王馨培，王子玉，傅 強, 3*，杜 超，鞏傳勇，王 兵

基于網(wǎng)絡(luò)藥理學和多中心臨床數(shù)據(jù)的清肺承氣湯治療腹腔感染所致急性呼吸窘迫綜合征的作用機制研究

王馨培1，王子玉2，傅 強1, 3*，杜 超4，鞏傳勇5，王 兵6

1. 天津醫(yī)科大學研究生院，天津 300070 2. 湖北省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 重癥醫(yī)學科，湖北 武漢 430015 3. 天津市第四中心醫(yī)院 重癥醫(yī)學科，天津 300140 4. 天津中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院 急癥部，天津 300193 5. 天津市南開醫(yī)院 重癥醫(yī)學科，天津 300102 6. 天津市第一中心醫(yī)院 重癥醫(yī)學科，天津 300190

采用網(wǎng)絡(luò)藥理學和多中心臨床數(shù)據(jù)探討清肺承氣湯治療腹腔感染所致急性呼吸窘迫綜合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）的作用機制。通過中藥系統(tǒng)藥理學分析平臺（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP）數(shù)據(jù)庫檢索清肺承氣湯的化學成分和靶點。采用Cytoscape 3.7.1軟件建立“化合物-靶點”網(wǎng)絡(luò)、靶點間的蛋白相互作用（protein protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)，并對預測靶點進行京都基因與基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）富集分析。從3所醫(yī)院選取27例腹腔感染所致ARDS患者，隨機分為13例對照組和14例清肺承氣湯組，分別于治療前后3 d取肺泡灌洗液，微球檢測法檢測患者肺泡灌洗液中白細胞介素-4（interleukin 4，IL-4）、白細胞介素-6（interleukin 6，IL-6）、白細胞介素-10（interleukin 10，IL-10）水平；流式細胞術(shù)檢測患者肺泡巨噬細胞的凋亡情況。篩選得到清肺承氣湯中78種活性成分，對應63個潛在靶點；“化合物-靶點”網(wǎng)絡(luò)和PPI網(wǎng)絡(luò)度值靠前的靶點為過氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferators-activated receptor γ，PPARγ）、B細胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、IL-6、IL-10、γ干擾素（interferon-gamma，INFG），化合物為槲皮素和木犀草素；潛在靶點的KEGG通路排序靠前的炎癥相關(guān)通路為核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）通路、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）信號通路、白細胞介素-17（interleukin 17，IL-17）通路、T細胞受體通路等信號通路。與對照組比較，清肺承氣湯組患者肺泡灌洗液中IL-6水平顯著升高（＜0.05），IL-10水平顯著降低（＜0.05），肺泡巨噬細胞的凋亡面積顯著降低（＜0.001）。清肺承氣湯中的有效成分可以通過IL-6、Bcl-2、IL-10、趨化因子配體2（CXC chemokine ligand 2，CXCL2）等靶點參與調(diào)控多條信號通路來影響IL-4、IL-6、IL-10分泌和細胞凋亡，從而治療ARDS。

清肺承氣湯；腹腔感染；急性呼吸窘迫綜合征；網(wǎng)絡(luò)藥理學；槲皮素；木犀草素；白細胞介素；凋亡

急性呼吸窘迫綜合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）為重癥監(jiān)護室的常見病種，死亡率達到20%～50%[1]。創(chuàng)傷、感染、藥物等均可誘發(fā)ARDS，而對于外科重癥監(jiān)護病房中的ARDS患者，嚴重腹腔感染是最常見的誘因[2-3]。研究表明，ARDS的發(fā)病機制為肺部促炎反應與抗炎反應失衡，造成肺部炎癥紊亂。目前ARDS以基礎(chǔ)治療和支持治療為主，對肺部炎癥進展治療欠佳，因此尋找有效的藥物對治療ARDS有重要意義。

清肺承氣湯由小承氣湯與小陷胸湯組成，首見于張仲景所著的《傷寒雜病論》。小承氣湯由大黃、枳實、厚樸組成，3味同煎，枳實、厚樸減少用量，瀉熱攻下之力較輕，適用于陽明熱盛、燥屎初結(jié)、痞滿而實、燥堅不甚之腑實證[4]。小陷胸湯主治痰熱互結(jié)之結(jié)胸證，方中黃連清熱瀉火，半夏化痰開結(jié)，2藥合用，辛開苦降、善治痰熱內(nèi)阻；以栝樓實蕩熱滌痰、寬胸散結(jié)，3藥共奏清熱化痰、寬胸散結(jié)之功[5]。兩方合用可輕下熱結(jié)、清熱化痰，在中醫(yī)理論上吻合腹腔感染、陽明熱結(jié)所致肺損傷痰多喘息之證。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，清肺承氣湯對于ARDS患者有明確的治療效果，但其具體藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制尚不明確[6-7]。本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學方法對清肺承氣湯治療ARDS的潛在靶點和作用機制進行預測，并通過對臨床患者的數(shù)據(jù)分析，探討清肺承氣湯對細胞因子和肺巨噬細胞凋亡的影響。

1 材料

1.1 網(wǎng)絡(luò)藥理學材料

中藥系統(tǒng)藥理學分析平臺（TCMSP，http://lsp. nwu.edu.cn/tcmsp.php），GeneCards知識庫（https:// www.genecards.org/），Cytoscape 3.7.1軟件（https:// cytoscape.org/），OMIM數(shù)據(jù)庫（https://omim.org/），STRING數(shù)據(jù)庫（https://string-db.org/）、DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫（https://david.ncifcrf.gov/）。

1.2 臨床研究的一般資料

選自2016年6月—2018年3月于天津市南開醫(yī)院、天津市第一中心醫(yī)院、天津市第四中心醫(yī)院重癥加強治療病房（ICU）收治的嚴重腹腔感染所致ARDS患者為研究對象，所有患者均簽署知情同意書，并通過天津市第四中心醫(yī)院倫理委員會審查（倫理批件號SZXLL-2015-030）。

納入標準：1周內(nèi)起病、新發(fā)或惡化的呼吸癥狀；雙肺模糊影不能完全由滲出、肺塌陷或結(jié)節(jié)來解釋；不能完全由心力衰竭或容量過負荷解釋的呼吸衰竭；沒有發(fā)現(xiàn)危險因素時可行超聲心動圖等檢查排除血流源性肺水腫，呼氣末正壓通氣（positive end-expiratory pressure，PEEP）≥5 cm H2O時，100 mm Hg＜(O2)/FiO2≤200 mm Hg或(O2)/FiO2≤100 mm Hg；腹腔感染符合膿毒癥診斷標準[8]；氣管插管機械通氣治療；年齡＞18歲且＜80歲；患者及其家屬知情同意。

排除標準：發(fā)病24 h內(nèi)死亡者，或臨終狀態(tài)；合并外傷、免疫缺陷性疾患、嚴重心血管疾病、終末期肝腎疾病、惡性腫瘤；近期內(nèi)使用免疫抑制劑（如激素等）；艾滋病或慢性炎癥性疾?。ㄈ珙愶L濕性關(guān)節(jié)炎）；各種原因中途退出者。

1.3 儀器

纖維支氣管鏡購自O(shè)lympus公司、液相芯片懸浮系統(tǒng)購自Flexmap 3D公司；免疫分析試劑盒、手持式磁力洗板機、渦流攪拌機、微量滴定搖版機、流式細胞儀均購自Thermo Fisher Scientific公司。

2 方法

2.1 清肺承氣湯活性成分的篩選

在TCMSP數(shù)據(jù)庫中輸入關(guān)鍵詞“大黃、枳實、厚樸、黃連、半夏、栝樓”得出化合物信息。計算機模擬吸收、分布、代謝和排泄系統(tǒng)評估模型用于評估清肺承氣湯的潛在活性成分?？诜锢枚龋╫ral bioavailability，OB）用于評估體內(nèi)藥物的藥動學和藥物形成特性，藥物相似性（drug-likeness，DL）用于評估分子在生物利用度等方面的“藥物樣”程度，根據(jù)DL≥0.18、OB≥30%對化合物進行篩選。

2.2 藥物活性成分對應靶點和ARDS相關(guān)靶點的搜集

利用TCMSP對78種活性成分的對應靶點進行統(tǒng)計，在GeneCards數(shù)據(jù)庫和OMIM數(shù)據(jù)庫中查找ARDS疾病的相關(guān)靶點。

2.3 “化合物-疾病-靶點”和蛋白相互作用（protein protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

利用R語言得到化合物、疾病和靶點的共同作用靶點，基于STRING構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)模型，相互作用置信度＞0.4，采用Cytocape 3.7.1軟件構(gòu)建“化合物-疾病-靶點”網(wǎng)絡(luò)。

2.4 京都基因與基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）富集分析

通過DAVID數(shù)據(jù)庫對疾病和化合物的關(guān)鍵靶點進行KEGG富集分析。

2.5 臨床研究的分組與治療方法

共納入ARDS患者27例，隨機分為對照組（13例）和治療組（14例）。對照組參照2012年膿毒癥指南[8]，進行抗感染、改善循環(huán)、血液凈化、機械通氣支持等治療；治療組在對照組基礎(chǔ)上給予清肺承氣湯治療。清肺承氣湯由大黃、枳實、厚樸、黃連、半夏、瓜蔞組成，制成的中藥顆粒規(guī)格：3 g/袋；2袋中藥顆粒溶于200 mL溫水口服或胃管注入，4袋中藥顆粒溶于400 mL溫水，保留灌腸，2次/d。

2.6 患者一般情況的統(tǒng)計

根據(jù)患者入院后的血常規(guī)、血氣分析值和生命體征計算24 h內(nèi)的APACHE Ⅱ評分，統(tǒng)計患者年齡、性別等基本信息和ICU住院時間、總住院費用以及治療3 d后死亡狀況。

2.7 肺泡灌洗液的采集

操作前了解患者病情、主要病征和生理狀態(tài)，備好呼吸、血壓、心電、氧飽和度檢測和急救的器材及藥物。術(shù)前iv 5 mg咪唑安定，2%利多卡因經(jīng)氣道霧化，行氣道局部黏膜麻醉；纖維支氣管鏡經(jīng)氣管插管插入氣管，嵌入右肺中葉或左肺舌葉段支氣管管口，注入2～3 mL 2%利多卡因局麻后，用50 mL注射器將37 ℃生理鹽水分次注入，每次25～50 mL，總量100～300 mL；注入后立即通過負壓吸引裝置吸引、回收至硅質(zhì)灌洗液收集瓶內(nèi)；回收液用雙層無菌紗布濾過，除去黏液，記錄總回收液量，裝入硅質(zhì)容器中；灌洗液1500 r/min離心15 min，棄去上清液，PBS洗滌，調(diào)整細胞密度為1×106/mL，接種于96孔板，于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

2.8 觀察指標

2.8.1細胞因子分泌 將肺泡灌洗液以渦流法攪拌均勻，10 000×離心5～10 min去除顆粒。將珠瓶渦旋30 s，加入5 mL珠溶液，渦流30 s。使用多通道移液管將50 μL珠狀混合物加入96孔板中，加入樣品類型特異性緩沖液、樣品各25 μL，孵育后清洗磁珠并加入抗體混合物，封閉磁珠，搖床室溫孵育30 min；加入50 μL Streptavidin-PE，封閉磁珠，搖床室溫孵育30 min；重懸磁珠，加入120 μL讀數(shù)緩沖液，封閉磁珠，搖床室溫孵育30 min。在Luminex 100/200上將標準的期望濃度與每個標準生成的MFI作圖，計算細胞因子質(zhì)量濃度。

2.8.2肺巨噬細胞凋亡 肺泡灌洗液采集后的細胞經(jīng)0.25%胰蛋白酶消化，調(diào)整至細胞密度為5×104/mL，1000×離心5 min，棄上清，加入195 μL Annexin V-FITC結(jié)合液重懸細胞，加入5 μL Annexin V-FITC混勻；加入10 μL碘化丙啶（PI）染色液，混勻，室溫避光孵育10～20 min，采用流式細胞儀上機檢測。

2.9 統(tǒng)計學分析

3 結(jié)果

3.1 清肺承氣湯活性成分的篩選結(jié)果

通過檢索TCMSP，得到78個活性成分，其中與大黃相關(guān)的化學成分16個，與枳實相關(guān)的化學成分22個，與厚樸相關(guān)的化學成分2個，與黃連相關(guān)的化學成分14個，與半夏相關(guān)的化學成分13種，與瓜蔞相關(guān)的化學成分11個，見表1。

表1 清肺承氣湯活性成分信息

續(xù)表1

3.2 清肺承氣湯治療ARDS的潛在靶點篩選

從GeneCards數(shù)據(jù)庫和OMIM數(shù)據(jù)庫共獲得ARDS相關(guān)靶點476個，從TCMSP數(shù)據(jù)庫篩選清肺承氣湯活性成分對應靶點225個，將疾病和活性成分靶點進行交叉篩選獲得共同潛在靶點63個，如圖1和表2所示。

3.3 清肺承氣湯“化合物-疾病-靶點”網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

如圖2所示，“化合物-疾病-靶點”網(wǎng)絡(luò)由110個節(jié)點（44個化合物、63個靶點）和324個邊緣組成。紅色四邊形代表ARDS，藍色六邊形代表清肺承氣湯，紫色四邊形代表化合物，綠色圓圈代表靶點，每條邊代表靶點和化合物之間的相互關(guān)系，網(wǎng)絡(luò)圖表明清肺承氣湯通過多種成分靶向發(fā)揮各種治療作用，體現(xiàn)了中藥方劑的特性。網(wǎng)絡(luò)圖中每個節(jié)點的度值代表與節(jié)點連接的線路的數(shù)量，度值越大代表節(jié)點越重要。度值越高的化合物和靶點在清肺承氣湯治療ARDS過程中起到的作用越高，見表3。檞皮素與52個靶點相連，通過調(diào)節(jié)B細胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）參與細胞凋亡，通過調(diào)控白細胞介素發(fā)揮抗炎作用。多個靶點與多個化合物相結(jié)合，如Bcl-2、雌激素受體1（estrogen receptor 1，ESR1）、雄激素受體（androgen receptor，AR）分別與7、16、19個化合物結(jié)合，在細胞增殖、炎癥、細胞凋亡等方面起到關(guān)鍵作用。

圖1 清肺承氣湯治療ARDS潛在靶點的韋恩圖

3.4 清肺承氣湯治療ARDS潛在靶點的PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將63個潛在靶點通過STRING數(shù)據(jù)庫構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)圖，見圖3，PPI圖有68個節(jié)點和1078條邊，其中節(jié)點代表蛋白，連線代表蛋白與蛋白之間的相互作用。根據(jù)相關(guān)靶點間的數(shù)量即度值排序，度值越高，其起到的作用越關(guān)鍵，度值前30位的潛在靶點見圖4，存在較多與炎癥密切相關(guān)的靶點，如排名第1位的白細胞介素-6（interleukin 6，IL-6）與巨噬細胞的分泌、肺組織細胞的修復密切相關(guān)，MacLaren等[9]發(fā)現(xiàn)IL-6可通過激活中性粒細胞，從而介導肝臟分泌大量急性期蛋白，最終促進炎癥反應的爆發(fā)。

表2 清肺承氣湯治療ARDS潛在靶點相關(guān)信息

表3 “化合物-疾病-靶點”網(wǎng)絡(luò)關(guān)鍵點的拓撲學參數(shù)

3.5 潛在靶點的KEGG通路分析

通過DAVID平臺對63個靶點進行KEGG通路統(tǒng)計，63個潛在靶點映射到78條KEGG通路，與炎癥相關(guān)的通路27條，包括核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）通路、白細胞介素家族通路等；與細胞凋亡作用相關(guān)通路11條，包括p53通路、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）信號通路等。圖5列出了20條最重要的通路。TNF通路、NF-κB通路、T細胞受體通路等與炎癥的發(fā)生發(fā)展和細胞凋亡密切相關(guān)。TNF通路屬于細胞炎癥和細胞凋亡的交互通路[10]，既能通過活化NF-κB通路調(diào)節(jié)白細胞介素家族的分泌，又可通過TNF-α來調(diào)控細胞凋亡信號的活化。

圖3 潛在靶點的PPI網(wǎng)絡(luò)圖

3.6 清肺承氣湯治療腹腔感染所致ARDS的臨床結(jié)果

3.6.1 患者一般資料比較 納入嚴重腹腔感染所致ARDS患者27例，其中男性19例，女性8例；年齡32～73歲，平均（54.19±14.30）歲；原發(fā)?。褐匕Y急性胰腺炎20例（74.07%），急性梗阻性化膿性膽管炎5例（18.52%），腸梗阻2例（7.41%）；APACHE Ⅱ 12～26分，平均（19.52±7.07）分；3 d后死亡11例，存活16例，存活率59.26%。治療組患者年齡（55.14±12.89）歲，對照組（53.15±16.15）歲，差異無統(tǒng)計學意義；治療組男性9例、女性5例，對照組男性10例、女性3例，性別比例無統(tǒng)計學意義；治療組APACHE Ⅱ（17.36±5.58）分，對照組APACHE Ⅱ（21.84±7.96）分，差異無統(tǒng)計學意義。

3.6.2 2組患者肺泡巨噬細胞凋亡比較 如圖6、表4所示，治療前對照組和治療組患者肺泡巨噬細胞凋亡無顯著差異。與對照組治療后比較，治療組患者肺泡巨噬細胞凋亡顯著降低（＜0.001）。

3.6.3 2組患者肺泡細胞因子水平比較 如表5所示，治療前2組患者肺泡白細胞介素-4（interleukin 4，IL-4）、IL-6、白細胞介素-10（interleukin 10，IL-10）水平無明顯差異，與對照組治療后比較，治療組患者肺泡IL-6水平顯著升高（＜0.05），IL-10水平顯著降低（＜0.05）。

4 討論

中藥復方具有多成分、多靶點、多功能的特點，如清肺承氣湯有6味中藥、78個活性成分。網(wǎng)絡(luò)藥理學將多向藥理學和生物學結(jié)合，對大數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，在整體上考慮藥物與疾病的相關(guān)性、系統(tǒng)性和整體性，從活性成分與疾病相互作用靶點出發(fā)，反映中藥多成分-多靶點的作用關(guān)系，為闡明中藥的復雜性提供了新的研究思路。本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學建立“化合物-靶點”網(wǎng)絡(luò)，分析清肺承氣湯中活性成分治療ARDS的作用機制。

與同組治療前比較：**＜0.01；與對照組治療后比較：###＜0.001

**0.01the same group before treatment;###0.001control group after treatment

表5 對照組和治療組患者肺泡細胞因子水平的比較

與同組治療前比較：*＜0.05**＜0.01；與對照組治療后比較：#＜0.05

*0.05**0.01the same group before treatment;#0.05control group after treatment

肺泡上皮細胞和毛細血管內(nèi)皮細胞損傷后，引起過度炎癥反應和大量炎癥細胞因子分泌，從而引發(fā)ARDS。炎癥細胞因子是在炎癥過程中細胞分泌的小分子蛋白，參與炎癥的發(fā)生、發(fā)展。IL-6主要由T淋巴細胞分泌，部分由單核巨噬細胞合成釋放。研究發(fā)現(xiàn)，地塞米松可以通過抑制內(nèi)毒素介導的ARDS小鼠模型IL-6的分泌，從而減輕肺部炎癥反應，緩解ARDS的病情發(fā)展[11]。TNF超家族由19個家族成員組成。研究發(fā)現(xiàn)，ARDS發(fā)生過程中，TNF-α表達明顯增加。TNF-α與腫瘤壞死因子受體1結(jié)合，進而活化NF-κB，上調(diào)細胞因子IL-1、IL-8、IL-6的表達，從而導致肺水腫的發(fā)生[12-13]；轉(zhuǎn)化生長因子β（transforming growth factor β，TGFβ）屬于致病性細胞因子，參與急性肺損傷早期發(fā)展，可以通過減少肺上皮細胞鈉離子的轉(zhuǎn)運，導致肺泡水腫，影響ARDS[14-15]；炎癥早期，M1巨噬細胞產(chǎn)生IL-1β、IL-6、IL-12等促炎因子，M2巨噬細胞產(chǎn)生抗炎細胞因子IL-10[16]；急性肺損傷患者肺泡灌洗液中IL-1β有較高生物活性，可以通過p38 MAPK通路，抑制上皮鈉通道，促進炎癥發(fā)展[17]；過氧化物酶體增殖劑激活受體γ（proliferator-activated receptor γ，PPARγ）是核激素受體超家族的成員，其特定的PPARγ受體激動劑羅格列酮可以抑制ARDS的炎癥反應，防止細胞損傷[18]；趨化因子配體2（CXC chemokine ligand 2，CXCL2）與趨化因子受體4（CXC chemokine receptor 4，CXCR4）結(jié)合，加重炎癥反應，與肺纖維化后急性炎癥的病理發(fā)展相關(guān)[19-20]；魯斯可皂苷元可通過抑制Toll樣受體4（toll-like receptor 4，TLR4）/髓樣分化因子88（myeloid differentiation factor 88，MYD88）/NF-κB信號通路保護肺泡上皮細胞，減少ARDS發(fā)病過程中的細胞凋亡[10]。

IL-10是肺內(nèi)重要的內(nèi)源性調(diào)節(jié)劑，在ARDS早期屬于促炎性細胞因子，可誘導炎癥級聯(lián)反應和一氧化氮合酶的產(chǎn)生，一氧化氮的積累進一步加重ARDS的病情[21-22]。IL-10可通過抑制骨髓干細胞向Ⅱ型肺泡表皮細胞的轉(zhuǎn)化來促進ARDS發(fā)展[23]。在ARDS后期，IL-10可通過促進M2型巨噬細胞并抑制M1型巨噬細胞的轉(zhuǎn)化起到炎癥修復作用。D'Alessio等[24]發(fā)現(xiàn)IL-4可增強ARDS小鼠M2型巨噬細胞分化，促進肺組織修復。本研究臨床數(shù)據(jù)顯示清肺承氣湯通過調(diào)節(jié)IL-4、IL-6、IL-10的分泌并抑制肺泡巨噬細胞的凋亡，影響ARDS不同階段M1和M2型巨噬細胞的分化，促進肺組織修復，從而影響ARDS病情進展。

基于網(wǎng)絡(luò)藥理學分析得出，Bcl-2為“化合物-靶點”網(wǎng)絡(luò)中度值排前10位的靶點，可以通過其映射的p53通路和凋亡通路下調(diào)半胱氨酸蛋白酶3，從而抑制細胞凋亡；TNF信號通路作為KEGG通路排序靠前的通路，為凋亡作用的核心通路。IL-6、IL-10、AR、CXCL8、PPARγ等靶點屬于PPI網(wǎng)絡(luò)及“化合物-靶點”網(wǎng)絡(luò)度值靠前的靶點，NF-κB、T細胞受體通路、白細胞介素信號通路在KEGG分析中為排序靠前的通路，表明清肺承氣湯中的化合物可能調(diào)控IL-6、IL-10、AR、CXCL8、PPARγ等多個靶點，以及上述多條炎癥通路，調(diào)節(jié)患者白細胞介素的分泌。

本研究采用了網(wǎng)絡(luò)藥理學，對清肺承氣湯治療腹腔感染所致ARDS患者的臨床數(shù)據(jù)進行了初步的潛在分子機制分析，結(jié)果顯示，清肺承氣湯通過多成分、多靶點、多通路作用于細胞因子和細胞凋亡，從而延緩疾病進展。本研究為ARDS的中西醫(yī)結(jié)合治療提供了新的思路和治療靶點，課題組后續(xù)將通過動物實驗和分子生物學實驗對清肺承氣湯的具體作用進行深入探究。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Mechanism of Qingfei Chengqi Decoction on acute respiratory distress syndrome caused by abdominal infection based on network pharmacology and multi-center clinical data

WANG Xin-pei1, WANG Zi-yu2, FU Qiang1,3, DU Chao4, GONG Chuan-yong5, WANG Bing6

1. Graduate School, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China 2. Department of Critical Medicine, Hubei Provincial Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Wuhan 430015, China 3. Department of Critical Medicine, Tianjin Fourth Central Hospital, Tianjin 300140, China 4. Emergency Department, The First Affiliated Hospital of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China 5. Department of Critical Medicine, Tianjin Nankai Hospital, Tianjin 300102, China 6. Department of Critical Medicine, Tianjin First Central Hospital, Tianjin 300190, China

To elucidate the underlying molecular mechanism of Qingfei Chengqi Decoction (清肺承氣湯) in treatment of patients with acute respiratory distress syndrome (ARDS) caused by abdominal infection using network pharmacology and multi-center clinical data.Through the database of Chinese Medicine System Pharmacology Analysis Platform (TCMSP), the chemical constituents and targets of Qingfei Chengqi Decoction was retrieved. Cytoscape 3.7.1 software was used to establish a “compound-target” network, a predicted protein-protein interaction (PPI) network between predicted targets, and a KEGG enrichment analysis of predicted targets. A total of 27 patients with ARDS due to celiac infection were selected from three hospitals and were randomly divided into Qingfei Chengqi Decoction group (14 cases) and control group (13 cases). Alveolar lavage fluid was taken 3 d before and after treatment; Levels of IL-4, IL-6, IL-10 were detected by microsphere detection; Alveolar macrophage apoptosis was analyzed by flow cytometry.A total of 78 active compounds and 63 potential targets of Qingfei Chengqi Decoction were screened. From “compound-target” network and PPI network, targets ranked the top were PPARγ, Bcl-2, IL-6, IL-10 and INFG; Compounds were quercetin and luteolin. Inflammatory pathways ranked higher in KEGG pathway analysis were NF-κB, TNF signaling pathway, IL-17 pathway and T cell receptor pathway. Compared with control group, level of IL-6 was significantly increased (< 0.05), level of IL-10 was significantly decreased (< 0.05), and apoptotic area of alveolar macrophages was significantly decreased (< 0.001) in Qingfei Chengqi Decoction group.Compounds in Qingfei Chengqi Decoction could regulate multiple signal pathways through targets such as IL-6, Bcl-2, IL-10, and CXCL2 to regulate the secretion of IL-4,IL-6,IL-10 and cell apoptosis to treat ARDS.

Qingfei Chengqi Decoction; abdominal infection; acute respiratory distress syndrome; network pharmacology; quercetin; luteolin; interleukin; apoptosis

R285.6

A

0253 - 2670(2021)02 - 0437 - 10

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.02.017

2020-06-06

天津市衛(wèi)生行業(yè)重點攻關(guān)項目（15KG121）

王馨培，碩士研究生，研究方向為外科危重癥的中西醫(yī)結(jié)合治療。E-mail: qq563531789@163.com

傅 強 E-mail: 13920864938@163.com

[責任編輯 李亞楠]