王言，鐘志君，何志平，雷云峰，楊雪梅，梁艷，陶璇，楊躍奎，曾凱，應(yīng)三成，龔建軍，陳曉暉，呂學(xué)斌，顧以韌

(四川省畜牧科學(xué)研究院/動物遺傳育種四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610066)

四川悠久的養(yǎng)豬歷史和復(fù)雜多樣的地理環(huán)境造就了表型各異、抗逆性強(qiáng)、肉質(zhì)優(yōu)良的地方豬種，主要包括內(nèi)江豬、成華豬、雅南豬、涼山豬、青峪豬、丫杈豬和藏豬[1-2]。 內(nèi)江豬主產(chǎn)于四川盆地東南淺丘地區(qū)，2000年被農(nóng)業(yè)部列為“國家級畜禽資源保護(hù)品種”，是中國優(yōu)良的大型地方豬種；成華豬主產(chǎn)于四川省成都平原的中部，體型中等偏小，因其肉質(zhì)鮮嫩被譽(yù)為四川傳統(tǒng)美食回鍋肉的“最好搭檔”；雅南豬主產(chǎn)于四川盆地西部低山丘陵地區(qū)，是四川省丘陵地區(qū)飼養(yǎng)的主要豬種之一；涼山豬是烏金豬的一種類群,主要分布于四川涼山彝族自治州,以其優(yōu)良的肉質(zhì)和抗寒、耐粗飼等特性受到廣泛關(guān)注；青峪豬屬中熟、中型肉脂兼用型品種，主產(chǎn)于四川省巴中市，是湖川山地豬的一種類群，具有典型山地型豬種特征；丫杈豬主要分布于四川省瀘州市的古藺縣、敘永縣和宜賓市的興文縣、珙縣等地，體型較大，2012年被列入我國畜產(chǎn)品資源豬類重點(diǎn)保護(hù)品種，收錄進(jìn)《中國畜禽遺傳資源志》；四川藏豬主產(chǎn)于四川甘孜州和阿壩州，是我省唯一的高原型豬種，也是我國國家級重點(diǎn)保護(hù)品種中唯一的高原型豬種，具有適應(yīng)高海拔惡劣氣候環(huán)境、抗病、耐粗等特點(diǎn)，但繁殖力低。以上6個地方豬種皮毛均為黑色。然而，由于品種資源保護(hù)不力、選育程度低、開發(fā)利用不充分等因素，導(dǎo)致整體生產(chǎn)效率較低，研究數(shù)據(jù)不全，品種資源優(yōu)勢沒能轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)業(yè)優(yōu)勢，且隨著社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展和多元化消費(fèi)市場需求的推動，地方豬種資源種質(zhì)特性也隨之發(fā)生變化[3]。因此，科學(xué)地發(fā)掘和評價四川地方豬種遺傳多樣性并進(jìn)行開發(fā)性保護(hù)，已成為一項(xiàng)十分重要且緊迫的任務(wù)。

為了增加對四川省地方豬種遺傳價值和經(jīng)濟(jì)價值的認(rèn)識，充分發(fā)掘、評價和利用地方豬種優(yōu)良種質(zhì)特性，促進(jìn)地方豬種資源保護(hù)，為培育新品種(系)和滿足市場消費(fèi)需求的優(yōu)質(zhì)風(fēng)味豬配套系提供重要育種素材，本研究系統(tǒng)測定了四川省6個地方豬種肥育、胴體、肉質(zhì)常規(guī)理化性能和代謝組相關(guān)指標(biāo)，旨在進(jìn)一步挖掘四川地方豬種優(yōu)勢特色性狀，明晰地方豬種質(zhì)特性，為開展地方豬有效保種和科學(xué)利用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 地方豬種

地方豬種包括內(nèi)江豬、成華豬、雅南豬、青峪豬、涼山豬和丫杈豬，每個品種豬來自15～20窩，選擇體型大小相近的豬，均在四川省畜牧科學(xué)研究院種豬科研基地統(tǒng)一飼養(yǎng)。試驗(yàn)日糧主要營養(yǎng)成分為：消化能13.33 MJ/kg，粗蛋白15.7%，鈣0.80%，總磷0.70%，賴氨酸0.83%，食鹽0.40%。

1.2 生產(chǎn)性能與胴體性能測定

試驗(yàn)前所有公母豬均閹割去勢，于20 kg體重梯度(70～90日齡)時組建群體開始試驗(yàn)，試驗(yàn)期間自由采食、飲水。所有試驗(yàn)豬健康狀況良好，每個品種60頭，共計(jì)360頭，于2015年3月開始組建群體，由2棟圈舍(水泥地面，自動風(fēng)暖系統(tǒng)，風(fēng)機(jī)、水簾降溫系統(tǒng))進(jìn)行小圈飼養(yǎng)(圈舍規(guī)格：1.8 m×3.0 m)，每圈3頭。試驗(yàn)豬分別于試驗(yàn)開始和結(jié)束當(dāng)天早飼前空腹稱重，每天記錄采食量，試驗(yàn)豬分別達(dá)到75 kg(200～250日齡)和90 kg(230～290日齡)體重梯度時進(jìn)行測量，并計(jì)算日增重和料重比。次日于四川省畜牧科學(xué)研究院種豬科研基地屠宰中心進(jìn)行屠宰，屠宰前停食24 h，自由飲水，每個品種每個體重梯度屠宰30頭，屠宰測定過程中嚴(yán)格按照文獻(xiàn)[4]操作；屠宰后立刻采取新鮮的背最長肌樣本用于后續(xù)試驗(yàn)。

1.3 肉質(zhì)與代謝組相關(guān)指標(biāo)測定

pH值和肉色：分別采用pH Star測定儀和標(biāo)準(zhǔn)比色卡測定，測定方法參照文獻(xiàn)[4]操作。

嫩度：將背最長肌樣品在4 ℃冰箱嫩化72 h后，將其放入恒溫水浴鍋中80 ℃加熱，同時用熱電耦測溫儀測量肉樣中心溫度，待肉樣中心溫度達(dá)到70 ℃時，將肉樣取出冷卻至中心溫度為0～4 ℃。用直徑為1.27 cm的圓形取樣器沿與肌纖維平行的方向鉆切肉樣，剔除有明顯缺陷的孔樣。使用CT3 Texture Analyzer型物性測試儀(Brook field, USA)加載Warner-Bratzler Shear刀具對豬背最長肌嫩度進(jìn)行測定，每個樣品測定不少于3次重復(fù)。

肌纖維直徑：采用冰凍切片機(jī)(Kedee, China)制作背最長肌樣本的冰凍切片，HE染色后用顯微成像系統(tǒng)采集代表性區(qū)域圖像，通過Motic Images Advanced 3.2顯微圖像分析軟件測定每個樣品中100根肌纖維的直徑。

肌內(nèi)脂肪含量：采用全自動快速抽提儀(Buchi, Switzerland)進(jìn)行抽提，程序設(shè)置為萃取2 h，淋洗5 min，干燥20 min，每個樣本獨(dú)立測定2次。樣品處理和試驗(yàn)操作嚴(yán)格按照文獻(xiàn)[5]進(jìn)行。

硫胺素含量：樣本處理和試驗(yàn)方法按照文獻(xiàn)[6]操作。

氨基酸含量：稱取1 g左右的樣品于特制的水解管底部，緩慢加入8 mL 6 mol/L HCl溶液并輕輕轉(zhuǎn)動水解管，保證樣品得到全部潤濕，抽真空，維持5 min后封口，(110±1) ℃水解22～24 h。切開水解管用去離子水全部轉(zhuǎn)移到25 mL容量瓶中定容，雙層濾紙過濾。取濾液1 mL置于25 mL小燒杯中，在加NaOH的真空干燥器中蒸干(水浴加熱不超過50 ℃)，加入1 mL pH值為2.2的鹽酸溶解后，溶液轉(zhuǎn)移1.5 mL的離心管中。10 000 r/min離心10 min，取上清液0.5 mL于樣品瓶中采用液相色譜儀(Agilent, USA)進(jìn)行氨基酸含量分析。

脂肪酸含量：①取1.0 g樣品以甲醇∶氯仿=2∶1超聲提取后過濾，濾液經(jīng)氮吹濃縮后，加乙醚己烷(2∶1)溶解，加1 mol/L KOH-甲醇，70 ℃水浴反應(yīng)30 min后冷卻，加1 mL去離子水分層后取上層溶液進(jìn)樣。②GC-MS(Bruker, USA)色譜分析條件：采用DB-WAX 30 m×0.25 mm×0.25 μm色譜柱，載氣為He，流速1 mL/min；進(jìn)樣口溫度250 ℃，分流比10∶1；初始溫度170 ℃，保持1 min，5 ℃/min升至230 ℃保持15 min。質(zhì)譜傳輸線溫度250 ℃，離子源類型為EI+，離子源溫度200 ℃；電子轟擊能量70 eV，發(fā)射電流50 μA；質(zhì)量掃描范圍：(33～450)amu。

揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)含量：①固相微萃取(SPME)：將每個豬背最長肌樣品切碎至2 mm大小的顆粒后稱取6 g于15 mL樣品瓶內(nèi)，70 ℃恒溫30 min后進(jìn)行萃取，萃取頭為DVB/CAR/PDMS 50/30 μm，纖維頭長度2 cm，萃取溫度為70 ℃，萃取40 min，解析溫度250 ℃，解析時間3 min，萃取頭首次使用時在氣相色譜進(jìn)樣口根據(jù)廠家推薦的條件進(jìn)行老化。②氣質(zhì)聯(lián)用儀(Bruker, USA)進(jìn)樣口溫度250 ℃，不分流進(jìn)樣；載氣為He，流速1 mL/min；色譜柱為DB-WAX 30 m×0.25 mm× 0.25 μm；升溫條件為初始溫度40 ℃保持3 min，5 ℃/min升至90 ℃，10 ℃/min升至230 ℃保持7 min。質(zhì)譜分析同脂肪酸含量測定部分。

三點(diǎn)均膘、屠宰率、瘦肉率、眼肌面積測定：參照文獻(xiàn)[4]操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用Sigmaplot 12.0軟件分別對數(shù)據(jù)進(jìn)行ANOVA和t檢驗(yàn)分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同地方豬種肥育性能比較

由表1可知：相同體重梯度不同豬種間，在75 kg和90 kg體重梯度時6個地方豬種日增重范圍分別為343.10～402.66 g和358.35～433.89 g，均表現(xiàn)為丫杈豬日增重最高，涼山豬次之，成華豬最低，且丫杈豬與成華豬間的日增重差異在75 kg和90 kg體重時分別達(dá)顯著(P<0.05)和極顯著水平(P<0.01)。75 kg和90 kg體重梯度時料重比范圍分別為3.80～4.61和4.05～4.77，均為丫杈豬最低，成華豬最高，且不同體重梯度時丫杈豬料重比均顯著或極顯著低于成華豬和雅南豬差異(P<0.01或P<0.05)，而與其他豬種差異不顯著(P>0.05)。相同豬種不同體重梯度間，內(nèi)江豬、青峪豬和涼山豬的日增重在75 kg和90 kg體重梯度間差異極顯著(P<0.01)，而其他豬種日增重在不同體重梯度間均差異不顯著(P>0.05)。

表1 不同地方豬種肥育性能測定結(jié)果(n=30)

2.2 不同地方豬種胴體性能和肉質(zhì)常規(guī)理化性能比較

由表2可知：相同屠宰體重梯度不同豬種間，75 kg和90 kg體重梯度時6種地方豬種屠宰率范圍分別是68.55%～72.60%和70.35%～74.47%，三點(diǎn)均膘范圍分別是2.57～3.42 cm和2.99～3.97 cm，瘦肉率范圍分別是41.84%～46.72%和40.64%～45.83%，眼肌面積范圍是17.63～21.16 cm2和19.50～23.00 cm2。丫杈豬擁有更高的屠宰率、瘦肉率和更大的眼肌面積；成華豬和青峪豬胴體性能較差，表現(xiàn)為成華豬的屠宰率和眼肌面積顯著或極顯著低于丫杈豬(P<0.05或P<0.01)；而青峪豬的平均背膘在所有地方豬中最厚，瘦肉率最低。相同豬種不同體重遞度間，丫杈豬隨體重的增加屠宰率顯著提高(P<0.05)；成華豬、青峪豬、雅南豬和丫杈豬三點(diǎn)均膘隨體重的增加顯著或極顯著提高(P<0.05或P<0.01)；成華豬和青峪豬眼肌面積隨體重的增加顯著或極顯著提高增大(P<0.05或P<0.01)，而各豬種瘦肉率隨體重增加呈下降趨勢，但差異不顯著(P>0.05)。

表2 不同地方豬種胴體性能測定結(jié)果(n=30)

由表3可知：不同地方豬種豬肉pH值均在正常范圍(pH1>6.0, pH2<6.0)，肌內(nèi)脂肪豐富，75 kg體重時，不同豬種間肉色評分差異不顯著(P>0.05)；而90 kg體重時，丫杈豬肉色最佳，顯著或極顯著高于雅南豬、青峪豬和內(nèi)江豬(P<0.05或P<0.01)。pH值、肌纖維直徑、嫩度和肌內(nèi)脂肪在各豬種間差異不顯著(P>0.05)，但雅南豬具有更粗的肌纖維直徑、更大的嫩度值和更低的肌內(nèi)脂肪，肉質(zhì)性能常規(guī)理化表型指標(biāo)相對較差。除丫杈豬和涼山豬肉色隨體重增加改善顯著外(P<0.05)，其他肉質(zhì)常規(guī)理化表型指標(biāo)受體重影響均不顯著(P>0.05)。

表3 不同地方豬種肉質(zhì)常規(guī)理化表型指標(biāo)測定結(jié)果

2.3 不同地方豬種代謝組相關(guān)指標(biāo)比較

由表4可知：75 kg體重時，丫杈豬和涼山豬肌肉中的油酸+亞油酸和己醛+壬醛總量更高，顯著或極顯著高于成華豬和雅南豬(P<0.05或P<0.01)，而肌肉中硫胺素、含硫氨基酸、主要鮮味氨基酸和硬脂酸含量在各豬種間差異不顯著(P>0.05)；90 kg體重時，丫杈豬肌肉中的油酸+亞油酸和己醛+壬醛總量最高，極顯著的高于成華豬和雅南豬(P<0.01)，主要鮮味氨基酸含量顯著高于成華豬和雅南豬(P<0.05)，而成華豬和雅南豬肌肉中硬脂酸含量極顯著高于其他地方豬種(P<0.01)。各地方豬種中僅青峪豬肌肉中油酸+亞油酸和己醛+壬醛含量以及涼山豬肌肉中油酸+亞油酸含量在不同體重間差異達(dá)顯著水平(P<0.05)。

表4 不同地方豬種代謝組相關(guān)指標(biāo)(滋味和香味物質(zhì))測定結(jié)果

3 討論

3.1 四川省主要地方豬種肥育性能

四川省擁有豐富的豬種遺傳資源，這些地方豬種具有肉質(zhì)好、抗病力強(qiáng)、利用當(dāng)?shù)氐唾|(zhì)量飼料資源能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，但生長肥育性能差[7-8]。本研究結(jié)果表明：丫杈豬的日增重和料重比最佳，涼山豬和內(nèi)江豬次之，成華豬最差。因丫杈豬在保種場已經(jīng)過多個世代的專門化選育，而成華豬由于歷史原因組建核心群不久，未經(jīng)系統(tǒng)的本品種選育。在體重對料重比影響不顯著的情況下，內(nèi)江豬、青峪豬和涼山豬的日增重隨其體重的增加極顯著提高，說明作為中大型優(yōu)良地方豬種，內(nèi)江豬、青峪豬和涼山豬后期相對生長強(qiáng)度更大，國內(nèi)目前廣泛推薦的75 kg作為地方豬種屠宰體重[9]并不適用，且在對地方豬種生長性能選育過程中可重點(diǎn)關(guān)注日增重指標(biāo)。

3.2 四川省主要地方豬種胴體和常規(guī)肉質(zhì)理化性能

20世紀(jì)90年代，世界各國對豬的遺傳改良主要集中在提高生長速度和瘦肉率等生長和胴體性狀方面，與西方商業(yè)化豬種相比，由于長期以來缺乏專門化選育和持續(xù)改良,四川省地方豬種屠宰率、瘦肉率等胴體性狀遠(yuǎn)低于西方商業(yè)化豬種[10-11]。本試驗(yàn)的胴體性能指標(biāo)中，丫杈豬的屠宰率和瘦肉率最高，胴體性能最好；青峪豬的瘦肉率最低、眼肌面積最小、背膘最厚，胴體性能最差，表明對青峪豬的胴體性能指標(biāo)選育可重點(diǎn)關(guān)注背膘厚和眼肌面積。影響豬肉質(zhì)的常規(guī)理化指標(biāo)主要包括：pH值、肉色、肌纖維直徑和嫩度等[8]。屠宰后pH值反映肌肉中糖原酵解速度，糖酵解產(chǎn)生的乳酸和ATP分解產(chǎn)生的磷酸使屠宰后肌肉pH值降低，高比例的糖原和ATP酶會使屠宰后pH值迅速降低，甚至?xí)a(chǎn)生PSE(顏色灰白、質(zhì)地松軟、表面滲水)等劣質(zhì)肉,其可作為區(qū)分正常和異常肉質(zhì)的重要指標(biāo)；嫩度受肌纖維直徑、肌內(nèi)脂肪含量及結(jié)締組織分布等因素影響，是影響口感愜意度的重要指標(biāo)，更大肌纖維直徑和更低的肌內(nèi)脂肪意味著肌肉剪切力更大，嫩度較低，口感下降；肉色反映肉的新鮮和感官健康程度，肌紅蛋白含量高，骨骼肌呈鮮紅色，肉色評分理想，肉中風(fēng)味物質(zhì)保持良好；肌內(nèi)脂肪是影響豬肉風(fēng)味最主要的表征性指標(biāo)，更高比例的肌內(nèi)脂肪意味著風(fēng)味的前體物質(zhì)更豐富，口感更好、風(fēng)味更佳[12-13]。本試驗(yàn)中，所有地方豬種pH值均在正常值范圍，未出現(xiàn)PSE肉；丫杈豬和涼山豬肉色評分優(yōu)于其他地方豬種，說明丫杈豬和涼山豬屠宰后肉的感官品質(zhì)更佳，肌紅蛋白含量更高，肌肉中風(fēng)味物質(zhì)也保持的更好，且更大的屠宰體重有利于改善其肉色，而雅南豬的肌纖維直徑、肌內(nèi)脂肪和嫩度相對較差，涼山豬綜合表現(xiàn)更好，多汁性更好。

3.3 四川省主要地方豬種代謝組相關(guān)肉質(zhì)指標(biāo)性能

代謝組相關(guān)的肉質(zhì)風(fēng)味指標(biāo)包括非揮發(fā)性滋味物質(zhì)和揮發(fā)性香味物質(zhì)，其中，非揮發(fā)性滋味物質(zhì)指的是硫胺素、氨基酸和脂肪酸等，而揮發(fā)性的香味物質(zhì)指的是醛類、醇類、酮類、酸類、酯類和呋喃類等物質(zhì)。硫胺素和含硫氨基酸是豬肉重要的風(fēng)味前體物質(zhì)，對炙烤狀態(tài)下豬肉的整體風(fēng)味形成起著重要的貢獻(xiàn)，因其降解形成的含硫化合物風(fēng)味閾值均非常低，很少的量就能有非常明顯的效應(yīng)；谷氨酸和天冬氨酸是畜禽肉中最重要的2個鮮味氨基酸，能起到增加豬肉的鮮味和增強(qiáng)風(fēng)味的作用[14-15]。硬脂酸含量與肉質(zhì)風(fēng)味呈負(fù)相關(guān)，且含量過高會使血液中甘油三酯升高，不利于身體健康，脂質(zhì)降解所產(chǎn)生的揮發(fā)性化合物可產(chǎn)生不同種類的特征風(fēng)味，而醛類在揮發(fā)性化合物組成中因閾值低、含量高而對風(fēng)味起最主要作用[16]。鐘志君等[17]研究表明油酸+亞油酸總量可作為脂肪酸影響肉質(zhì)風(fēng)味的評價指標(biāo)，而己醛+壬醛總量可作為揮發(fā)性香味物質(zhì)表征性評價指標(biāo)。本試驗(yàn)中，成華豬和雅南豬具有更低的主要鮮味氨基酸含量、油酸+亞油酸和己醛+壬醛總量以及更高的硬脂酸含量，表明地方豬種中成華豬和雅南豬肉質(zhì)風(fēng)味相對較差，而丫杈豬肉中影響風(fēng)味的前體物質(zhì)以及揮發(fā)性的醛類含量更豐富，表明其香味更濃郁、品質(zhì)更優(yōu)。而相同品種不同體重遞度間的代謝組相關(guān)肉質(zhì)指標(biāo)結(jié)果表明，提高屠宰體重不僅未改善肉質(zhì)風(fēng)味，還在一定程度上降低了揮發(fā)性香味物質(zhì)己醛+壬醛總量，且青峪豬和涼山豬的油酸+亞油酸含量也呈顯著下降趨勢。因此，在兼顧生長速度的前提下，科學(xué)地確定屠宰體重和肉質(zhì)風(fēng)味間的平衡點(diǎn)將是今后地方豬種質(zhì)資源研究的熱點(diǎn)。

4 結(jié)論

四川省主要地方豬種肉質(zhì)好、口感風(fēng)味佳，但肥育和胴體性能是其劣勢。綜合而言，成華豬和雅南豬肉質(zhì)風(fēng)味較差，丫杈豬綜合性能更好，但涼山豬在肥育、胴體和肉質(zhì)風(fēng)味性狀上表現(xiàn)相對均衡，很有特色。然而目前涼山豬受引進(jìn)豬種沖擊嚴(yán)重，且剛建立保種場，核心群數(shù)量有限，技術(shù)力量不足，條件簡陋，缺乏科學(xué)的保種規(guī)劃和合理的雜交利用方式，所以應(yīng)加強(qiáng)對涼山豬的種質(zhì)資源保護(hù)和科學(xué)地進(jìn)行開發(fā)利用。