謝忠清，張亞萍，馬金慧，唐桃霞，王致和

（1.甘肅省農(nóng)業(yè)工程技術研究院，甘肅武威 733006；2.甘肅省農(nóng)業(yè)科學院蔬菜研究所，蘭州 730000）

0 引言

甜葉菊（Stevia rebaudianaBertoni）又名甜菊、甜茶、甜草、蜜菊等，原產(chǎn)于南美洲，為亞熱帶多年生宿根系菊科植物[1-2]。是一種新型糖料作物，以其干葉為原料，經(jīng)提取、精制而得的食品添加劑甜菊糖苷（Steviol glycosides），甜度約為蔗糖的150～300 倍，但熱量僅為蔗糖的三百分之一[3]，是一種高甜度、低熱能、味質好、安全無毒的新型天然甜味劑，被譽為“世界第三糖源”[4]，廣泛應用于食品、飲料、醫(yī)藥等行業(yè)領域[4]。我國產(chǎn)品遠銷歐美及東南亞等許多國家，發(fā)展前景廣闊。

甜菊糖苷是多組分糖苷的混合物，糖苷組分及含量決定混合物的甜度和口感。目前已知的甜葉菊中的甜菊糖苷含有13種組分[4]，甜菊糖苷的甜度和口感取決于各組分的種類和含量，基于目前對甜菊糖苷組分含量和作用的認識，將總甜菊糖苷（TSG）、RA（萊鮑迪苷，Rebaudioside A）、RC（萊鮑迪苷，Rebaudioside C）、STV（蛇菊苷，Stevioside）、RD（萊鮑迪苷，Rebaudioside D）、RM（萊鮑迪苷，Rebaudioside M）含量作為甜葉菊葉片品質的主要指標[5]。研究表明，RA 苷的甜度為蔗糖350～450 倍，且味質好，口感最接近于蔗糖，同時，原料中RA苷含量較高，生產(chǎn)成本較低，歐美市場主要需求高RA 苷含量的甜菊糖產(chǎn)品，因而RA苷含量高的甜葉菊原料備受青睞[6-8]，我國及世界各地區(qū)高RA苷含量甜葉菊新品種的種植面積將進一步擴大。

甘肅河西地區(qū)自2005 年在肅州區(qū)引進種植甜葉菊以來的10 多年時間，甜葉菊種植基地從無到有，種植面積發(fā)展10萬hm2，生產(chǎn)區(qū)域擴大到臨澤縣、涼州區(qū)的20多個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，種植戶達到3萬余戶，形成了上壩、總寨、鴨暖、蓼泉、下雙等10 多個千畝甜菊生產(chǎn)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，基地建設規(guī)模已初步形成，逐步形成了“龍頭企業(yè)+專業(yè)合作社+農(nóng)戶”的發(fā)展模式[9]。甜葉菊作為新興特色產(chǎn)業(yè)，雖經(jīng)近幾年的種植已形成一定的規(guī)模，但是在發(fā)展過程中還存在一些困難和急需解決的問題，特別是種子問題，主要由安徽、江西等地的客商提供，種子質量參差不齊，芽率不高，近年調運的種苗由于運輸距離較遠，成本過高，成活率較低，一定程度制約了甜葉菊產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。為適應市場對甜葉菊品種的需求，需大力開展高RA 苷含量的甜葉菊新品種（系）選育。因此，我們從2014年開始引進國內(nèi)種質資源，利用無性繁殖和有性雜交手段，選育出抗逆性強，干葉最高產(chǎn)量6 000 kg/hm2以上，平均5 250 kg/hm2以上，RA 苷含量高于60%的新品系‘GTJ-101’，適宜于甘肅河西地區(qū)種植，并開展短日照制種技術研究，探索影響甜葉菊種子在河西地區(qū)自然成熟的因子，實現(xiàn)了我省甜葉菊種子的自給，現(xiàn)將結果報告如下。

1 選育過程

選育過程如圖1 所示。2014年引進甜葉菊種質資源30個，按照產(chǎn)量高、總苷含量高、RA 苷含量高、抗逆性強和適應性廣的育種目標，通過對種質的適應性、植株的株型、葉型、分枝特性、產(chǎn)量指標、RA 苷和總糖苷等綜合性狀等優(yōu)良特性進行篩選鑒定，選出獲得較好的純系‘甘引1 號’（無性繁殖苗）和‘甘引4號’（無性繁殖苗），10月20日，分別將‘甘引1號’和‘甘引4號’的母根移植于日光溫室越冬。

2015年3月下旬進行扦插繁殖，5月2日移栽，移栽地選擇在建好的拱形棚內(nèi)，覆膜前的土地準備工作與甜葉菊大田種植相同。選用140 cm寬的黑膜，膜幅寬150 cm，膜間距40 cm，平均行距37.5 cm，株距18 cm，公頃保苗株數(shù)14萬株～15萬株。移栽時分別將2 個不同的甜葉菊親本株系按行相間定植在同一塊田間，以利于甜葉菊相互雜交。7 月1 日甜葉菊出現(xiàn)15 對真葉，株高約30 cm 時進行遮光處理。處理的方法是，每天下午后6時用農(nóng)用黑色塑料布或其它遮光物遮光，在次日早晨8時揭去遮光物，使甜葉菊植株每天見光小于10 h，7月20日現(xiàn)蕾時停止遮光處理，連續(xù)處理20 d，9月15日采收種子，獲得‘GTJ-1’F1代雜交種。

圖1 甜葉菊新品系GTJ-101的選育流程圖Fig.1 The selection process of the new stevia line GTJ-101

2016年3月10日，用‘GTJ-1’F1代雜交種育苗，5月5日，試驗田移栽，8月20日，選擇單株，并對RA 苷、總苷有效成分檢測，間隔10 d，再次對較好的單株進行RA 苷、總苷有效成分檢測，獲得優(yōu)良株系‘GTJ-101’，9月10日收獲，將‘GTJ-101’的母根移植于日光溫室越冬，并進行多次扦插，擴大繁殖株系。

2017 年進行田間鑒定試驗，2017 年5 月5 日移栽到試驗田，采用甜葉菊大田生產(chǎn)管理方式進行，對RA苷、總苷有效成分檢測及穩(wěn)定性評價，將‘GTJ-101’的無性系全部母根移植于日光溫室越冬，繼續(xù)進行多次扦插繁殖單株無性系。

2018—2019年連續(xù)2年對‘GTJ-101’進行品種比較試驗，并在甘肅酒泉、張掖進行示范生產(chǎn)，對產(chǎn)量、RA苷、總苷有效成分進行測定及穩(wěn)定性評價，并請有關專家對主要性狀進行評價。

2 主要性狀觀察及穩(wěn)定性評價

由表1 和表2 可知，‘GTJ-101’品系2017—2019 連續(xù)3 年的干葉平均產(chǎn)量達6 241.24 kg/hm2，較對照‘譜星1 號’平均增產(chǎn)5.69%；RA 苷含量為12.17%，對照‘譜星1 號’RA 苷含量為9.02%，較對照增加3.15 個百分點，總苷含量為19.22%，RA苷/總苷含量為63.32%，分別較對照‘譜星1號’增加4.14和3.51個百分點，大幅提高了產(chǎn)品含量和生產(chǎn)加工價值。

表1 2017—2019 年GTJ-101 品系與對照品種產(chǎn)量比較Table 1 Yield comparison between GTJ-101 and the control variety during 2017 to 2019

表2 2017—2019 年GTZ-101 品系與對照品種糖苷含量比較Table 2 The comparison of glycoside content between GTJ-101 and the control variety for the means across 2017 to 2019

2017—2019年連續(xù)3年對‘GTJ-101’品系糖苷含量、品質性狀、干葉產(chǎn)量等性狀進行監(jiān)測分析，并進行穩(wěn)定性綜合評價，結果表明，‘GTJ-101’品系連續(xù)3 年RA 苷/總苷含量均高于60%，干葉產(chǎn)量均高于5 250 kg/hm2，蕾期集中在9月中旬，品質及農(nóng)藝性狀均較穩(wěn)定。

3 ‘GTJ-101’品系特征特性

‘GTJ-101’品系為多年生草本植物，是產(chǎn)量高和總苷、RA 苷含量高的甜葉菊新品系，株高85～110 cm，株形為紡錘形，分枝向上伸長與主莖呈銳角，中下部分枝長，分枝能力強，一級分枝25 個以上，主莖粗約0.9～1.5 cm，莖的中部半木質化，基部木質化，上部柔嫩，一級分枝長30～60 cm，莖為淺綠色，圓形，密生白色短茸毛；根系淺，須根系，根系長15～28 cm；單葉對生，無葉柄，葉片廣披針形，葉基部窄，葉緣基部有淺鋸齒，中部以上鋸齒深，葉片厚，葉色深綠，三出葉脈，葉片大，葉長9～12 cm。該品種適應性強，病害少，扦插生根萌發(fā)能力很強，易于扦插擴繁。

花序為頭狀花序，兩性花，總苞筒狀，總苞綠色，5～6片，近等長，背面被短柔毛，一個總苞中有4～6個小花集生；小花花冠白色，5裂，喇叭口狀外展，基部聯(lián)合成筒狀，呈淡紫色或白色，花托平坦，禿凈，開花順序自上而下，由內(nèi)向外呈螺旋狀開放，各分枝的開花順序與主莖一致；小花有雄蕊5枚，全著藥，花絲分離，著生于花托，花藥位于柱頭下方，圍繞花柱著生，為聚藥雄蕊；雌蕊1枚，由2個心皮構成，下位子房，1室1胚珠，花柱細長，開花后，柱頭從花藥筒頂端小口伸出，呈“Y”型張開。

生產(chǎn)植株平均密度約15 萬株/hm2，平均干葉產(chǎn)量約6 240 kg/hm2，干葉品質性狀為RA 苷平均含量12.17%，總苷平均含量19.22%，RA/總苷含量平均63.32%，口感好，綜合抗性強。

4 ‘GTJ-101’品系栽培技術要點

當日平均氣溫穩(wěn)定在15℃左右，地溫達到10℃以上，幼苗長至5～8 對真葉（10～15 cm），甜葉菊即可起苗移栽。河西地區(qū)一般于4月下旬至5月中旬移栽定植。定植前施用基肥，以有機肥為主，每公頃大田施用腐熟的廄肥37 500 kg 或腐熟的餅肥750～1 125 kg，同時施以45%的硫酸鉀型三元復合肥675 kg，撒施均勻后旋耕耙平。平整耙壓后覆膜，采用140 cm黑色地膜，膜面寬120 cm，膜間距40 cm。有滴灌條件的，可一次性將滴灌帶鋪入，即一膜兩管4 行定植。定植時行株距為37.5 cm×18 cm，定植密度14.25 萬株/hm2～16.5 萬株/hm2。

移栽后要及時澆足定根水，15～20 d 后澆緩苗水。苗期喜溫怕澇，灌水量要少，促苗早發(fā)，進入7—8 月隨生長速度加快，要縮短灌水問隔，每10 d 左右澆水1 次，全生育期灌水7～8 次。當株高達到30～35 cm 左右要及時摘去主莖頂端1～2 cm，抑制主莖生長，促使側枝早萌快發(fā)加速生長，實現(xiàn)高產(chǎn)目標。根據(jù)甜葉菊需肥規(guī)律，6 月中旬為甜葉菊營養(yǎng)生長第一階段，施尿素75～112.5 kg/hm2。7 月中旬過后氣溫升高，甜葉菊進入快速營養(yǎng)生長階段，莖葉旺長期，植株根系生長較發(fā)達，吸肥能力強，此階段肥水應充足，施尿素150～225 kg/hm2，配合增施磷鉀復合肥，并葉面噴施0.2%磷酸二氫鉀與0.5%尿素混合液作葉面肥；9 月份甜葉菊進入生殖生長階段，最佳收獲期在植株始蕾前10 d，約9月10日前后。

5 結論

甜葉菊的糖苷是決定其品質的內(nèi)在因素，總糖苷和RA 苷含量是評價甜葉菊品種質量好壞的重要指標[10-11]。‘GTJ-101’具有RA 苷含量高、整齊度好、利于集中收獲等特點。該品系RA 苷平均含量可達12.17%，RA 苷/總苷為63.32%，平均干葉產(chǎn)量達6 241.24 kg/hm2，且適應能力強，綜合抗性好，是目前國內(nèi)甜葉菊生產(chǎn)中一個兼品質及農(nóng)藝等綜合性狀優(yōu)良的甜葉菊新品系，尤其適宜甘肅省河西地區(qū)種植。