夏彬/山東省榮成市夏莊畜牧獸醫(yī)站 264300
張令玉/山東省榮成市尋山畜牧獸醫(yī)站 264300
新城疫,俗稱“偽雞瘟”,是由新城疫病毒引起的一種急性、高度接觸性、烈性傳染病。本病主要導(dǎo)致禽類消化道和呼吸道損傷,會(huì)導(dǎo)致全身多臟器出血充血,蛋雞產(chǎn)蛋量下降,是危害養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的重要傳染病之一,該病被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織確定為A 類疫病,我國(guó)有關(guān)部門(mén)將其列為一類動(dòng)物疫病。
在我國(guó),新城疫同樣是嚴(yán)重危害家禽業(yè)發(fā)展的重要傳染病之一,約有70%以上的家禽養(yǎng)殖場(chǎng)暴發(fā)過(guò)新城疫感染,而每年的暴發(fā)率約為10%。其中肉用雞的感染率較高,其次是蛋雞。冬季至春季由于氣候多變、氣溫較低,是新城疫暴發(fā)的高峰期,受免疫情況影響,肉用雞感染后發(fā)病率和死亡率變化范圍較大,死亡率為5%~60%之間。產(chǎn)蛋雞感染后雖死亡率不高,但會(huì)嚴(yán)重降低蛋雞的產(chǎn)地率,對(duì)蛋雞的生產(chǎn)性能造成極大的損失,同樣不可被忽視。
2021年2 月 本地某蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)暴發(fā)了新城疫疫病,以下將對(duì)此次疫病的診治過(guò)程進(jìn)行逐一介紹。
2021年2 月,本地某蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)部分蛋雞出現(xiàn)精神沉郁、食欲減退、呼吸困難等癥狀,排出黃綠色的粥樣稀糞,病雞產(chǎn)蛋率下降,產(chǎn)蛋顏色變白,畸形蛋、破殼蛋的產(chǎn)量增加。養(yǎng)殖場(chǎng)主攜帶3 只病雞前來(lái)獸醫(yī)站問(wèn)診,經(jīng)飼養(yǎng)人員介紹,該批蛋雞免疫過(guò)馬立克氏病、新城疫、傳染性法氏囊病和傳染性支氣管炎疫苗,發(fā)病后飼養(yǎng)人員在飲水中添加泰樂(lè)菌素和復(fù)合維生素進(jìn)行緊急治療,病情并未得到有效控制。
發(fā)病初期,病雞精神沉郁、食欲減退,隨著病情的加劇,食欲和飲欲廢絕,并出現(xiàn)明顯的呼吸道癥狀,呼吸困難并伴咳嗽和喘息,呼吸時(shí)有“呼?!甭暎亻T(mén)周圍羽毛被糞便污染,排出黃綠色的粥樣稀糞。病雞產(chǎn)蛋量下降,雞蛋顏色變淺,軟皮單、薄殼蛋和太陽(yáng)蛋等畸形蛋的產(chǎn)量增多,但死亡病例不多。
對(duì)病死雞和發(fā)病雞進(jìn)行剖檢,可發(fā)現(xiàn)消化道和呼吸道氣管大面積的出血和腫大潰瘍,口咽部和嗉囊內(nèi)有大量的酸臭渾濁的黏液蓄積,內(nèi)臟漿膜粘膜和心冠脂肪有明顯的出血點(diǎn)或出血斑,卵泡血腫出血充血,易破裂。輸卵管水腫,有大量的分泌物蓄積且子宮部呈粒狀水腫,部分病雞的卵泡和輸卵管萎縮。
4.1 細(xì)菌的分離鑒定無(wú)菌采集死亡蛋雞的肝臟、脾臟等實(shí)質(zhì)臟器經(jīng)革蘭氏染色后鏡檢未觀察到明顯細(xì)菌的存在。同時(shí)將采集的臟器接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和鮮血瓊脂培養(yǎng)基上,置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,培養(yǎng)基平板上未生長(zhǎng)出單個(gè)菌落,證明此次疫病并非由細(xì)菌引起。
4.2 病毒分離傳代無(wú)菌采集死亡蛋雞的輸卵管、氣管等臟器使用無(wú)菌的PBS 進(jìn)行1 ∶2 稀釋,使用組織勻漿機(jī)進(jìn)行研磨制備組織研磨液,5000r/min離心15min,取上清加入雙抗,4℃孵育過(guò)夜后進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn)。將無(wú)菌的病料上清接種于10 日齡的SPF 雞胚,置于37℃恒溫箱孵育96h,將24h 內(nèi)的死胚棄去,每日觀察兩次,收集24~96h內(nèi)死亡的雞胚的尿囊液,連續(xù)接種10日齡SPF 雞胚傳代3 次,收集尿囊液保存并進(jìn)行進(jìn)一步鑒定。
4.3 血凝檢測(cè)對(duì)收集好的第三代尿囊液進(jìn)行血凝檢測(cè),在96 孔微量血凝板加入50μLPBS,第1 孔中加入50μL收集的尿囊液,多次混合后吸取50μL加入第2 孔中,進(jìn)行2 倍稀釋,依次稀釋至第10 孔,第11 孔加入50μLPBS作陰性對(duì)照,第12 孔加入新城疫病毒病毒液作陽(yáng)性對(duì)照。每孔加入50μL1%的雞紅細(xì)胞混合均勻后置于37℃恒溫箱中靜置培養(yǎng)15min,觀察血凝結(jié)果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)第三代尿囊液能夠顯著凝集雞紅細(xì)胞,其凝集價(jià)為1 ∶640,而對(duì)照組PBS 液中紅細(xì)胞不被凝集;因此初步診斷此次疫情可能由于感染雞新城疫病毒。
4.4 血凝抑制檢測(cè)為了對(duì)病原進(jìn)行進(jìn)一步鑒定,采用商品化的新城疫和禽流感陽(yáng)性血清對(duì)尿囊液進(jìn)行血凝抑制檢測(cè)。在96 孔微量血凝板加入50μLPBS,取50μL 新城疫或禽流感陽(yáng)性血清加入第1 孔內(nèi),充分混勻后,吸取50μL 至第2 孔,依次進(jìn)行2 倍稀釋至第10 孔,從第10 孔吸取50μL棄去,第11 孔中加入50μLPBS 作陰性對(duì)照。向血凝板中加入50μL 稀釋好的4HA100單位的尿囊液,混合均勻后37℃靜置10min 使尿囊液中的病毒和抗體充分結(jié)合。向血凝板中加入50μL1%的雞紅細(xì)胞,充分混勻后37℃孵育15min,觀察血凝抑制結(jié)果。血凝抑制結(jié)果顯示新城疫陽(yáng)性血清可以有效的抑制尿囊液中病毒的血凝活性,而禽流感陽(yáng)性血清不能有效抑制病毒的血凝活性,進(jìn)一步證明引起本次疫病的病原是新城疫病毒。
將發(fā)病雞群和健康雞群進(jìn)行嚴(yán)格隔離飼養(yǎng),對(duì)發(fā)病雞舍的籠具、地面及飼養(yǎng)相關(guān)的器具使用百毒殺進(jìn)行嚴(yán)格的消毒,將糞便、墊料和病死雞進(jìn)行無(wú)害化處理,保證雞舍環(huán)境衛(wèi)生、適當(dāng)?shù)臏囟取穸燃巴L(fēng),嚴(yán)格禁止健康雞舍和發(fā)病雞舍之間飼養(yǎng)人員的流動(dòng),以有效的切斷病原的傳播途徑。
在發(fā)病雞群的飲水中添加清瘟解毒口服液、鹽酸多西環(huán)素,飼料中添加黃芪多糖預(yù)混劑或益卵千金散等抗病毒藥物,連續(xù)飼喂7d,觀察病雞的恢復(fù)情況。
待雞群恢復(fù)健康后,對(duì)全部雞群加強(qiáng)免疫新城疫滅活疫苗,并在飲水中添加電解多維,以提高雞群的免疫能力,防止產(chǎn)生應(yīng)激。
經(jīng)過(guò)有效的治療,發(fā)病雞群的食欲飲欲逐漸恢復(fù),呼吸道病癥得到明顯的改善,雞蛋的顏色恢復(fù)正常,太陽(yáng)蛋或薄殼蛋等畸形蛋的產(chǎn)量下降,產(chǎn)蛋率逐漸恢復(fù)正常。
冬春季節(jié)氣候復(fù)雜多變,氣溫較低,是新城疫暴發(fā)的高峰時(shí)期,而本次疫病暴發(fā)時(shí)正逢雨雪天氣,雞舍內(nèi)氣溫低濕度高,雞群受外界刺激產(chǎn)生應(yīng)激,更容易遭受病原微生物的侵害。因此飼養(yǎng)人員在平時(shí)的飼養(yǎng)過(guò)程中要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。尤其在氣候多變季節(jié)要保證雞舍的溫度恒定,以減少雞群的應(yīng)激,提高雞群免疫力。
雖經(jīng)飼養(yǎng)人員介紹雞場(chǎng)內(nèi)雞群免疫過(guò)雞新城疫滅活疫苗,但仍暴發(fā)了新城疫疫情。其原因可能是因?yàn)轱曫B(yǎng)人員未從正規(guī)經(jīng)銷商處購(gòu)買(mǎi)安全可靠的疫苗,或?qū)σ呙绫4娌划?dāng)導(dǎo)致疫苗失活。也可能是由于飼養(yǎng)人員未聽(tīng)從專業(yè)人員建議的免疫程序,而是根據(jù)個(gè)人經(jīng)驗(yàn)對(duì)雞群進(jìn)行免疫,免疫程序不規(guī)范導(dǎo)致免疫失敗。因此養(yǎng)殖場(chǎng)在選擇疫苗時(shí)要從正規(guī)經(jīng)銷商處選擇安全可靠的疫苗,并根據(jù)說(shuō)明書(shū)對(duì)疫苗進(jìn)行合理保存,并聽(tīng)從專業(yè)獸醫(yī)的免疫建議,對(duì)雞群進(jìn)行合理免疫。