DU電子天平(梅特勒-托利多儀器(中國(guó))有限公司)，DB-624毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.32 mm×1.8 μm)。苯(分析純，西隴化工股份有限公司)、甲苯(分析純，西隴化工股份有限公司)、丙酮(分析純，西隴化工股份有限公司)、無(wú)水乙醇(分析純，安徽安特食品股份有限公司)，DMSO(頂空色譜級(jí)，Scharlau)和超純水(自制)。

1.2 溶液的配制

混合對(duì)照品儲(chǔ)備溶液：精密稱(chēng)取苯約200 mg，置于10 mL容量瓶中，用DMSO稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL置100 mL容量瓶中，用DMSO稀釋至刻度，搖勻，作為苯儲(chǔ)備液。分別稱(chēng)取甲苯約89 mg，乙醇約500 mg、丙酮約500 mg，精密稱(chēng)定，同置于100 mL容量瓶中，再精密加入苯儲(chǔ)備液1 mL，用DMSO至刻度，搖勻，制得每1 mL中含有苯2 g，甲苯890 g，乙醇5 mg，丙酮5 mg的混合對(duì)照品儲(chǔ)備液。

混合對(duì)照品溶液：精密移取混合對(duì)照品儲(chǔ)備液5 mL置50 mL容量瓶中，用DMSO稀釋至刻度，搖勻，即得100%混合對(duì)照品溶液；分別量取7.5 mL、6 mL、4 mL、2.5 mL和1 mL的混合對(duì)照品儲(chǔ)備液置50 mL容量瓶中，用DMSO稀釋至刻度，搖勻，即得150%、120%、80%、50%和20%混合對(duì)照品溶液。

供試品溶液：取鹽酸丁卡因約0.5 g，精密稱(chēng)定，置20 mL頂空瓶中，精密加入二甲基亞砜5 mL，壓蓋密封，即得。

1.3 色譜條件

采用DB-624毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.32 mm×1.8 μm)，F(xiàn)ID檢測(cè)器，進(jìn)樣口溫度200 ℃，檢測(cè)器溫度250 ℃，柱溫：以40 ℃為起始溫度，保持6 min，以5 ℃/min升溫速度升溫至70 ℃，保持4 min，再以20 ℃/min的升溫速度升溫至200 ℃，保持2 min。頂空進(jìn)樣瓶平衡溫度為90 ℃，平衡時(shí)間為15 min。載氣流速:1.5 mL/min，分流比為10:1，進(jìn)樣量：1 mL。

2 結(jié)果與討論

2.1 專(zhuān)屬性

分別取空白溶液、100%混合對(duì)照品溶液各5 mL置20 mL頂空瓶中，壓蓋，按色譜條件測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)圖1。各色譜峰出峰順序依次為乙醇、丙酮、苯和甲苯，從色譜圖可以看出，空白溶劑對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，各殘留溶劑之間的分離度均大于1.5，符合要求。

(a)空白溶液

2.2 檢測(cè)限與定量限

取100%混合對(duì)照品溶液，用DMSO逐步稀釋?zhuān)凑丈V條件檢測(cè)，以約3倍信噪比為檢測(cè)限濃度(S/N=3)，以約10倍信噪比為定量限濃度(S/N=10)。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 檢測(cè)限與定量限的結(jié)果

2.3 線性與范圍

取2.2項(xiàng)下的定量限溶液20%、50%、80%、100%、150%的6個(gè)濃度作為線性溶液，按“1.3色譜條件”測(cè)定，以峰面積-濃度作圖，考察各組分的線性關(guān)系。具體結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 線性方程及相關(guān)系數(shù)

由表2可知，乙醇、丙酮、苯和甲苯在一定濃度范圍內(nèi)具有良好的線性，其相關(guān)系數(shù)R2均大于0.999。

2.4 重復(fù)性

稱(chēng)取6份鹽酸丁卡因0.5 g，置20 mL頂空瓶中，加入100%混合對(duì)照品溶液5 mL，壓蓋，即得100%加標(biāo)供試品溶液(因供試品溶液中，乙醇、丙酮、苯和甲苯的含量均低于定量限，所以采用100%加標(biāo)供試品溶液測(cè)定)，按色譜條件檢測(cè)。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 重復(fù)性結(jié)果

由表3可知，6份100%加標(biāo)供試品溶液中各溶劑含量的RSD均小于5%，符合要求。

2.5 回收率

稱(chēng)取鹽酸丁卡因0.5 g，共9份，置20 mL頂空瓶中，分別加入80%、100%和120%混合對(duì)照品溶液各5 mL，壓蓋，每個(gè)濃度加標(biāo)溶液平行制備3份。在色譜條件下測(cè)定，計(jì)算結(jié)果。結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 回收率試驗(yàn)結(jié)果

由表4可知：平均回收率在93.1%～103.3%，RSD在2.1%～4.9%，表明方法有較高的準(zhǔn)確度。

2.6 樣品分析

取3批樣品按色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明：3批樣品中均未檢出苯、甲苯和乙醇，丙酮結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 樣品分析結(jié)果

3 討論

頂空-氣相色譜法測(cè)定殘留溶劑時(shí)，通常以水為溶劑，但本文測(cè)定的殘留溶劑中苯和甲苯不溶于水，故選擇N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亞砜(DMSO)作為溶劑進(jìn)行測(cè)定。因?yàn)镈MSO的毒性小于DMF，且對(duì)樣品的測(cè)定無(wú)干擾，故本研究選擇DMSO作為溶劑測(cè)定。本研究所建立的頂空-氣相色譜法測(cè)定鹽酸丁卡因中4中殘留溶劑的殘留量，該方法的專(zhuān)屬性強(qiáng)，靈敏度高和準(zhǔn)確性好，能滿(mǎn)足藥物分析的要求。