冀磊 鐘欣 杜燦 李國峰 李鴻娟 朱愛琴

AD是一種常見的老年神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。2020年AD報告[1]指出，美國65歲以上老年人有580萬人患有AD，到本世紀中葉預計將增長至1380萬。輕度認知障礙(mild cognitive impairment，MCI)作為正常衰老與早期癡呆之間的過渡階段，每年向癡呆的轉(zhuǎn)化率為8%～15%[2]，比正常人群高出近10倍。AD的發(fā)病機制復雜，且尚未明確，但越來越多的研究證實，AD的發(fā)生與神經(jīng)炎癥反應有關(guān)[3]。作為新型血管炎癥標志物的氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，ox-LDL)和髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)在高原地區(qū)藏、漢2個民族中與MCI和AD進程的關(guān)系未見報道，故本研究以此作為研究目的，旨在為今后高原人群預防AD提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象 入選對象均來自于青海省西寧地區(qū)(海拔2260 m)，在對當?shù)鼐幼?0年以上的藏、漢族城鎮(zhèn)居民進行的流行病學調(diào)查(2012～2015年)的基礎上，共選取180例進行研究，年齡60～85歲。其中藏、漢族MCI組和AD組各30例，藏、漢族正常對照(normal control，NC)組各30例。MCI病人符合Petersen診斷標準[4]：主訴或知情者報告有認知損害；神經(jīng)心理測試有一個或多個認知領域損害(執(zhí)行功能、記憶、語言或視空間)；日常生活能力正常，未達到癡呆診斷標準。AD病人均符合美國國家衰老研究所和阿爾茨海默病學會(NIA-AA)AD診斷的2011版核心標準[5]，并結(jié)合MMSE評分結(jié)果判斷。排除標準：(1)失語、行動不便、嚴重聽力或視力障礙者；(2)有精神病史者或智力發(fā)育遲緩者；(3)合并感染性疾病等嚴重內(nèi)科疾病者；(4)合并可引起腦功能障礙的神經(jīng)系統(tǒng)疾病如腦卒中、腦血管性癡呆、高血壓腦病和腦外傷等病人；(5)合并抑郁癥等精神類疾病病人；(6)拒絕參加本次試驗者。本研究已獲得青海省人民醫(yī)院倫理委員會審批同意。受試者及其監(jiān)護人同意參加本研究，均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 一般資料調(diào)查:制定統(tǒng)一的調(diào)查方法和調(diào)查問卷，并對調(diào)查員進行培訓，統(tǒng)一標準。采用問卷調(diào)查方式，記錄一般人口學資料，包括：年齡、性別、世居海拔、民族、認知狀態(tài)、日常生活能力、文化程度、居住地等。

1.2.2 神經(jīng)量表測定:采用MMSE進行認知功能評分，根據(jù)文盲、小學、中學、大學等不同的文化程度，分別以MMSE評分≤17、20、22、23分作為入選AD組的標準。

1.2.3 血液指標檢測：所有受試者空腹采集靜脈血。一部分血液以4000 r/min離心，分離血清，置于-70 ℃冰箱保存?zhèn)溆?；另一部分加入EDTA-Na2抗凝，分離血漿，檢測血常規(guī)。采用ELISA法測定血清ox-LDL和MPO的水平，嚴格按照各試劑盒說明書要求進行樣品處理、測定及質(zhì)量控制。所有試劑由上海瓦蘭生物科技有限公司(Wksu-BIO)供應。

2 結(jié)果

2.1 基線資料比較 6組在人口學特征(性別、年齡、受教育程度)、RBC、Hb、肌酐、BUN、FPG、TC、TG等指標上差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但6組在MMSE評分、PLT、β2微量球蛋白、LDL等指標上差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。進一步兩兩比較發(fā)現(xiàn)，PLT在漢族人群中以AD組最低，MCI組最高；相反，在藏族人群中以MCI組最低，而AD組最高。β2微量球蛋白在漢族MCI組最低，AD組次之；而在藏族人群中，NC組最低，MCI組次之。不論藏族還是漢族，LDL均以MCI組最低，AD組最高。見表1。

表1 研究人群基線資料比較

2.2 6組血清oxLDL、MPO水平比較Kruskal-Wallis結(jié)果顯示，6組間血清oxLDL和MPO水平差異均有統(tǒng)計學意義(χ2=39.746，P<0.001；χ2=13.039，P=0.023)。進一步兩兩比較發(fā)現(xiàn)，與漢族NC組相比，藏族NC組oxLDL水平顯著增高(P<0.05)；與藏族AD組比較，漢族AD組、藏族NC組和藏族MCI組的oxLDL水平顯著減低(P<0.01)；在漢族中，AD組MPO水平顯著高于NC組(P<0.05)；藏族中，AD組MPO水平顯著高于MCI組(P<0.01)。見表2。

表2 6組血清oxLDL、MPO水平比較[M(P25，P75)，n=30]

2.3 高原地區(qū)漢族血清oxLDL、MPO水平與MMSE評分的相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，oxLDL水平與MMSE評分呈負相關(guān)(r=-0.737，P<0.001)，MPO水平與MMSE評分無明顯相關(guān)性(P=0.062)。

2.4 高原地區(qū)藏族血清oxLDL、MPO水平與MMSE評分的相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，oxLDL評分與MMSE評分呈負相關(guān)(r=-0.794，P<0.001)，MPO水平與MMSE評分呈負相關(guān)(r=-0.742，P<0.001)。

2.5 高原地區(qū)漢族發(fā)生MCI和AD影響因素的多因素Logistic回歸分析 多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，血清oxLDL水平升高和高齡是高原地區(qū)漢族發(fā)生MCI的危險因素；oxLDL和LDL水平升高是漢族發(fā)生AD的危險因素。見表3。

表3 影響高原地區(qū)漢族發(fā)生MCI和AD的多因素Logistic回歸分析

2.6 高原地區(qū)藏族發(fā)生MCI和AD影響因素的多因素Logistic回歸分析 多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，oxLDL、MPO水平升高，β2微球蛋白>0.18μg/mL是高原地區(qū)藏族發(fā)生MCI的危險因素；oxLDL、MPO水平升高，受教育年限<6年、FPG>7.0 mmol/L是藏族發(fā)生AD的危險因素。見表4。

表4 影響高原地區(qū)藏族發(fā)生MCI和AD的多因素Logistic回歸分析

3 討論

隨著我國步入老齡化社會，AD發(fā)病率呈明顯上升趨勢。高原具有低氧、低氣壓、強輻射的氣候特點，研究發(fā)現(xiàn)，高海拔地區(qū)老年人AD的發(fā)病率較內(nèi)地明顯升高[6]，可能的機制與低氧和間歇性低氧環(huán)境作為重要的環(huán)境因素和許多小膠質(zhì)誘導的神經(jīng)炎癥的神經(jīng)退行病變有關(guān)[7]。樂衛(wèi)東教授課題組也發(fā)現(xiàn)低氧環(huán)境可能是AD發(fā)生的一個危險因素[8]。動物實驗證明，高壓氧治療可以降低3xTg-AD小鼠的神經(jīng)炎癥反應，并改善其行為表現(xiàn)[9]。oxLDL是由血漿中的LDL經(jīng)過氧化修飾形成的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，通過脂質(zhì)調(diào)節(jié)產(chǎn)生多種不同的寡聚物亞型，使β-淀粉樣蛋白(Aβ)生成增加[10]，加速AD的發(fā)生發(fā)展。MPO是一種過氧化物酶超家族亞鐵血紅素酶，廣泛存在于中性粒細胞和單核細胞中，具有過氧化物酶和溶酶體酶活性，能夠介導脂質(zhì)代謝、炎癥反應、氧化損傷等過程[11-12]。已有研究表明，MPO可能與多種神經(jīng)退行性疾病有關(guān)。Tzikas等[13]發(fā)現(xiàn)，AD病人血漿中MPO水平明顯高于健康對照人群，提示MPO可能參與MCI和AD的發(fā)生發(fā)展。由于單一標志物不可能真正涵蓋AD的全過程，因此聯(lián)合檢測這些生物標志物將更有助于篩選和保護易感人群。

藏族是青藏高原地區(qū)聚居的主要民族。藏族經(jīng)過長期的自然選擇，加之特殊文化生活方式，導致藏族很多疾病的發(fā)病率及其機制相較于其他民族有所不同。本研究通過比較180例藏、漢2個民族的血清oxLDL和MPO的水平發(fā)現(xiàn)，oxLDL和MPO在藏、漢族認知功能減退不同階段中有著不同的表現(xiàn)；此外，在正常老年人群中，藏族oxLDL水平高于漢族。但這些現(xiàn)象的背后尚需更大樣本的流行病學調(diào)查以及相關(guān)研究來解釋。

本研究的Spearman相關(guān)分析結(jié)果提示，oxLDL水平升高可加重藏、漢族認知功能損害的程度；在藏族中，隨著MPO水平的增加，MMSE評分越低，但在漢族中二者無相關(guān)性。多因素Logistic回歸分析結(jié)果提示，oxLDL水平升高可能是中高海拔地區(qū)藏、漢族發(fā)生MCI和AD的主要危險因素，MPO水平升高是藏族發(fā)生MCI和AD的獨立危險因素?？梢妎xLDL與藏、漢2個民族MCI和AD的發(fā)生發(fā)展均具有相關(guān)性，而MPO只在藏族認知功能衰退過程中起作用。

本研究通過對藏、漢2個民族的基線資料比較發(fā)現(xiàn)，不論藏族還是漢族，LDL水平均以MCI組最低，AD組最高，提示LDL在癡呆的不同進程中表現(xiàn)不一，其首先在MCI階段降低，然后在AD階段升高。多因素Logistic回歸分析結(jié)果提示，LDL水平升高是漢族發(fā)生AD的主要危險因素，而這種危險性并未在藏族中體現(xiàn)。目前研究關(guān)于血漿LDL水平升高對AD患病的風險影響結(jié)果并不一致[14-16]。本研究結(jié)果提示，LDL水平從正常人群到MCI到最后發(fā)展AD階段，出現(xiàn)了先下降后上升的趨勢，未來研究可進一步擴大樣本量，以期尋找一個折點，用以判斷MCI向AD的轉(zhuǎn)變。

總之，本研究發(fā)現(xiàn)oxLDL和MPO在藏、漢族認知功能減退的不同階段有著不同表現(xiàn)，oxLDL與藏、漢族MCI和AD的發(fā)生發(fā)展均具有相關(guān)性，而MPO只在藏族認知功能衰退過程中起作用。但由于本研究樣本量較小，且未對MCI和AD病人進行隨訪，對上述某些結(jié)果無法進行深層次的解釋，有待下一步擴大樣本量并延長隨訪給出答案。