李鳳霞/湖北省孝感市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心 432100
非洲豬瘟(African swine fever,ASF)是由非洲豬瘟病毒(Africanswine fever virus,ASFV)引起的豬的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病,發(fā)病率和死亡率可達(dá) 100%,是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織OIE 規(guī)定的A 類動(dòng)物疫病,該病在臨床上與其他敗血性、出血性疾病極其相似,尤其與豬瘟較難進(jìn)行鑒別。我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病,也是必須報(bào)告的動(dòng)物疫病之一。其發(fā)生和流行會(huì)給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)損失和造成嚴(yán)重的社會(huì)影響危害。全球呈現(xiàn)高發(fā)態(tài)勢(shì),現(xiàn)階段對(duì)ASFV 防疫缺乏有效疫苗和治療方法。我國(guó)是世界第一養(yǎng)豬大國(guó),飼養(yǎng)量占世界總量的 50% 左右,因此加強(qiáng)研究ASFV 特點(diǎn)以及防控措施至關(guān)重要。
1921年?yáng)|部非洲的肯尼亞首次確認(rèn)非洲豬瘟疫,19 世紀(jì)60年代和90年代肯尼亞分別再次暴發(fā)ASF 坦桑尼亞于19 世紀(jì)80年代發(fā)生ASF。1989年馬拉威首次報(bào)道暴發(fā)ASF,1999年10 月加納有ASF 疫情發(fā)生的報(bào)告,2001年前報(bào)道發(fā)生ASF 的國(guó)家37 個(gè)(非洲27、歐洲8、美洲2),2001年后報(bào)道發(fā)生ASF 的國(guó)家28 個(gè)(非洲23、歐洲5);2009年發(fā)生非洲豬瘟的國(guó)家6 個(gè):俄羅斯、格魯吉亞、納米比亞、毛里求斯、坦桑尼亞、贊比亞,2013年11月18 日贊比亞近2000 豬死于ASF。2018年 8 月 3日,ASF 在中國(guó)遼寧省的沈陽(yáng)市首次暴發(fā),隨后周邊國(guó)家蒙古、朝鮮、韓國(guó)、越南、柬埔寨、老撾、緬甸、菲律賓以及印度尼西亞等也相繼暴發(fā)疫情,引起了全世界對(duì)其進(jìn)一步擴(kuò)散和蔓延的擔(dān)憂。一年多來(lái),疫情擴(kuò)散速度明顯加快,OIE通報(bào)的數(shù)據(jù)顯示,2019年 1 月至 10 月,曾暴發(fā)或正在暴發(fā)疫情的國(guó)家和地區(qū)有26 個(gè),其中歐洲 13 個(gè)、亞洲10 個(gè)、非洲3 個(gè),當(dāng)前亞洲的疫情尤為嚴(yán)重。
2.1 結(jié)構(gòu)和特征ASFV 是非洲豬瘟病毒科非洲豬瘟病毒屬中的唯一成員。在ASFV 電鏡下呈規(guī)則的二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu),直徑約200nm,病毒核直徑約80nm,由致密的核蛋白結(jié)構(gòu)組成的核中含有一種叫做核殼的較厚的蛋白質(zhì),含有幾種病毒蛋白,細(xì)胞核周圍有兩層被稱為內(nèi)膜的脂質(zhì)雙分子層。內(nèi)膜是衣殼,由主要結(jié)構(gòu)蛋白p72組成,約占病毒蛋白質(zhì)總量的1/3,構(gòu)成病毒的二十面體結(jié)構(gòu)。該病毒是媒介昆蟲(chóng)傳播的DNA 病毒。目前發(fā)現(xiàn)ASFV 至少有8 種血清型。其中心層主要由蛋白質(zhì)構(gòu)成,厚度約為30nm。核蛋白由基因組和核蛋白組成的直徑約為80nm。病毒基因組由一條直線雙鏈DNA 分子組成,大小為170~193kb,包含151~167 個(gè)開(kāi)放的閱讀框。通常,ASFV 的基因分類是基于編碼p72蛋白的B646L 基因的部分序列,然后基于中央變異區(qū)或其他基因的部分序列,如p54 蛋白基因和p30 蛋白基因。目前,將ASFV 分為22 種基因型。ASFV 對(duì)熱的抵抗力不強(qiáng),55℃30min或60 ℃10min 即可使其滅活。ASFV在豬血液中4℃保存時(shí)可存活18 個(gè)月,在腐敗的血液中或冷鮮肉中可存活15周,豬體污染物中1 個(gè)月,室溫下、糞便中11d,冰凍肉尸內(nèi)可以存活15年。2%氫氧化鈉溶液于24h 內(nèi)使其滅活。ASFV 對(duì)乙醚及氯仿等脂溶劑敏感。最有效的消毒藥是10%苯及苯酚。
2.2 易感動(dòng)物和傳染源
非洲豬瘟病毒(CSFV)可以通過(guò)感染家豬、疣豬和蜱在繁殖環(huán)境和野生環(huán)境之間傳播。包括家豬和野豬。它的主要宿主是非洲野豬,特別是疣豬,以及美洲后頸野豬,美洲南部和中部的白唇野豬也被懷疑是病毒的攜帶者。被感染的豬表現(xiàn)出相應(yīng)的臨床癥狀。非洲豬瘟病毒也感染蜱,從而實(shí)現(xiàn)豬與自然環(huán)境的循環(huán)傳播。軟蜱如隱咀蜱、鈍邊蜱和豬虱,是非洲豬瘟的長(zhǎng)久宿主。非洲豬瘟可以在軟蜱中進(jìn)行繁殖,并在任何時(shí)候感染豬或野豬,但ASFV 不會(huì)感染人類。
感染豬和帶毒豬應(yīng)為傳染源,被感染豬的組織和體液含有高滴度病毒;被污染的水、谷倉(cāng)、車輛、用具和衣物也能感染健康的豬;受感染的豬肉和肉制品是ASFV 的重要傳染源,野豬和軟蜱是ASFV 的儲(chǔ)藏宿主。
2.3 發(fā)病機(jī)理及臨床癥狀A(yù)SFV 病毒可以通過(guò)口腔和呼吸系統(tǒng)進(jìn)入豬體內(nèi),并在鼻咽或扁桃體感染。病毒迅速擴(kuò)散到下頜淋巴結(jié),并通過(guò)淋巴和血液擴(kuò)散到全身。感染強(qiáng)病毒后細(xì)胞變化迅速,在出現(xiàn)明顯刺激反應(yīng)前細(xì)胞全部死亡。感染減毒病毒時(shí),刺激反應(yīng)很容易觀察到,細(xì)胞核變大,一般出現(xiàn)有絲分裂。
ASF 感染可分為急性、亞急性、慢性和隱性感染。發(fā)病率通常為100%,高毒株的致死率為100%,中毒株為60%~70%。只有在急性感染期才有大量的游離病毒顆粒。發(fā)病時(shí)體溫升至41℃,持續(xù)約4d,直至死亡前48h。體溫過(guò)低是其特征,臨床癥狀直到體溫過(guò)低才顯現(xiàn)。在豬感染ASFV病毒后的前3~4d,發(fā)燒期間食欲下降。躺在豬舍的角落里,四肢極度疲勞和虛弱,脈搏急促,呼吸困難,漿液性或粘液膿性結(jié)膜炎,皮膚出血。有些菌株可在發(fā)熱后第7d 或癥狀出現(xiàn)后1~2d 引起血性腹瀉、嘔吐和死亡。
由于ASFV 保護(hù)性免疫反應(yīng)的復(fù)雜性,目前還沒(méi)有理想的主動(dòng)或被動(dòng)免疫疫苗,主要采取嚴(yán)格的診斷和檢疫措施進(jìn)行防治。但是,在中國(guó)大陸任何接觸ASFV 活毒都是危險(xiǎn)的。因此,我國(guó)有必要建立一種非傳染性的診斷方法。ASFV 的診斷和其他病毒感染性疾病一樣,是以流行病學(xué)和病理學(xué)為基礎(chǔ),然后在BSL-3 實(shí)驗(yàn)室確診。目前用于檢測(cè)ASFV 抗原的方法有瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)、雙抗體夾心ELISA、電鏡、直接免疫熒光 法(direct immunofluoresence,DIF)和自動(dòng)玫瑰環(huán)法(HAD),其中常用的有DIF 和HAD。抗體檢測(cè)的方法包括補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)、間接免疫熒光(indirect immunofluorescence、IIF)、放射免 疫擴(kuò)散、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫斑點(diǎn)試驗(yàn),常用的方法有免疫熒光法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。當(dāng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果不確定或抗原制備困難或復(fù)雜時(shí),可使用免疫熒光法。因沒(méi)有疫苗抗體干擾,所以檢測(cè)ASFV 抗體具重要意義,尤其是亞急性和慢性型病例,患病動(dòng)物組織液和血清均可用來(lái)檢測(cè),OIE將ELISA 作為血清學(xué)檢測(cè)ASFV 的首選方法,目前應(yīng)用最廣的是間接ELISA和夾心ELISA。
當(dāng)前,我國(guó)非洲豬瘟防控工作取得了積極成效,但病毒已在我國(guó)定殖并形成較大污染面,疫情發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)依然較高,稍有松懈就可能反彈擴(kuò)散,必須建立健全常態(tài)化防控措施。該病傳播迅速、傳播媒介分布廣泛,再加上我國(guó)國(guó)土面積大,畜禽調(diào)運(yùn)距離遠(yuǎn),畜產(chǎn)品流通環(huán)節(jié)和渠道復(fù)雜,迫切需要加強(qiáng)規(guī)范和管理。在全國(guó)實(shí)施分區(qū)防控是重要舉措,需不斷提高防控能力,加強(qiáng)宣傳培訓(xùn),提高基層動(dòng)物防疫人員對(duì)非洲豬瘟的鑒別診斷能力,提高養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)生物安全水平,推動(dòng)生豬產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型升級(jí),減少生豬長(zhǎng)距離調(diào)運(yùn),防范疫病跨區(qū)域傳播風(fēng)險(xiǎn)。