李 娜， 王旭文， 劉艷之

(山西振東安特生物制藥有限公司，山西 晉中 030600)

膠體果膠鉍是一種新型膠體鉍制劑，具有保護(hù)胃腸黏膜、直接殺滅幽門螺桿菌和止血作用，可促進(jìn)潰瘍愈合、炎癥好轉(zhuǎn)，并可降低潰瘍的復(fù)發(fā)率。其作用機(jī)制在于本藥具有較強(qiáng)的膠體特性，在酸性介質(zhì)中形成高黏度溶膠，與潰瘍面及炎癥表面強(qiáng)力親和，形成有效的保護(hù)膜，隔離胃酸，增強(qiáng)胃黏膜的屏障作用，因此本藥對(duì)消化性潰瘍和慢性胃炎有較好的治療作用[1]。

大量藥理及臨床資料表明，鉍鹽類藥物對(duì)胃腸疾病的治療作用與其和受損傷胃腸黏膜的黏附性呈正相關(guān)，而黏附性又與藥物的膠體特性有關(guān)，膠體特性好的鉍鹽不僅能增強(qiáng)對(duì)胃腸黏膜的保護(hù)作用，同時(shí)也有利于殺滅幽門螺桿菌。黏度可反映出藥物的膠體特性，膠體果膠鉍黏度越大，在胃粘膜上形成的保護(hù)膜越牢固，對(duì)糜爛面和潰瘍?cè)畋Ｗo(hù)作用越強(qiáng)；反之，黏度越小，在胃黏膜上形成的保護(hù)膜越薄弱，對(duì)糜爛面和潰瘍?cè)畋Ｗo(hù)作用越弱[2]。

因此，膠體果膠鉍的膠體特性擬用黏度來進(jìn)行評(píng)價(jià)，以更好地控制其質(zhì)量。

本研究是將膠體果膠鉍加適量水分散后，再加人工胃液形成高黏度的穩(wěn)定溶膠，采用轉(zhuǎn)子型旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)測(cè)定上述溶膠在37 ℃條件下的動(dòng)力黏度，操作簡(jiǎn)便快速，結(jié)果準(zhǔn)確。在模擬人體胃腸環(huán)境中測(cè)定動(dòng)力黏度，更能體現(xiàn)出膠體果膠鉍在人體中的黏度情況，以體現(xiàn)出膠體果膠鉍或含膠體果膠鉍制劑的膠體特性。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

NDJ-8S微機(jī)型數(shù)字顯示旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)，上海衡平儀器儀表廠；DC-0506W低溫恒溫槽，上海衡平儀器儀表廠。

1.2 試藥

膠體果膠鉍，山西振東安特生物制藥有限公司，批號(hào)：20180501、20180502、20180503；胃蛋白酶，上海阿拉丁生化科技股份有限公司，分析純，活力1:15000，批號(hào)：L1714086；鹽酸，西隴化工股份有限公司，分析純，批號(hào)：151204；試驗(yàn)用水為純化水。

2 方法及結(jié)果

2.1 溶液的制備

樣品溶液的制備：取膠體果膠鉍4.0 g(以鉍計(jì)0.6 g)，精密稱定，置于500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，即得。

人工胃液的制備：取稀鹽酸16.4 mL，加水約800 mL，胃蛋白酶10 g，搖勻后，加水稀釋成1 000 mL，即得[3]。

稀鹽酸的制備：取鹽酸234 mL，加水稀釋至1 000 mL，即得。本液含HCl體積分?jǐn)?shù)為9.5%～10.5%[4]。

2.2 黏度測(cè)定方法各實(shí)驗(yàn)條件的確定

2.2.1 測(cè)定溫度

中國(guó)藥典2015年版黏度測(cè)定溫度為20 ℃和25 ℃[5]，考慮到為評(píng)價(jià)膠體果膠鉍進(jìn)入人體內(nèi)的黏附力，因此測(cè)定溫度選用人體溫度37 ℃。

2.2.2 轉(zhuǎn)子及轉(zhuǎn)速

取20180501批膠體果膠鉍4.0 g，精密稱定，置于500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加水380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液。將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法(中國(guó)藥典2015年版四部通則0633第三法)測(cè)定。旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)分別選用1#、2#轉(zhuǎn)子，轉(zhuǎn)速6、12、30、60 r/min，結(jié)果見表1。

表1 不同轉(zhuǎn)子、轉(zhuǎn)速的動(dòng)力黏度測(cè)定結(jié)果

使用旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)測(cè)定動(dòng)力黏度時(shí)，質(zhì)量分?jǐn)?shù)應(yīng)在10%～90%，且質(zhì)量分?jǐn)?shù)在50%附近時(shí)動(dòng)力黏度值誤差較小。由表1可見，1#轉(zhuǎn)子、轉(zhuǎn)速6 r/min時(shí)，質(zhì)量分?jǐn)?shù)55.3%，最接近50%。因此，旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)的轉(zhuǎn)子確定為1#、轉(zhuǎn)速確定為6 r/min。

2.2.3 溶劑

取20180501批膠體果膠鉍3份，每份各4.0 g，精密稱定，置500 mL燒杯中，依次加水100、120、140 mL，攪拌使其分散，再分別加人工胃液400、380、360 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法(中國(guó)藥典2015年版四部通則0633第三法)測(cè)定，結(jié)果見表2。

表2 加水量考察測(cè)定結(jié)果

由表2可見，加水量為100、120、140 mL時(shí)百分比均在10%～90%，其中加水量為120 mL時(shí)樣品溶液的動(dòng)力黏度值最高，因此分散樣品的加水量確定為120 mL。

2.2.4 樣品濃度

取20180501批膠體果膠鉍2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 g，精密稱定，分別置于500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法測(cè)定(中國(guó)藥典2015年版四部通則0633第三法)，結(jié)果見表3、圖1。

表3 不同濃度樣品溶液的動(dòng)力黏度測(cè)定結(jié)果

圖1 樣品溶液的動(dòng)力黏度曲線圖

由圖1可見，動(dòng)力黏度隨樣品溶液濃度增加而增大。由表3可見，樣品溶液質(zhì)量濃度為0.004、0.006、0.008、0.010 g/mL時(shí)質(zhì)量分?jǐn)?shù)均在10%～90%，質(zhì)量濃度為0.012 g/mL時(shí)質(zhì)量分?jǐn)?shù)超出10%～90%。當(dāng)稱樣量為4.0 g即質(zhì)量濃度為0.008 g/mL時(shí)，質(zhì)量分?jǐn)?shù)48.0%，動(dòng)力黏度值誤差較小，因此樣品溶液質(zhì)量濃度確定為0.008 g/mL，即樣品稱樣量4.0 g(以鉍計(jì)0.6 g)。

2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3.1 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

取20180502批膠體果膠鉍6份，每份各4.0 g，精密稱定，分別置500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法(中國(guó)藥典2015年版四部通則0633第三法)測(cè)定。6份樣品溶液，每份測(cè)定1次，動(dòng)力黏度平均值為630.7 mPa·s，RSD為1.42%(n=6)，表明方法重復(fù)性良好。結(jié)果見表4。

表4 重復(fù)性測(cè)定結(jié)果

2.3.2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

取20180503批膠體果膠鉍4.0 g，精密稱定，置500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，分別于0、1、2、3、4、5、6 h依法(中國(guó)藥典2015年版四部通則0633第三法)測(cè)定，動(dòng)力黏度平均值為622.8 mPa·s，RSD為1.45%(n=7)，表明樣品溶液在6 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。結(jié)果見表5。

表5 穩(wěn)定性考察測(cè)定結(jié)果

2.3.3 三批樣品測(cè)定結(jié)果

取20180501、20180502、20180503批膠體果膠鉍，各4.0 g，精密稱定，分別置于500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法(中國(guó)藥典2015年版四部通則0633第三法)測(cè)定。每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)6次，動(dòng)力黏度平均值分別為557.6、634.0、627.3 mPa·s，RSD分別為1.45%、1.43%、1.41%(n=6)，表明儀器精密度良好。結(jié)果見表6。

3 動(dòng)力黏度測(cè)定方法

綜合上述結(jié)果，確定膠體果膠鉍動(dòng)力黏度測(cè)定方法：取膠體果膠鉍4.0 g(以鉍計(jì)0.6 g)，精密稱定，置500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法(中國(guó)藥典2015年版四部通則0633第三法)測(cè)定。旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)選用1#轉(zhuǎn)子、轉(zhuǎn)速6 r/min。

4 結(jié)果及討論

4.1 溶劑的選擇

膠體果膠鉍在乙醇等有機(jī)溶劑中不溶，在水中結(jié)塊，振搖后能均勻分散在水中。為評(píng)價(jià)膠體果膠鉍進(jìn)入人體內(nèi)的黏度情況，模擬人體胃腸環(huán)境，考慮用人工胃液，結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣品直接加人工胃液不溶，必需先加少量的水使其均勻分散，再加人工胃液，才能形成穩(wěn)定的溶膠，以測(cè)定其動(dòng)力黏度。

表6 三批樣品的動(dòng)力黏度測(cè)定結(jié)果

4.2 胃蛋白酶的選擇

使用不同生產(chǎn)廠家、不同活力的胃蛋白酶配制的人工胃液，測(cè)定樣品溶液的動(dòng)力黏度值差別較大。分別考察了卡邁舒(上海)生物科技有限公司胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶15 000)、北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶12 000)、上海阿拉丁生化科技股份有限公司胃蛋白酶(活力1∶15 000)配制的人工胃液，在37 ℃條件下測(cè)定樣品溶液的動(dòng)力黏度，結(jié)果顯示，卡邁舒胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶15 000)測(cè)定的黏度值不穩(wěn)定且隨放置時(shí)間延長(zhǎng)而增大，奧博星胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶12 000)、阿拉丁胃蛋白酶(活力1∶15 000)測(cè)定的黏度值穩(wěn)定，考慮到奧博星胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶12 000))測(cè)的黏度值較阿拉丁胃蛋白酶(活力1∶15 000)數(shù)值低，誤差較大，因此選用阿拉丁胃蛋白酶(活力1∶15 000)。