吳剛強(qiáng) 毛 葉 溫小鳳 譚 軍 卜獻(xiàn)春

(湖南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院內(nèi)分泌老年病科，長沙市 410006,電子郵箱：wugq2011@126.com)

近年來，隨著人們生活水平的提高和飲食結(jié)構(gòu)的改變，糖尿病的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢[1]。目前現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對糖尿病的研究取得了較大進(jìn)展，胰島素抵抗仍然被認(rèn)為是2型糖尿病發(fā)病的中心環(huán)節(jié)。近年來，西醫(yī)的新藥物的不斷研發(fā)使得2型糖尿病的治療出現(xiàn)了新的轉(zhuǎn)機(jī)，但由于其副作用大、價格昂貴、容易引起低血糖反應(yīng)、不易操作等特點(diǎn)，限制了其廣泛應(yīng)用。最近研究表明[2]，中醫(yī)藥治療2型糖尿病取得了較好的成果，在增強(qiáng)療效、緩解癥狀、改善患者的生活質(zhì)量、延長壽命、減少不良反應(yīng)等方面顯示了較大的優(yōu)勢。滋膵通脈飲為本院卜獻(xiàn)春主任醫(yī)師經(jīng)驗(yàn)方，前期臨床研究顯示[3]，該方治療糖尿病患者療效確切，不僅能降低血糖和超敏C反應(yīng)蛋白水平，而且還能改善胰島素抵抗。本研究采用高脂飼料飲食加注射鏈脲佐菌素的方法建立2型糖尿病大鼠模型，探討滋膵通脈飲降低血脂血糖和改善胰島素抵抗的效果，為臨床研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 45只清潔級SD大鼠，體重200～220 g，由湖南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，許可證號SCXK(湘)2016-0002～2019-0004，常規(guī)條件飼養(yǎng)，室溫20℃～27℃，濕度50%～60%。

1.2 動物造模 45只大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后按體重編號，采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)抽取10只作為空白對照組，給予普通飼料喂養(yǎng)。剩余35只給予高脂飼料飲食(豬油10%、膽固醇2%、膽酸鹽0.5%、蔗糖20%、普通飼料67.5%)，連續(xù)喂養(yǎng)4周，建立胰島素抵抗模型。隨后給予大鼠隔夜禁食(不禁水)12 h以上，將鏈脲佐菌素(上海阿拉丁生化科技股份有限公司)溶入配好的0.1 mmol/L檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖液(pH=4.3)中，將其以30 mg/kg注入大鼠腹腔內(nèi)，單次注射，建立2型糖尿病大鼠模型，而空白對照組給予腹腔注射等量(0.1 mmol/L)檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖液。造模3 d后大鼠禁食(不禁水)8 h以上，檢測空腹血糖，若空腹血糖>11.1 mmol/L為模型制備成功[4]。造模過程中大鼠死亡4只，最終造模成功31只。造模成功后再繼續(xù)給予大鼠高脂飼養(yǎng)2周以強(qiáng)化胰島素抵抗模型[5]。

1.3 藥物 (1)滋膵通脈飲：由湖南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院藥劑科生產(chǎn)，主要由黃芪、生地、麥冬、玄參、山茱萸、天花粉、地龍、生蒲黃、丹參、川芎、鬼箭羽、全蝎、水蛭、僵蠶、山楂等藥物組成。將上述藥物按照適當(dāng)比例配置，加水提取2次。一煎加8倍量水提取1.5 h；二煎加6倍量水提取1 h；合并提取液，過濾，濃縮，微波真空干燥制成干浸膏，粉碎制粒，加適量糊精，制成顆粒劑，60℃以下干燥整粒成成品，4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?2)羅格列酮片：生產(chǎn)企業(yè)為葛蘭素史克(天津)有限公司，國藥準(zhǔn)字20H450072，規(guī)格4 mg/片。

1.4 動物分組和給藥 采用隨機(jī)數(shù)字表，從造模成功的大鼠中隨機(jī)抽取30只，并分為模型組、滋膵通脈飲組和羅格列酮組，每組10只。于實(shí)驗(yàn)第7周開始灌胃給藥，滋膵通脈飲組灌服滋膵通脈飲，生藥量為17.6 g/kg；羅格列酮組灌服羅格列酮混懸液(灌胃前將其碾碎，用生理鹽水配置成羅格列酮混懸液)按0.42 mg/(kg·d)給藥；空白對照組和模型組均灌服同等體積的蒸餾水。各組均每天上午灌胃，1次/d，共用藥4周。以上計(jì)量均按60 kg成人體表面積換算，灌胃容量為10 mL/kg體重。

1.5 觀察指標(biāo) 用藥4周后，大鼠尾靜脈采血1 mL，室溫血液自然凝固10～20 min后，離心20 min左右(2 000～3 000 r/min)，收集上清。檢測血清膽固醇、三酰甘油、LDL水平，以及空腹血糖、空腹胰島素，計(jì)算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗(homeostasis model assessment for insulin resistance,HOMA-IR)指數(shù)[(空腹血糖×空腹胰島素)/22.5]。血清膽固醇、三酰甘油酶聯(lián)免疫分析檢測試劑盒均由Sigma公司生產(chǎn)(商品編號：M3128、T740-5g)，LDL酶聯(lián)免疫分析檢測試劑盒由Abcam公司生產(chǎn)(商品編號：Ab3107)，大鼠胰島素酶聯(lián)免疫分析試劑盒購自上海信帆生物科技有限公司(規(guī)格96T)，血糖儀購自三諾生物傳感股份有限公司。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以(x±s)表示，組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t法或Dunnett法。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 4組大鼠空腹血糖、空腹胰島素、HOMA-IR指數(shù)比較 與空白對照組比較，其他各組空腹血糖、空腹胰島素水平和HOMA-IR指數(shù)均升高(均P<0.05)；與模型組比較，滋膵通脈飲組和羅格列酮組空腹血糖、空腹胰島素水平和HOMA-IR指數(shù)降低(均P<0.05)；而滋膵通脈飲組和羅格列酮組之間以上指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。見表1。

表1 4組大鼠空腹血糖、空腹胰島素、HOMA-IR指數(shù)比較(x±s)

2.2 4組大鼠血脂水平比較 與空白對照組比較，其他各組膽固醇、三酰甘油和LDL水平升高(均P<0.05)；滋膵通脈飲組膽固醇、三酰甘油和LDL水平均低于模型組(均P<0.05)，而羅格列酮組和模型組以上指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)；滋膵通脈飲組三酰甘油水平低于羅格列酮組(P<0.05)。見表2。

表2 4組大鼠血脂水平比較(x±s，mmol/L)

3 討 論

糖尿病是一種以慢性高血糖為特點(diǎn)的代謝紊亂。近年來，胰島素抵抗是2型糖尿病及多種代謝性疾病發(fā)生和發(fā)展的中心環(huán)節(jié)。而胰島素在體內(nèi)對血糖起著負(fù)向調(diào)節(jié)作用，在正常情況下其隨著血糖的波動而有一定的起伏。胰島素增敏劑羅格列酮是治療糖尿病的一種藥物，它通過增加胰島素的敏感性而降低血糖，對于胰島素抵抗的2型糖尿病患者有一定療效。本研究結(jié)果顯示，羅格列酮組大鼠空腹血糖、空腹胰島素水平和HOMA-IR指數(shù)均低于模型組(均P<0.05)，說明其對血糖和胰島素的調(diào)節(jié)均有一定的作用。但該藥副作用大，易導(dǎo)致水鈉潴留、骨折、增加體重、加重心衰，限制了其臨床的廣泛應(yīng)用。最近研究表明，中醫(yī)藥治療2型糖尿病療效確切，不僅能降低血糖、改善胰島素抵抗，而且還能減少炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)血脂代謝紊亂，且副作用少，療效確切[6-8]。

滋膵通脈飲方系《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》“滋膵飲”加活血通絡(luò)藥物組成。方中生地、麥冬、玄參、山茱萸、天花粉可以滋養(yǎng)五臟之陰，生津潤燥，現(xiàn)代藥理研究顯示，山茱萸的有效成分山茱萸總萜能調(diào)節(jié)糖尿病小鼠體內(nèi)糖脂代謝過程，對糖尿病有治療作用[9]。玄參的有效成分玄參多糖對糖尿病大鼠有明顯的降低血糖作用[10]。方中丹參、川芎、生蒲黃、地龍、水蛭、鬼箭羽均可活血化瘀，其中鬼箭羽具有降糖、降脂、保護(hù)心腦血管作用[11]；丹參提取物丹參多酚酸鹽能降低糖尿病患者血糖，發(fā)揮血管保護(hù)作用，改善血管內(nèi)皮功能[12]。黃芪可以益氣升陽，助主藥活血通絡(luò)；佐以僵蠶、全蝎息風(fēng)通絡(luò)，山楂消食活血，同時防止滋陰活血藥物礙胃。研究顯示，山楂的有效成分山楂葉總黃酮有明顯降低糖尿病大鼠血脂血糖的作用，而且還能改善糖尿病大鼠的抗氧化能力[13]。全方具有益氣養(yǎng)陰、活血通絡(luò)之效。前期臨床研究表明，滋膵通脈飲不僅有明顯的降糖、降脂作用，而且治療糖尿病性冠心病療效顯著，能降低患者血液黏稠度、改善胰島素抵抗和臨床癥狀[14-15]。本研究結(jié)果顯示，滋膵通脈飲組的空腹血糖、空腹胰島素和HOMA-IR指數(shù)均低于模型組(P<0.05)，但與羅格列酮組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，提示中藥滋膵通脈飲能降低血糖、改善胰島素抵抗，且療效與羅格列酮相當(dāng)。此外，滋膵通脈飲組膽固醇、三酰甘油和LDL水平均低于模型組(均P<0.05)，且三酰甘油水平均低于羅格列酮組(P<0.05)，這與上述研究結(jié)果[14-15]相似，表明滋膵通脈飲還能降低糖尿病大鼠血脂水平，調(diào)節(jié)血脂代謝紊亂，且其療效明顯優(yōu)于羅格列酮。

綜上所述，滋膵通脈飲不僅能降低2型糖尿病大鼠空腹血糖、改善胰島素抵抗，還能調(diào)節(jié)血脂紊亂，至于其改善胰島素抵抗的具體機(jī)理還需要進(jìn)一步探討。