李梁杰 李岳 黃如 Byar Shubh Narayan 程開

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154000)

酒精性肝病(ALD)是由長期大量飲酒所致的慢性肝病，其發(fā)病機制尚不明確，且目前酒精攝入的安全閾值尚有爭議，其早期診斷困難并且缺乏針對性的治療，很容易被忽視和漏診。骨髓造血干細胞(HSCs)的自我更新與多向分化或許是酒精性肝纖維化治療的一個方向，并且骨髓細胞移植本身就是血液病的既定治療方法。而且循環(huán)中的miRNA在極端條件下(低pH，酸性環(huán)境，RNase抗性)具有極大的穩(wěn)定性，被認為是可替代的非侵入性生物標(biāo)志物。

1 酒精性肝病的現(xiàn)狀及其治療

酒精性肝病(ALD)是由長期大量飲酒所致的慢性肝病。炎癥等致病因素激活肝星狀細胞(HSC),膠原合成增加、降解減少是其基本病理表現(xiàn)。酒精性肝病(ALD)是世界范圍內(nèi)最常見的慢性肝病。酒精性脂肪肝(ALD)可從酒精性脂肪肝(AFL)發(fā)展為以肝臟炎癥為特征的酒精性脂肪性肝炎(ASH)。慢性ASH最終會導(dǎo)致纖維化和肝硬化，在某些情況下還會導(dǎo)致肝細胞癌(HCC)。此外，嚴重的ASH(伴有或不伴有肝硬化)可導(dǎo)致酒精性肝炎，這是ALD的一種急性臨床表現(xiàn)，與肝功能衰竭和高死亡率有關(guān)[1]。全球疾病負擔(dān)(GBD)項目估計，2016年有1 256 900人死于肝硬化和慢性肝病。其中，334 900人(27%)可歸因于酒精。此外，有24.5萬人死于與酒精有關(guān)的肝癌，占所有肝癌死亡人數(shù)的30%，疾病負擔(dān)沉重[2]。在世界范圍內(nèi)，大多數(shù)初次被診斷為ALD的患者均未經(jīng)過早期有關(guān)過度飲酒(AUD)的篩查，失去了早期ALD的診斷機會[3]。

我們回顧了最近的研究結(jié)果，這些研究表征了與ALD相關(guān)的特定的細胞內(nèi)信號通路、轉(zhuǎn)錄因子、腸道通透性、活性氧(ROS)、腸源性脂多糖(LPS，又名內(nèi)毒素)、先天免疫、趨化因子、表觀遺傳學(xué)特征、microRNAs和干細胞，從而提高了我們對ALD發(fā)病機制的理解[4，5]。盡管取得了這些進展，但目前還沒有針對性的治療方法。

目前，ALD的基礎(chǔ)治療仍然是戒酒、營養(yǎng)支持和藥物治療。藥物治療無反應(yīng)者的不良結(jié)局強調(diào)了對這些患者進行早期肝移植評估的必要性。在歐洲，超過30%的肝移植是針對ALD進行的[2]。然而，由存在各種問題，包括缺乏捐助者、手術(shù)損傷、排斥和高費用，肝移植的應(yīng)用受到很大的限制[6]。

細胞移植療法是近年提出的一種微創(chuàng)替代療法，可能并發(fā)癥較少，是肝病細胞治療發(fā)展的寶貴資源。然而，肝細胞移植很少在人體臨床試驗中產(chǎn)生治療效果，主要是因為移植細胞的數(shù)量過低，無法達到預(yù)期的生物效應(yīng)，例如，膽汁的結(jié)合。鑒于肝細胞移植的上述問題，骨髓細胞(BMC)目前進入考慮范圍[6]，BMC移植本身就是一種既定的血液病治療方法。人體干細胞在保持分化能力的同時，可以大量增殖，是發(fā)展肝病細胞治療的極有價值的資源。特別是造血干細胞(HSCs)已經(jīng)被證明通過細胞融合的過程采用了受體細胞的表型[7，8]。細胞融合被認為是BMC與肝細胞分化的原因[9，10]。最近的數(shù)據(jù)顯示，自體同源的BMC表達MMP-9和MMP-13，因此，它們可能是庫普弗細胞(Kupffer cell)的前體，并有助于肝纖維化的自發(fā)回歸[11]。另一方面，福布斯等人報道說，骨髓細胞也能分化成星狀細胞，這將加速纖維化[12]。最新研究表明，干細胞治療可以減少肝臟炎癥，進而改善纖維化，這可能是肝硬化患者的有前景的一種治療措施[13]。

2 miRNA與酒精性肝病的研究現(xiàn)狀

microRNAs(miRNAs)是1993年首次描述的20～22個核苷酸長度的非編碼RNA。miRNAs在多種細胞過程中發(fā)揮核心作用，包括發(fā)育、免疫、細胞周期控制、新陳代謝、病毒或細菌疾病、干細胞分化和腫瘤發(fā)生[14,15]。纖維化和癌癥是慢性肝病的兩大并發(fā)癥。microRNAs與纖維化和癌癥的發(fā)展有關(guān)，構(gòu)成了潛在的治療靶點，因此在酒精性肝病中的研究也日益廣泛，如：miR-155被發(fā)現(xiàn)是與酒精相關(guān)的調(diào)節(jié)肝細胞自噬和外切體產(chǎn)生的介質(zhì)有關(guān)，自噬是通過消除酒精來維持體內(nèi)穩(wěn)定的關(guān)鍵途徑[16]；miR-21是在多種纖維化模型中激活的肝星狀細胞(HSC)中表現(xiàn)出最強上調(diào)的microRNA[17]；MicroRNA-200A靶向ZEB2誘導(dǎo)酒精性肝病細胞凋亡[18]；miR-122a在調(diào)節(jié)腸道通透性方面發(fā)揮著重要作用[19]。目前，miRNA與ALD的相關(guān)研究多數(shù)在于對ALD發(fā)病機制的研究，對miRNA與ALD相關(guān)的臨床治療的研究相對較少。

3 miRNA126及其研究

microRNAs在免疫系統(tǒng)中的生理和病理作用一文中標(biāo)記出，造血干細胞(HSCs)是表達micro126的細胞類型[20]。miRNA-126位于染色體9q34.3，是表皮生長因子樣域蛋白7(EGFL7)的一個內(nèi)含子[21]，miRNA-126通常表現(xiàn)出細胞抑制特性，包括miRNA-126的表達可抑制 IL-23R介導(dǎo)的TNF-α或IFN-γ在膠原蛋白誘導(dǎo)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎小鼠模型中的成纖維細胞樣合成細胞的產(chǎn)生[22]，現(xiàn)有實驗證明，TNF-α、IFN、IL-6、IL-1等在酒精性肝病中占有重要作用[23]。阻斷miRNA-126成熟，驅(qū)動肺纖維化發(fā)生[24]。在“肝臟miR-126是檢測乙型肝炎病毒感染肝細胞癌的潛在血漿生物標(biāo)志物”[25]一文中指出：在肝癌組織中檢測到6個miRNAs(60%)(miR-15a、miR-21、miR-29b-3p、miR-126、miR-142-3p和miR-193a-5p)，而在血液中只檢測到兩個miRNAs(miR-142-3p和miR-126)(20%)。文章表明，循環(huán)中的miRNAs可能并不總是反映miRNAs的細胞內(nèi)輪廓，只有少數(shù)選擇性miRNAs富集在血漿中。文章還表明：miR126可能是由肝臟分泌的miRNAs，并且miR-126在乙型肝炎病毒感染肝細胞癌的肝組織和血漿中具有高度特異性。micro126作為造血干細胞的表達類型，在多種疾病中表現(xiàn)出抑制纖維化特征, 但是，miRNA126與酒精性肝病纖維化是否相關(guān)，目前還沒有人研究過。

從化學(xué)物質(zhì)到病毒的各種因素都會引發(fā)肝損傷，臨床上可以通過生化標(biāo)記物來評估，包括血清轉(zhuǎn)氨酶(ALT和AST)。然而，這些臨床使用的肝損傷標(biāo)志物有幾個局限性，包括對新鮮血液樣本的要求，缺乏組織特異性，并且無法區(qū)分肝細胞損傷和炎癥(導(dǎo)致慢性肝病的兩個重要的肝臟病理決定因素)。與當(dāng)前的臨床“標(biāo)準”相比，循環(huán)中的miRNA有幾個優(yōu)點。miRNA在極端條件下(低pH，酸性環(huán)境，RNase抗性)具有極大的穩(wěn)定性，被認為是可替代的非侵入性生物標(biāo)志物[26，27]。其實,不僅是血清,人的其他體液如尿液、汗液、唾液等中同樣存在穩(wěn)定表達的miRNA。因此這些miRNA在某些特定條件下也有望成為很好的診斷標(biāo)志物[28]。Al-Kafaji G等人表明2型糖尿病腎病患者循環(huán)microRNA-126表達降低：一個潛在的基于血液的生物標(biāo)記物，此外，循環(huán)miR-126與甘油三酯或低密度脂蛋白之間的負相關(guān)性可能表明miR-126可能參與糖尿病腎病(DN)的脂質(zhì)代謝[29]。如果能夠開發(fā)出一種操控miRNA分子的新型技術(shù),對酒精性肝病的早期診斷和治療都具有重大意義。

4 展望

miRNA可以通過調(diào)控基因的表達導(dǎo)致ALD,構(gòu)成了ALD潛在的治療靶點。循環(huán)中的miRNA具有極大的穩(wěn)定性，且人的其他體液如尿液、汗液、唾液等中同樣存在穩(wěn)定表達的miRNA，被認為是可替代的非侵入性生物標(biāo)志物。曾經(jīng)有報道稱，2015年，由朱興奮和覓瑞創(chuàng)始人周礪寒、鄒瑞陽研發(fā)的胃癌早篩試劑盒獲得專利。這項技術(shù)讓miRNA檢測走向了癌癥早篩的臨床應(yīng)用。但是目前還沒有miRNA用于臨床治療的先例。骨髓造血干細胞(HSCs)的自我更新與多向分化或許是酒精性肝纖維化治療的一個方向，并且骨髓細胞移植本身就是血液病的既定治療方法。miRNA126作為造血干細胞(HSCs)表達的一種RNA, 在多種疾病中表現(xiàn)出抑制纖維化特征，最近研究表明干細胞治療可以減少肝臟炎癥，進而改善纖維化，這可能是肝硬化患者的有前景的一種治療措施。如果將miRNA126與干細胞治療相結(jié)合，或許是酒精性肝病的一個治療靶點。研究人員就希望能夠開發(fā)出一種操控miRNA分子的新型技術(shù), 或許miRNA126可以作為改善晚期酒精性肝硬化患者肝功能的靶點。