馬倩

四川省農(nóng)業(yè)機(jī)械研究設(shè)計(jì)院，四川成都

1 輪蟲及休眠卵概述

輪蟲是浮游動(dòng)物中特別重要的一個(gè)類群，它分布范圍廣，體型小，生長(zhǎng)迅速且較容易飼養(yǎng)繁殖，常作為水產(chǎn)行業(yè)中的開口餌料使用，其營(yíng)養(yǎng)豐富，形體微?。ㄩL(zhǎng)約0.04～2.00 mm，多數(shù)不超過0.50 mm），且含有活性物質(zhì)，是魚和蝦蟹等無脊椎動(dòng)物最好的開口餌料之一。常見的輪蟲有萼花臂尾輪蟲、褶皺臂尾輪蟲等。輪蟲休眠卵是單巢目輪蟲在不利條件下形成的滯育結(jié)構(gòu)，是輪蟲有性生殖的產(chǎn)物，對(duì)輪蟲抵御不良環(huán)境及保種、繁衍和散布有重要意義。當(dāng)下的輪蟲研究多見于褶皺臂尾輪蟲和萼花臂尾輪蟲，且主要是在其休眠卵的形成、保存和萌發(fā)。

輪蟲休眠卵的休眠期包括內(nèi)滯育期和外滯育期。前者指輪蟲休眠卵由體內(nèi)排出，卵內(nèi)胚胎仍需緩慢發(fā)育一段時(shí)間，即受精卵卵內(nèi)胚胎的“后熟”過程，此間卵對(duì)任何外部刺激均不反應(yīng)，即使在最佳環(huán)境下也不能孵化。內(nèi)滯育期長(zhǎng)短由遺傳因素決定，也與溫度有關(guān)，溫度越低，歷時(shí)越久。休眠卵在內(nèi)滯育期主要完成胚外間隙的形成、細(xì)胞核數(shù)目的增加、外層卵膜的繼續(xù)加厚等。已完成“后熟”過程的胚胎進(jìn)入外滯育期，外滯育期的休眠卵已獲得在適宜環(huán)境中孵化的能力，但在環(huán)境條件不合適的情況下將繼續(xù)保持“休眠”狀態(tài)。因此，休眠卵的萌發(fā)是指在一定環(huán)境條件刺激下外滯育期終止，胚胎重新啟動(dòng)發(fā)育并最終破膜而出的過程。

1.1 分類

新的分類系統(tǒng)把它歸入原腔動(dòng)物門。根據(jù)咀嚼器的有無、頭冠的構(gòu)造、卵巢是否成對(duì)、背甲的有無、形態(tài)構(gòu)造、足的有無、足和趾的形狀、附屬肢的有無等，常見的輪蟲可分為臂尾輪屬、旋輪屬、疣毛輪屬、晶囊輪屬、腔輪屬和水輪屬等。

1）臂尾輪屬。背甲較寬闊，多數(shù)品種呈方形，長(zhǎng)度很少超過寬度。足不分節(jié)，具環(huán)紋，并能伸縮擺動(dòng)。

2）腔輪屬。具兩趾，少數(shù)種類兩個(gè)并立的趾正處于融和成一個(gè)的過程。極少數(shù)種類沒有真正的背甲。

3）疣毛輪屬。體呈鐘形或倒錐形。頭冠寬闊，上有4根粗而長(zhǎng)的剛毛，兩“耳”突出顯著。趾短小，一對(duì)。

4）晶囊輪屬。皮層薄，體透明，呈囊袋型鐘形或卵圓形，頭冠大而發(fā)達(dá)，是典型的的浮游種類。

1.2 形態(tài)構(gòu)造

多數(shù)輪蟲是由頭冠、軀干、足三部分組成的。頭冠位于身體前端，其上附有一圈按一定規(guī)律排列的纖毛構(gòu)成的纖毛器，具有運(yùn)動(dòng)、攝食等功能，輪蟲只在該部分具有纖毛，因輪蟲運(yùn)動(dòng)時(shí)形似旋轉(zhuǎn)的輪子，故得名輪蟲。軀干部位于輪盤下方，外披一層角質(zhì)膜，根據(jù)品種的不同，或平滑或顆粒狀，多數(shù)類型會(huì)形成堅(jiān)硬的兜甲。尾部位于輪蟲的最后方，幫助輪蟲游泳和爬行，能自由伸縮，有些種類的輪蟲還在其部位具有能動(dòng)的趾。輪蟲休眠卵呈卵圓形、球形，外被一層厚厚的深色硬殼，表面具有刺。輪蟲休眠卵的形態(tài)引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。李永函等（1991）描述了我國(guó)北方地區(qū)池塘常見20 種輪蟲休眠卵的形態(tài)結(jié)構(gòu)[1]，簡(jiǎn)述其生態(tài)分布，并給出了顯微照片和形態(tài)描圖。閆冬春等（2007）對(duì)壺狀閉尾輪蟲的休眠卵及輪蟲進(jìn)行了形態(tài)學(xué)觀察，通過電鏡下的掃描觀察到其休眠卵表面有明顯的、不規(guī)則的褶皺突起[2]。張東升等（2011）在掃描電鏡下研究了卜氏晶囊輪蟲休眠卵卵膜的亞顯微結(jié)構(gòu)，并對(duì)卵膜與休眠卵功能的關(guān)系進(jìn)行了探討。結(jié)果表明，卜氏晶囊輪蟲休眠卵卵膜分三層，其中，第一層卵膜（S1）包括兩小層，即外表有乳狀突起的第一小層（ML）和彈簧狀的第二小層（SL），ML 層外表乳狀突起之間有的有小橋相連，有的無小橋相連，而SL 層縱面觀似彈簧狀，外表面（與ML 層卵膜接觸的面）有較大的突起和較多的孔，內(nèi)表面（與第二層接觸的面）較光滑且突起較小；第二層卵膜（S2）縱面觀均勻致密；第三層卵膜（S3）緊包胚胎，外表面光滑[3]。

1.3 生殖和發(fā)育

輪蟲是雌雄異體的生物，雄體的體型較小，僅為雌蟲的1/8～1/3。根據(jù)所處環(huán)境的不同，輪蟲可進(jìn)行兩性生殖或孤雌生殖。當(dāng)環(huán)境良好時(shí)，輪蟲只進(jìn)行孤雌生殖（無性），產(chǎn)生不混交雌體，此輪蟲產(chǎn)出二倍體非需精卵，非需精卵馬上孵化成為不混交雌體，如此往復(fù)進(jìn)行無性繁殖，所產(chǎn)生后代全為雌性。但在特定的外部環(huán)境條件下（環(huán)境變化、不良），部分輪蟲進(jìn)行有性繁殖，由臨界雌體所產(chǎn)生的兩種混交雌體可分別產(chǎn)生雌體和單倍體的需精卵，需精卵受精后即為休眠卵，休眠卵為有性繁殖的最終產(chǎn)物。

2 輪蟲休眠卵的形成與萌發(fā)

在環(huán)境不利的情況下，為了應(yīng)對(duì)不良環(huán)境，保存自身遺傳物質(zhì)以度過惡劣的環(huán)境，輪蟲會(huì)進(jìn)行有性生殖產(chǎn)生休眠卵，并在適當(dāng)條件下被“激活”，再次繁殖。影響輪蟲休眠卵產(chǎn)生的因素有很多，目前的研究主要是在儲(chǔ)存時(shí)間、鹽度、溫度、餌料等方面。休眠卵在沉積物中累積形成卵池或卵庫，卵庫對(duì)水體中浮游種群結(jié)構(gòu)、演替和維持種群穩(wěn)定具有重要意義。欒磊磊等（2019）采集珠江口桂山島海域表層沉積物，研究Cu、Zn、Cd、水溫、鹽度、酸堿度、冷藏時(shí)間和原位海區(qū)不同水深對(duì)休眠卵萌發(fā)的影響[4]。

2.1 溫度對(duì)休眠卵形成及萌發(fā)的影響

通過相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，溫度升高可以加速輪蟲休眠卵的產(chǎn)生。對(duì)于不同的輪蟲，其休眠卵產(chǎn)生的最適溫度是不同的，在20～30 ℃之間；對(duì)同一種輪蟲而言，休眠卵形成率變化并不大。冷凍處理可以促進(jìn)輪蟲休眠卵的萌發(fā)，冷凍使得休眠卵的卵殼軟化，生長(zhǎng)抑制劑減少，從而加速萌發(fā)。

2.2 鹽度對(duì)休眠卵形成及萌發(fā)的影響

葛慕湘等（2008）從單體和群體研究了鹽度突降對(duì)褶皺臂尾輪蟲存活及休眠卵形成的影響，褶皺閉尾輪蟲最佳鹽度降低幅度從20 以上降至6，大幅度的鹽度突降可促進(jìn)休眠卵的產(chǎn)生[5]。羅洪添等（2016）研究結(jié)果表明，在鹽度5 和20 組休眠卵的萌發(fā)率最高，這與其原生生境相關(guān)[6]。張東升等（2001）利用不同鹽度的溶液對(duì)休眠卵進(jìn)行處理后，再通過掃描電鏡發(fā)現(xiàn)，相同濃度下，不同種類的輪蟲卵殼超顯微結(jié)構(gòu)有明顯的差異，存在不同程度的孔和龜裂[7]。

鹽度的突降是有利于休眠卵萌發(fā)和產(chǎn)生的，但其實(shí)際的作用機(jī)理尚不明確，從電鏡掃描結(jié)果來看，鹽度的突降可以使得休眠卵的卵殼變化，可能會(huì)有利于休眠卵的吸水和與外界的的交流（空氣交換等），因而加速休眠卵的萌發(fā)。

2.3 食物對(duì)休眠卵形成及萌發(fā)的影響

查閱相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，通過投喂海水小球藻、酵母和兩者混合物以研究輪蟲休眠卵產(chǎn)生的不同，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，相比于其他餌料，投喂小球藻最有利于輪蟲休眠卵的產(chǎn)生，可能是因?yàn)楹Ｋ∏蛟迨窃邴}水中生長(zhǎng)，故誘發(fā)休眠卵產(chǎn)生；隨著食物濃度的增加，輪蟲的懷卵率隨食物濃度的增加而增加，食物濃度對(duì)輪蟲休眠卵的產(chǎn)生有顯著影響；采用不同溫度和食物濃度的組合對(duì)萼花臂尾輪蟲休眠卵的形成進(jìn)行研究，溫度為20 ℃和食物濃度為6.0×106 cells/mL 的條件組合下輪蟲休眠卵的產(chǎn)量和形成效率最高。

3 研究展望

輪蟲休眠卵作為水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖中最重要的開口餌料，具有極大的經(jīng)濟(jì)意義，不同類型的輪蟲，其休眠卵的產(chǎn)生與萌發(fā)的最適條件不同，如何才能控制特定輪蟲的最佳產(chǎn)生和孵化條件以產(chǎn)生最優(yōu)質(zhì)的休眠卵進(jìn)行批量化生產(chǎn)，是當(dāng)下最亟待解決的問題?，F(xiàn)在的研究集中于萼花臂尾輪蟲和褶皺臂尾輪蟲，對(duì)于其他輪蟲的研究還有欠缺，以后應(yīng)進(jìn)行擴(kuò)大化研究。