林俊芝，李 潘，仇 敏，柯秀梅，韓 麗，楊 明，伍振峰*，張定堃*

基于腸道菌群研究兩親性嵌段共聚物用于湯劑抑苦的適宜性

林俊芝1，李 潘2，仇 敏3，柯秀梅4，韓 麗3，楊 明5，伍振峰5*，張定堃3*

1. 成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院 中心實驗室，四川 成都 610072 2. 成都市青白江區(qū)人民醫(yī)院，四川 成都 610300 3. 成都中醫(yī)藥大學 西南特色中藥資源省部共建國家重點實驗室，四川 成都 611137 4. 重慶醫(yī)科大學中醫(yī)藥學院，重慶 400016 5. 江西中醫(yī)藥大學 現代中藥制劑教育部重點實驗室，江西 南昌 330004

從腸道菌群角度，評價兩親性嵌段共聚物用于中藥湯劑抑苦的適宜性和安全性。以苦味強烈的鹽酸小檗堿（berberine hydrochloride，BH）溶液為模型藥物，采用高通量測序技術，對比研究兩親性嵌段共聚物、天然甜味劑（蔗糖）與人工甜味劑（阿斯巴甜）連續(xù)給藥2周后對大鼠腸道菌群的影響。BH經過兩親性嵌段共聚物、蔗糖、阿斯巴甜掩味后，其物種總數有升高的趨勢。兩親性嵌段共聚物不影響B(tài)H菌群的多樣性與群落構成；蔗糖具有使BH菌群多樣性升高的趨勢，阿斯巴甜具有使BH菌群多樣性降低的趨勢。在長期服藥條件下，兩親性嵌段共聚物作為湯劑抑苦輔料不干擾藥物對腸道菌群的作用，對于兒童用藥是一種更為安全的掩味劑。

中藥湯劑；抑苦；兩親性嵌段聚合物；腸道菌群；湯劑伴侶開發(fā)；小檗堿

中藥湯劑普遍苦味重、口感差，嚴重影響服藥的順應性，尤其是兒童人群難以忍受。這與湯劑中苦味成分多以分子態(tài)形式存在、分散度大，能在極短時間內瞬時完成苦味信號傳導密切相關[1]。目前，甜味劑是應用最為廣泛的矯味劑，包括天然甜味劑與人工甜味劑。在普通家庭中，主要添加大量蔗糖干擾湯劑苦味，個別醫(yī)院藥房有小包裝甜菊素提供，但蔗糖與甜菊素均為天然甜味劑，其矯味效果通常是苦味與甜味的復合，對小劑量且苦味不強的藥物有效，但對大劑量或苦味強烈的藥物效果并不理想。在部分中成藥制劑處方中，有使用三氯蔗糖、阿斯巴甜、紐甜等人工甜味劑抑苦的用法[2]。人工甜味劑刺激的甜味感知通路與苦味感知通路相同，常作為抑苦的“特效”物質[3]。但最新研究表明，人工甜味劑可能會引發(fā)腸道菌群的紊亂，影響菌群的代謝通路，增加宿主對代謝疾病的易感性，尤其是降低腸道菌群葡萄糖耐受性[4-5]。紐甜還可降低菌群多樣性，改變腸道微生物的代謝途徑和糞便代謝物的分布，引起多種脂肪酸、脂質和膽固醇升高，蘋果酸和甘油酸大量減少[6]。因此，人工甜味劑并不適合長期服用，尤其對于腸道菌群平衡脆弱的兒童群體，可能是威脅其健康的潛在因素[7-8]。

兩親性嵌段共聚物是指存在兩種或兩種以上結構不同的鏈段的單一線性分子，可根據需要合成具有特定化學結構、相對分子質量的共聚物，是一種廣泛應用且安全性好的輔料[9-10]。課題組前期發(fā)現兩親性嵌段共聚物是一種液體制劑的新型苦味掩蔽劑，對于多種結構的苦味成分均有明確的抑苦效果，并可在水中自組裝形成膠束，包裹苦味成分的疏水性苦味基團，阻斷苦味基團與苦味受體的結合，達到掩蔽苦味的目的；同時，其口服后可在體內降解，對藥物藥效與體內吸收過程無顯著影響[11-12]。但兩親性嵌段共聚物長期給藥是否影響腸道菌群的平衡尚不明確，制約了其作為新型抑苦輔料的開發(fā)與應用。為此，本實驗以苦味強烈的鹽酸小檗堿（berberine hydrochloride，BH）溶液為模型藥物，采用高通量測序技術，對比研究兩親性嵌段共聚物、天然甜味劑（蔗糖）與人工甜味劑（阿斯巴甜）連續(xù)給藥2周后對大鼠腸道菌群的影響，以期為兩親性嵌段共聚物進一步的抑苦應用提供科學依據。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Tc-Meter 4K-7.2K離心機，美國Topscience公司；Qubit 3.0定量儀，美國Life technologies公司；CF-F9677型PCR擴增儀，美國Coyote Bioscience公司；渦旋振蕩器，美國Thermo Fisher公司；Agilent 4200 TapeStation電泳儀，美國Agilent Technology公司；QuantiFluor?-ST藍色熒光定量系統(tǒng)，美國Promega公司；NovaSeq 6000測序儀，美國Illumina公司；AxyPrep DNA凝膠回收試劑盒，Axygen公司；AM10027磁力架，美國Invitrogen公司；FastPure Gel DNA Extraction Mini Kit，南京諾唯贊生物科技有限公司。

1.2 供試藥品

BH，購于中國食品藥品檢定研究院，批號713- 9003；單甲氧基聚乙二醇-左旋聚乳酸（mPEG2000- PLLA2000），批號2019071415，相對分子質量均為2000，購于濟南岱罡生物科技有限公司；阿斯巴甜，批號WMO327DY13，購于上海源葉生物科技有限公司；蔗糖，批號20081113，購于成都科龍化工試劑廠；水為實驗室自制超純水，Milli-Q級別。

1.3 動物

SPF級KM小鼠，雄性，體質量18～22 g，購于四川省中醫(yī)藥科學院實驗動物中心，許可證號：SCXK（川）2018-19。實驗環(huán)境為SPF潔凈級屏障系統(tǒng)，室溫20～22 ℃，相對濕度40%～70%，12 h明暗交替照明。實驗過程中，動物自由飲水、飲食，使用實驗動物標準飼料，購于成都達碩生物科技有限公司，許可證號：SCXK（川）2014-0008，實驗遵循成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院有關實驗動物管理和使用的規(guī)定，均符合3R原則。

2 方法

2.1 供試品溶液的制備

取BH 0.13 g，精密稱定，各4份，分別加入100 mL超純水超聲溶解。按照前期試驗結果[10]及甜味劑常用劑量，其中3份分別加入0.16% mPEG 2000-PLLA2000、20%蔗糖、0.6%阿斯巴甜，即得供試品溶液。

2.2 分組及樣品采集

SPF級KM雄性小鼠30只，分為5組，每組6只。按體質量隨機分為BH組、BH＋共聚物組、 BH＋蔗糖組、BH＋阿斯巴甜組、對照組。SPF級動物房適應性飼養(yǎng)后，ig給藥，ig容量0.02 mL/g，每天1次，連續(xù)14 d。末次給藥后各組小鼠禁食不禁水，無菌條件下采集小鼠新鮮糞便3～5粒，立即放入滅菌后的離心管中，超低溫保存，以備腸道菌群分析[13]。

2.3 基因組DNA抽提、PCR擴增和測序

樣品微生物多樣性測序由上海元莘生物醫(yī)藥科技有限公司完成。利用DNA提取試劑盒提取大鼠糞便的基因組DNA，采用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測抽提的基因組DNA。PCR擴增細菌16S核糖體RNA基因的V3～V4可變區(qū)。采用338F 5’-ACTCCTAC GGGAGGCAGCAG-3’，806R 5’-GGACTACHVGG GTWTCTAAT-3’為引物，TransStart Fastpfu DNA Polymerase為擴增酶，在20 μL反應體系（5×FastPfu Buffer 5 μL，2.5 mmol/L dNTPs 2.5 μL，Forward Primer (5 μmol/L) 1 μL，Reverse Primer (5 μmol/L) 1 μL，FastPfu Polymerase 0.5 μL，BSA 0.25 μL，Template DNA 10 ng，ddH2O補至20 μL）中進行擴增，每個樣品均進行3次重復擴增。將同一樣本的PCR產物混合，采用2%瓊脂糖凝膠電泳檢測，使用AxyPrep DNA凝膠回收試劑盒切膠回收PCR產物，Tris-HCl洗脫，將PCR產物用QuantiFluor?-ST藍色熒光定量系統(tǒng)（Promega公司）進行檢測定量，之后按照每個樣本的測序量要求，進行相應比例的混合。隨后構建Illumina PE250文庫，上機測序。

根據overlap關系，將Illumina PE250測序得到的PE reads進行拼接，同時對序列質量進行質控和濾過，區(qū)分樣本后進行OTU（operational taxonomic units）聚類分析和物種分類學分析，相似度為97%。

2.4 菌群的多樣性分析

利用OTU聚類結果與R語言工具繪制稀釋曲線、Shannon-Wiener曲線、Rank-Abundance曲線與Specaccum物種累積曲線以檢測測序深度。其中，隨著測序量的增加，稀釋曲線的平緩程度反映測序深度對樣品中物種的覆蓋度。Shannon-Wiener曲線是反映各樣本在不同測序量時的微生物多樣性。Rank-Abundance曲線表明，樣品所含物種的豐富程度和均勻程度。物種的豐富程度呈現于曲線在橫軸上的長度，曲線越寬，表示物種的組成越豐富；物種組成的均勻程度呈現于曲線的形狀，曲線越平坦，表示物種組成的均勻程度越高。Specaccum物種累積曲線可以判斷樣本量是否充分，并可以預測樣品的物種豐富度。曲線趨于平緩，表示在實驗環(huán)境中的物種并不會隨樣本量的增加而顯著增多，抽樣充分，可以進行數據分析。采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行α多樣性分析，按照0.97的相似性閾值將序列劃分為一個物種，比較試驗組間OTU、Ace、Chao、Coverage、Shannon、Simpson指數的差異。OTU表示在樣品中微生物物種的數量；Ace與Chao指數是對菌群物種的總數評估；Shannon指數主要用來估算樣本中微生物多樣性，Shannon越大，說明群落多樣性越高。Simpson指數描述從一個群落種連續(xù)兩次抽樣所得到的個體數屬于同一種的概率，Simpson越大，即種類越均一。

2.5 β多樣性分析

樣本間的物種或功能的豐度分布差異程度可通過統(tǒng)計學中的距離進行量化分析，使用統(tǒng)計算法Bray-Curtis計算兩兩樣本間距離，通過距離矩陣比較不同樣本間物種差異，即β多樣性分析，包括主成分分析（principal components analysis，PCA）、主坐標分析（principal coordinate analysis，PCoA）、非度量多維尺度分析（nonmetric multidimensional scaling，NMDS）。

2.6 物種組成與差異菌群分析

基于分類學信息，對各個分類水平上進行群落結構的統(tǒng)計分析。采用Usearch軟件和Gold數據庫，利用Donovo和Reference結合的方式去除嵌合體，Silva（SSU115）16S細菌和古菌核糖體數據庫進行分類學比對。采用LEfSE分析，找出對樣本劃分產生顯著性差異影響的群落或物種。

3 結果

3.1 菌群的多樣性分析

利用OTU聚類結果進行測序深度的檢測與α多樣性分析，如圖1所示，30個樣本的稀釋曲線均趨于平緩，且大部分樣品達到平臺期，可以認為測序深度已經基本覆蓋到樣品中所有的物種。Shannon-Wiener曲線均趨向平坦，表明測序數據量足夠大，可以反映樣品中絕大多數的微生物物種信息。Rank-Abundance樣本曲線的延伸終點的OTU值均大于200，物種數量較多，且曲線均平滑下降，表明樣本的物種多樣性較高。Specaccum物種累積曲線趨于平緩，表示在實驗環(huán)境中的物種并不會隨樣本量的增加而顯著增多，抽樣充分，可以進行數據分析。

采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，各組間OTU、Ace、Chao、Coverage、Shannon、Simpson差異均不顯著，結果見表1。相比于BH組，BH＋阿斯巴甜組、BH＋共聚物組、BH＋蔗糖組的OTU數量、Ace與Chao指數均有增大的趨勢，且3種多樣性評價指標變化趨勢相同。增大趨勢最明顯的是BH＋阿斯巴甜組，其次是BH＋共聚物組，表明BH溶液經過蔗糖、共聚物、阿斯巴甜掩味后，其物種總數有升高的趨勢。相比于BH組，BH＋共聚物組的菌群Shannon指數最為接近，即2組間菌群多樣性基本不變，BH＋蔗糖組菌群多樣性有升高的趨勢，BH＋阿斯巴甜組有降低的趨勢。因此，甜味劑可能會影響腸道菌群的多樣性，而經共聚物掩味后，不影響腸道菌群的多樣性。

A-稀釋曲線 B-Shannon-Wiener曲線 C-Rank-Abundance曲線 D-Specaccum物種累積曲線 1-BH組 2-BH＋共聚物組 3-BH＋蔗糖組 4-BH＋阿斯巴甜組 5-對照組

表1 各組小鼠腸道菌群多樣性指數(, n = 6)

3.2 β多樣性分析

通過β多樣性分析比較樣本間的物種或功能的豐度分布差異程度，如圖2-A所示，各組樣品間組內差異與組間差異均較大。其中，各組間組內差異程度幾乎一致，與BH組比較，對照組群落構成差異最大，與其余組之間的差異不大；與BH＋共聚物組相比，BH＋蔗糖與對照組群落構成差異最大；與對照組比較，BH組與BH＋阿斯巴甜組群落構成差異最大。PCA、PCoA與NMDS結果顯示，與BH組相比，BH＋共聚物組群落構成最接近，其次是BH＋阿斯巴甜組；與對照組比較，BH組群落構成差異最大，其次是BH＋共聚物組與BH＋阿斯巴甜組（圖2-B～D）。樣品間的群落構成無論是組內差異還是組間差異均具有明顯的差異，可能是由于微生物的群落構成存在著很大的個體差異。BH組與BH＋共聚物組微生物的群落構成最接近，且與對照組群落構成存在明顯差異，表明BH與BH＋共聚物組具有明顯的抑菌藥效，且共聚物不影響B(tài)H的抑菌藥效。BH＋蔗糖組微生物的群落構成最接近于正常腸道微生物群落構成，可能是由于利用蔗糖對藥物進行矯味后，可引起腸道的細菌數與淀粉酶活性降低，大腸桿菌數與蛋白酶活性升高[14]，從而降低BH抑菌藥效。

3.3 物種組成分析

樣品各分類水平中的物種Profiling柱狀圖見圖3。在門水平上，擬桿菌門（Bacteroidetes）、厚壁菌門（Firmicutes）、變形菌門（Proteobacteria）和放線菌門（Actinobacteria）占絕對優(yōu)勢，BH組與BH＋共聚物組中變形菌門占比較其余3組小， BH＋阿斯巴甜組中放線菌門占比較其余4組小。在屬水平上，擬桿菌目$24-7組（Bacteroidales S24-7 group_ norank）占絕對優(yōu)勢；BH組與BH＋共聚物組中擬桿菌屬、毛螺菌科Lachnospira、腸桿菌屬為優(yōu)勢菌種；BH＋蔗糖、 BH＋阿斯巴甜組與對照組螺桿菌屬占比明顯升高。因此，變形菌門數量增多、放線菌門數量減小與螺桿菌屬升高很可能是甜味劑導致腸道菌群多樣性升高的原因。

A-組間組內距離箱式圖 B-PCA圖 C-PCoA圖 D-NMDS分析圖 1-BH組 2-BH＋共聚物組 3-BH＋蔗糖組 4-BH＋阿斯巴甜組 5-對照組

A-按門劃分的微生物群落柱狀圖 B-按屬劃分的微生物群落柱狀圖 1-BH組 2-BH＋共聚物組 3-BH＋蔗糖組 4-BH＋阿斯巴甜組 5-對照組

3.4 差異菌群分析

采用LEfSE分析，統(tǒng)計對樣本劃分產生顯著性差異影響的群落或物種，結果見圖4。BH組有4個顯著差異菌群，分別是戈登氏桿菌屬、布勞特氏菌屬、瘤胃球菌科NK4A214群（Ruminococcaceae NK4A214 group）、。BH＋共聚物組有4個顯著差異菌群，分別為擬桿菌目（Bacteroidales）、擬桿菌綱（Bacteroidia）、擬桿菌門（Bacteroidetes）、Tyzzerella 3。BH＋蔗糖組有6個顯著差異菌群，分別為嗜木聚糖真桿菌屬（[Eubacterium] xylanophilum group）、紅螺菌目（Rhodospirillales）、紅螺菌科（Rhodospirillaceae）、未培養(yǎng)的紅螺菌科（Rhodospirillaceae uncultured）、變形菌綱（Alphaproteobacteria）、理研菌科-RC9（Rikenellaceae RC9 gut group）。BH＋阿斯巴甜組有2個顯著差異菌群，分別為理研菌科（Rikenellaceae）、另枝菌屬。對照組有5個顯著差異菌群，分別為瘤胃球菌科UCG-013（Ruminococcaceae UCG- 013）、未培養(yǎng)的紅蝽桿菌科（Coriobacteriaceae uncultured）、擬桿菌目$24-7組、未培養(yǎng)的擬桿菌目（Bacteroidales uncultured）以及屬。

A-進化分枝圖: 紅色區(qū)域和綠色區(qū)域表示不同分組，紅色節(jié)點表示在紅色組別中起到重要作用的微生物類群，綠色節(jié)點表示在綠色組別中起到重要作用的微生物類群，黃色節(jié)點表示的是在兩組中均沒有起到重要作用的微生物類群 B-LDA分析柱狀圖: 1-BH組，2-BH＋共聚物組，3-BH＋蔗糖組，4-BH＋阿斯巴甜組，5-對照組

采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，比較不同矯味劑對差異菌群的影響，結果見表2。在BH組4個顯著差異菌群中，戈登氏桿菌屬、布勞特氏菌屬、瘤胃球菌科NK4A214群以及屬相對豐度最高，且瘤胃球菌科NK4A214群僅在BH組檢測出。在BH＋共聚物組的4個顯著差異菌群中，擬桿菌目、擬桿菌綱、擬桿菌門的相對豐度最高，且Tyzzerella 3僅在BH＋共聚物組中檢測出。在BH＋蔗糖組的5個顯著差異菌群中，嗜木聚糖真桿菌的相對豐度最高，與其余組均具有顯著性差異。理研菌科-RC9在BH組與BH＋共聚物組的相對豐度具有顯著降低。在BH＋阿斯巴甜組的2個顯著差異菌群中，相比于BH組，理研菌科、另枝菌屬在BH＋蔗糖組、BH＋阿斯巴甜組與對照組的相對豐度顯著高于BH組，BH組與BH＋共聚物組沒有顯著差異。在對照組的5個顯著差異菌群中，瘤胃球菌科UCG-013、未培養(yǎng)的紅蝽桿菌科、未培養(yǎng)的擬桿菌目、Tyzzerella菌群豐度最高，而擬桿菌目$24-7組在BH＋共聚物組中豐度最高。

表2 小鼠腸道菌群的相對豐度

與BH組比較：*＜0.05；與BH＋共聚物組比較：Δ＜0.05；與BH＋蔗糖組比較：&＜0.05；對照組比較：#＜0.05

*< 0.05BH group;Δ< 0.05BH+ copolymers group;&< 0.05BH+ sucrose group;#< 0.05blank control group

4 討論

通過多樣性分析發(fā)現，BH經過蔗糖、mPEG 2000-PLLA2000、阿斯巴甜掩味后，其物種總數有升高的趨勢。共聚物不影響B(tài)H菌群的多樣性，蔗糖具有使BH菌群多樣性升高的趨勢，阿斯巴甜具有使BH菌群多樣性降低的趨勢。因此，甜味劑可能會影響腸道菌群的多樣性。BH組與BH＋共聚物組微生物的群落構成最接近，且與對照組群落構成存在明顯差異，表明共聚物不影響B(tài)H的抑菌藥效。加入甜味劑掩味后，變形菌門數量增多、放線菌門數量減小、與螺桿菌屬升高可能引起腸道菌群多樣性升高。

雖然瘤胃球菌科NK4A214群僅在BH組檢測出，Tyzzerella-3僅在BH＋共聚物組中檢測出，但其含量遠遠低于其余顯著差異菌群，體內活性未見相關報道。在人類中，神經遞質5-羥色胺在胃腸道中濃度最高，其參與胃腸分泌、運動和疼痛感知的調節(jié)。5-羥色胺的含量升高，可引起炎癥性疼痛，而據以往研究報道，另枝菌屬可能是產生5-羥色胺的菌群[15]。BH＋阿斯巴甜組可引起腸道菌群中另枝菌屬豐度的升高，增加疼痛的感知。因此，阿斯巴甜有可能降低BH的鎮(zhèn)痛藥效。另外，理研菌科的豐度與血清瘦素水平呈正相關，血清瘦素參與糖、脂肪及能量代謝的調節(jié)，可促使機體減少攝食，增加能量釋放，抑制脂肪細胞的合成。其相對豐度的升高與強制性脊柱炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫疾病還存在有明顯的相關性[16]。因此，阿斯巴甜與蔗糖可能會引起理研菌科相對豐度升高，而影響糖、脂肪及能量代謝，或引起免疫系統(tǒng)的紊亂。有研究表明，嗜木聚糖真桿菌的增多與小細胞肺癌的發(fā)生可能存在正相關，大量長期服用蔗糖存在發(fā)生小細胞肺癌的風險[17]。因此，經甜味劑掩蔽BH苦味后，長期使用可能會導致BH的鎮(zhèn)痛藥效降低，引起體內代謝紊亂，應盡量避免長期大劑量使用。兩親性嵌段共聚物不會對BH腸道菌群造成顯著影響，進一步證明了其臨床實用價值。

開發(fā)兒童用中藥湯劑伴侶劑，顯著抑制湯劑苦味、改善湯劑口感，是中醫(yī)兒科臨床與醫(yī)院藥學的期盼，對于提高兒童服藥順應性、提升中醫(yī)藥在我國衛(wèi)生健康領域的服務能力具有重要意義[18]。本研究證明了兩親性嵌段共聚物的安全性，尤其是長期服藥條件下幾乎不干擾藥物對腸道菌群的作用。這為以兩親性嵌段共聚物為主要輔料，開發(fā)兒童用中藥湯劑伴侶劑奠定了科學基礎。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Study on suitability of amphiphilic block copolymer for bitterness inhibition of traditional Chinese medicine decoction based on intestinal flora

LIN Jun-zhi1, LI Pan2, QIU Min3, KE Xiu-mei4, HAN Li3, YANG Ming5, WU Zhen-feng5, ZHANG Ding-kun3

1. Central Laboratory, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 610072, China 2. Chengdu Qingbaijiang District People’s Hospital, Chengdu 610300, China 3. Pharmacy School, State Key Laboratory of Characteristic Chinese Medicine Resources in Southwest China, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China 4. College of Traditional Chinese Medicine, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China 5. Key Lab of Modern Preparation of TCM, Ministry of Education, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China

To evaluate the suitability and safety of amphiphilic block copolymers for bitter suppression of traditional Chinese medicine decoction based on intestinal flora.Berberine hydrochloride (BH) with strong bitterness was used as model drug, the effects of amphiphilic block copolymer, natural sweetener (sucrose) and artificial sweetener (aspartame) on intestinal microflora of rats were compared after 2 weeks of continuous administration by high throughput sequencing technology.After being masked by amphiphilic block copolymers, sucrose and aspartame, the total number of species of BH was increased. The results showed that amphiphilic block copolymers did not affect the diversity and community composition of BH. Sucrose had a tendency to increase the diversity of BH flora, while aspartame had a tendency to decrease it.Amphiphilic block copolymers do not interfere with the effect of the drug on intestinal flora in long-term medication, so it is a safe taste masking agent for children.

traditional Chinese medicine decoction; bitter-masking; amphiphilic block copolymer; intestinal flora; development of decoction companion; berberine

R283.6

A

0253 - 2670(2021)01 - 0065 - 10

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.01.009

2020-08-28

國家自然科學基金項目（81803745）；四川省科技廳青年杰出科技人才資助項目（2019JDJQ0007）；2019-2021年度中華中醫(yī)藥學會青年人才托舉工程項目（2019-QNRC2-B05）；江西中醫(yī)藥大學現代中藥制劑教育部重點實驗室開放基金（TCM-201904）

林俊芝，女，碩士，助理研究員，研究方向為中藥制劑新技術與分子生物學研究。E-mail: 582097013@qq.com

張定堃，男，博士，副教授，碩士生導師，研究方向為中藥制劑與品質評價新技術。E-mail: zhangdingkun@cdutcm.edu.cn

伍振峰，男，博士，副教授，碩士生導師，研究方向為中藥新劑型與新技術/中藥制藥裝備研究。E-mail: zfwu57@163.com

[責任編輯 鄭禮勝]