胡亞剛，韓小娟,何志鵬,鄭伶俐

(1.陜西國際商貿(mào)學(xué)院，陜西 咸陽 712046；2. 步長制藥工程技術(shù)中心制藥工程技術(shù)部，陜西 咸陽 712000)

苦參堿是由豆科植物苦參的干燥藥用部位經(jīng)溶劑提取制成的苦參總生物堿，現(xiàn)代研究表明其有效成分主要有苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿、槐定堿等，其中以苦參堿和氧化苦參堿含量最高。我國傳統(tǒng)中醫(yī)明確苦參具有清熱燥濕，殺蟲，利尿功效[1]。常用于臨床中慢性病毒性肝炎及局部抗病毒的治療。苦參堿的抗病毒作用十分安全有效，與中藥傳統(tǒng)理論的清熱解毒功效一致；現(xiàn)代研究表明，苦參堿的藥理作用廣泛，具有抗炎作用，抗病毒，抗腫瘤作用，心血管系統(tǒng)，抗肝損傷作用具有保護(hù)作用，對于治療心腦血管疾病、抗降血脂等治療發(fā)揮的效果顯著。

苦參堿作為臨床常用藥，苦參堿制劑主要包括傳統(tǒng)制劑和現(xiàn)代制劑，其傳統(tǒng)制劑型有注射劑、腸溶片、膠囊、滴丸制劑、栓劑等；現(xiàn)代制劑主要有靶向制劑，包括脂質(zhì)體劑、隱形脂質(zhì)體劑、微粒和微丸制劑、微球制劑、納米粒制劑；凝膠劑，緩控釋制劑，透皮吸收制劑，包括醇質(zhì)體劑、微乳制劑[2]。特別是在治療慢性病的時候，與適宜成分組成復(fù)方制劑配合使用，效果更好。

現(xiàn)代對于中藥微丸制劑研究表明，針對中藥微丸和容易攜帶的特點，并且具有藥性大的特點，在口服下，可以對藥性有效的釋放，且對身體的五臟六腑的刺激很小。這對苦參堿制劑的研發(fā)提供了顯著作用。筆者將對苦參堿微丸制劑工藝進(jìn)行科學(xué)優(yōu)化，通過考察其輔料種類的選擇，采用擠出滾圓法進(jìn)行微丸的制備。通過正交試驗對其擠出速度、滾圓速度、滾圓時間的單因素考察，最終確定苦參堿微丸制劑的最佳工藝，為苦參堿制劑今后的新劑型研發(fā)和制備提供依據(jù)。

微丸是指直徑不超過2.5 mm的小型球狀口服劑型，屬于多單元釋藥體系，由于其特有的優(yōu)越性質(zhì)，逐漸成為目前緩控釋制劑研究的熱點之一[3]。微丸制劑常用的擠出滾圓法屬于壓縮制丸法范疇，它具備載藥均勻、外形美觀、圓整度高、物理性能好等特點，特別是改善藥物表面積和吸濕性，從而增加制劑的穩(wěn)定性。

1 儀器及試藥

表1 儀器設(shè)備

表2 原輔料及試劑

2 實驗方法與設(shè)計

2.1 微丸的制備工藝

原輔料均過5號篩備用，準(zhǔn)確稱取苦參堿15 g，微晶纖維素34 g，羧甲基纖維素鈉1 g，充分混合，用5%乙醇適量制軟材，迅速將制好的軟材投入加料口，用1 mm模具出條，設(shè)置擠出速度40 Hz、滾圓速度40 Hz、滾圓時間8 min，將微丸下料，置于鼓風(fēng)干燥箱進(jìn)行干燥3 h，進(jìn)行20～30目篩網(wǎng)篩分，稱量，計算收率，記錄數(shù)據(jù)對所得微丸進(jìn)行質(zhì)量評價。

2.2 響應(yīng)曲面實驗設(shè)計

筆者在單因素實驗考察基礎(chǔ)上，進(jìn)一步考察擠出速率、滾圓速率、滾圓時間對微丸成型的影響，優(yōu)化苦參堿微丸的制劑工藝，以擠出速率(A)、滾圓速率(B)、滾圓時間(C)為自變量，考察對于苦參堿微丸制劑的影響，以微丸收率作為響應(yīng)值評價指標(biāo)，響應(yīng)曲面設(shè)計因素水平表見表3。

表3 響應(yīng)曲面設(shè)計因素水平

3 實驗結(jié)果及數(shù)據(jù)分析

3.1 苦參堿微丸制備工藝單因素試驗

3.1.1 稀釋劑的考察 在苦參堿微丸制備過程中，稀釋劑既要發(fā)揮成型、分散的特點，又不影響主藥的順利釋放，稀釋劑的篩選顯得尤為重要，本文分別選用淀粉、糊精、微晶纖維素、乳糖作為稀釋劑，在主藥與輔料3∶7的相同比例下，按照2.1微丸制備方法進(jìn)行考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，采用淀粉、乳糖和糊精作為稀釋劑的微丸成型效果相對較差，微晶纖維素更適合微丸的制劑。結(jié)果如圖1所示。

3.1.2 黏合劑的考察 苦參堿由于遇水可能存在水解吸潮的現(xiàn)象，不僅影響藥物療效的發(fā)揮，而且影響著制劑穩(wěn)定性；在黏合劑的篩選中，重點考察水和乙醇，對不同濃度的乙醇和水的配比進(jìn)行考察。擬用水、5%、15%、25%、35%濃度的乙醇，按照2.1項下制備方法進(jìn)行微丸制劑的制備，實現(xiàn)結(jié)果表明5%的乙醇水溶液即可滿足制劑要求；結(jié)果如圖2所示。

3.1.3 主藥比例的考察 主藥比例,首先得滿足治療效果的需要，即要在工藝完美度和主藥承載量進(jìn)行平衡；通過預(yù)試驗，隨著主藥比例的不斷增大，微丸的外觀指標(biāo)趨于下滑態(tài)勢，擬選擇載藥量20%、30%、40%、50%、60%，按照2.1所示方法進(jìn)行制劑考察，以微丸收率作為評價指標(biāo)，結(jié)果如圖3所示。

3.2 響應(yīng)曲面實驗結(jié)果及分析

3.2.1 響應(yīng)曲面實驗結(jié)果 響應(yīng)曲面實驗結(jié)果見表4，通過響應(yīng)曲面Box-Behnken法實驗設(shè)計對苦參堿微丸制劑工藝實驗結(jié)果進(jìn)行多元回歸擬合分析，以擠出速率(A)滾圓速率(B)和滾圓時間(C)為自變量，微丸收率為響應(yīng)值，建立多元線性回歸模型：W=-645.395+15.14505A+20.31035B+5.89550C-0.10660AB+0.18483AC-0.17117BC-0.17104A2-0.16684B2-0.46761C2。通過回歸方程分析得出，影響制備符合要求微丸的三個因素分別是滾圓速率(B)>擠出速率(A)>滾圓時間(C)。方差分析表明，各模型顯著性P<0.0001，極具顯著性，回歸方程符合實際情況，可以用此模型對微丸制劑得率進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果見表5所示。

表4 響應(yīng)曲面實驗設(shè)計及結(jié)果

3.2.2 方差分析

表5 重復(fù)試驗方差分析

3.2.3 響應(yīng)面分析 響應(yīng)曲面軟件中，軟件所生成的等高線圖可以直觀反映各因素對響應(yīng)值交互作用的顯著性，3D響應(yīng)曲面圖可以顯示各因素對苦參堿微丸收率的交互效應(yīng)影響。

圖4、圖5為擠出速率與滾圓速率的交互作用情況，可以看出，隨著擠出速率、滾圓速率的加快，微丸收率呈現(xiàn)曲線提升狀態(tài)，大約在擠出速率35 Hz，滾圓速率45 Hz時，微丸得率較高。

圖6、圖7為擠出速率與滾圓時間的交互作用情況，可以看出，隨著擠出速率、滾圓時間的加快，微丸收率呈現(xiàn)曲線提升狀態(tài)，大約在擠出速率35 Hz，滾圓速率6 min時，微丸得率較高。

圖8、圖9為滾圓速率與滾圓時間的交互作用情況，可以看出，隨著滾圓速率、滾圓時間的增加，微丸收率呈現(xiàn)曲線提升狀態(tài)，大約在滾圓速率45 Hz，滾圓時間6 min時，微丸得率較高。

4 驗證試驗

采用最佳工藝參數(shù)，制備苦參堿微丸樣品3批，對外觀進(jìn)行觀察對比，檢查有無異型、雙粒等情況；利用流化床實驗設(shè)備進(jìn)行脆碎度測定，15 min內(nèi)稱量計算減失重量比例；參照中國藥典丸劑項下溶散時限檢查方法，120 min之內(nèi)，樣品全部容散；三批樣品均通過質(zhì)量檢查，符合規(guī)定，結(jié)果表明實驗所優(yōu)選制劑工藝切實可行。 結(jié)果見表6。

表6 驗證試驗結(jié)果

5 結(jié)論與討論

通過大量預(yù)實驗摸索，詳細(xì)考察原輔料比例及種類，應(yīng)用響應(yīng)曲面設(shè)計對設(shè)備擠出速率、滾圓速率、滾圓時間參數(shù)進(jìn)行綜合分析，優(yōu)化苦參堿微丸的制劑工藝，經(jīng)過實驗與分析，最終確定苦參堿制劑工藝為原料輔料比例3∶5，采用5%乙醇制備軟材，設(shè)備擠出速率35 Hz、滾圓速度45 Hz、滾圓時間6 min，苦參堿微丸的各項指標(biāo)均符合規(guī)定。CMC的加入方法可以采用干混，或者溶解后作為黏合劑噴入， 后者較前者效果較好； 用量不宜超過1%，過量滾圓時不宜切斷，甚至出現(xiàn)雙胞胎、啞鈴、異型等[4]；制備軟材過程中粘合劑的選用，單純用水，粘性過大，軟材容易粘連設(shè)備，擠出困難且成型效果差，增加清場難度；選用低濃度乙醇后，所制出軟材粘性適中，出丸效果較好，制備的微丸不僅外觀理想、而且圓整度高。但是隨著乙醇濃度提高，所制備的軟材越松散，粘性較差，軟材不容易成型，制劑效果不理想。

苦參堿微丸的收率考察是微丸制劑的前提條件，普遍采用篩析法進(jìn)行評價。在生產(chǎn)實踐中，苦參堿微丸不是最終產(chǎn)品，根據(jù)需要后續(xù)進(jìn)行制劑需要適當(dāng)加工，比如緩控釋包衣或復(fù)方成分填充，因此其脆碎度需達(dá)到規(guī)定要求，如果沿用片劑脆碎度檢查方法進(jìn)行微丸的脆碎度考察針對性不強(qiáng)，根據(jù)文獻(xiàn)報道，暫無丸劑法定的脆碎度檢查方法本文暫采用流化床實驗設(shè)備進(jìn)行測定[5]。