非洲豬瘟病毒pE66L 蛋白可通過PKR/EIF2 途徑抑制宿主翻譯

非洲豬瘟病毒（ASFV）是對豬最具傳染性和致命性的病毒之一，已在許多國家造成流行，近幾年傳播到中國，但目前尚未獲得許可的疫苗或治療方法。盡管科學(xué)家已進(jìn)行了廣泛研究，但ASFV編碼的蛋白質(zhì)如何抑制宿主翻譯這一問題仍然未知。本文探討了ASFV 干擾宿主翻譯并優(yōu)化自身基因表達(dá)的分子機制。

經(jīng)研究，有14種ASFV蛋白對海腎熒光素酶（Rluc）活性的抑制作用超過5倍，其中抑制作用最強的是pE66L蛋白。結(jié)合生物信息學(xué)分析和生化試驗結(jié)果，確定了pE66L的跨膜（TM）結(jié)構(gòu)域（氨基酸13-34）在抑制宿主基因表達(dá)中的關(guān)鍵作用。另外，通過構(gòu)建重組質(zhì)粒，使TM結(jié)構(gòu)域與增強型綠色熒光蛋白（EGFP）相連，進(jìn)一步證明該結(jié)構(gòu)域可廣泛抑制蛋白質(zhì)合成；共聚焦試驗和生化分析表明，TM結(jié)構(gòu)域可幫助蛋白質(zhì)定位到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER），之后激活PKR/eIF2α途徑抑制宿主翻譯。刪除pE66L基因?qū)Σ《驹诰奘杉?xì)胞中復(fù)制幾乎沒有影響，但能顯著恢復(fù)宿主基因的表達(dá)。

綜上所述，ASFV 的pE66L 蛋白可通過激活PKR/eIF2 α通路誘導(dǎo)宿主翻譯關(guān)閉。

某商品豬場非洲豬瘟暴發(fā)調(diào)查及傳染源鑒定方法

非洲豬瘟（ASF）是一種由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的家豬和野豬傳染病。近年來，這種疾病在全球廣泛蔓延，給豬肉生產(chǎn)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。本研究描述了在中國一個大型商業(yè)養(yǎng)豬場發(fā)生的非洲豬瘟疫情。

疫情始于2018 年，在集約化養(yǎng)豬場中呈時空傳播?？拷隹诘呢i舍感染風(fēng)險更高（優(yōu)勢比=14.4，95% CI：1.5-140）。據(jù)推測，疫病的傳入是由于運輸車輛被ASFV污染（該車輛曾用于銷售生產(chǎn)率較低的生豬）。本項調(diào)查顯示了ASFV 感染和在假定有足夠生物安全措施環(huán)境中的傳播過程，將有助于大型養(yǎng)豬場控制ASF。

基于P30單克隆抗體的非洲豬瘟病毒膠體金試紙條的制備

由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的非洲豬瘟（ASF）于1921 年在肯尼亞首次報道，但目前仍沒有有效的疫苗或抗病毒藥物?？焖俸陀行У脑\斷是處理ASF 疫情的關(guān)鍵。本研究制備了兩株針對ASFV磷蛋白P30的單克隆抗體（MAbs），分別命名為3H7A7和6H9A10。

表位分析顯示MAb 3H7A7 和6H9A10 分別識別P30的aa 144-154和aa 12-18?；谶@2株單克隆抗體，科研人員開發(fā)了用于快速檢測ASFV 的膠體金試紙條。靈敏度和特異性分析表明，該條帶的檢出限為2.16 ng P30，且該試紙條僅與ASFV 反應(yīng)，與其他常見豬病毒無交叉反應(yīng)。通過檢測153份臨床現(xiàn)場樣本（包括血清、血漿、組織和抗凝血處理過的血液），本試紙條與Real-time PCR 的一致性為95.42%。

凍干粉實時定量PCR檢測中國家豬血液樣本中非洲豬瘟病毒的新方法

非洲豬瘟（ASF）是一種嚴(yán)重的豬傳染病，給中國造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，迫切需要開發(fā)一種快速、特異、靈敏的診斷方法檢測非洲豬瘟病毒（ASFV）。本研究建立了一種新型的實時定量PCR 方法，該方法利用凍干粉末試劑（LPR），以主要結(jié)構(gòu)蛋白P72為靶點，可用于ASFV的快速檢測。

經(jīng)試驗，該方法對ASFV 質(zhì)粒模板的靈敏度為100拷貝/ul，比OIE 推薦的qPCR 方法靈敏度高10 倍；特異性分析表明，針對ASFV 的qPCR-LPR 與其他重要的豬病原體沒有交叉反應(yīng)；在我國218 份家豬血液樣本的臨床診斷中，本試驗建立的qPCR-LPR 方法和商用qPCR 試劑盒檢測ASFV 的陽性率分別為80.73%（176/218）和76.61%（167/218），經(jīng)SPSS 分析，兩種方法的符合率為92.20%（201/218），kappa 值為0.768（p＜0.0001），兩種檢測方法的總體一致性為95.87%（209/218），進(jìn)一步的Pearson 相關(guān)和線性回歸分析顯示兩種方法之間有顯著的相關(guān)性，R2值為0.9438。本研究建立的qPCR-LPR 方法，可在2 h 內(nèi)完成從樣本處理到結(jié)果報告的整個過程。

以上結(jié)果表明，qPCR-LPR檢測是一種很好的實驗室診斷工具，可以靈敏有效地檢測ASFV。

2019-2020 年越南流行的非洲豬瘟病毒（ASFV）的分子特征

非洲豬瘟（ASF）是由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的一種高度傳染性動物疫病。為了確定在越南傳播的ASFV菌株之間的遺傳變異關(guān)系，對2019-2020 年從越南北部、中部和南部23個不同省份采集的家豬器官和血液樣本中的26株ASFV分離株進(jìn)行了遺傳特征分析。

對部分B646L（p72）和EP402R（CD2v）基因序列以及全長E183L（p54）基因序列的分析表明，所有26 株ASFV分離株均屬于基因型II和血清型VIII，這與Georgia/2007/1和中國所有測序菌株一致。I73R 和I329L 基因之間的TRS 包含10 個核苷酸的插入，這與2018 年從家豬分離的中國ASFV株CN201801一致，但在Georgia/2007/1和中國/吉林/2018株中未觀察到?！?/p>