陳美珺 馬澤粦

【摘要】 目的 探討同一臨床實(shí)驗(yàn)室不同檢測(cè)系統(tǒng)間尿素氮（BUN）及肌酐（Crea）檢測(cè)結(jié)果的可比性，為實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)化提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

方法 參考美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）的EP9-A2文件，以Cobas 8000生化分析儀、羅氏原裝試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品組成的檢測(cè)系統(tǒng)為比較方法，以Cobas 501生化分析儀、羅氏原裝試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品組成的檢測(cè)系統(tǒng)為實(shí)驗(yàn)方法，用患者新鮮血清同時(shí)在兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)上對(duì)BUN和Crea進(jìn)行雙份平行測(cè)定。計(jì)算實(shí)驗(yàn)方法（Y）和比較方法（X）之間的相對(duì)偏倚，以允許總誤差規(guī)定的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)允許范圍的1/2為標(biāo)準(zhǔn)，判斷不同檢測(cè)系統(tǒng)的可比性。

結(jié)果 實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)Cobas 501和比較系統(tǒng)Cobas 8000具有良好的相關(guān)性，除BUN其醫(yī)學(xué)決定水平低值處的相對(duì)偏倚超出臨床可接受范圍，BUN和Crea其余測(cè)定結(jié)果在兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)之間的誤差均在臨床可接受范圍。

結(jié)論 兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定BUN和Crea結(jié)果具有可比性。當(dāng)同一實(shí)驗(yàn)室同一項(xiàng)目在兩個(gè)以上的檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)時(shí)，應(yīng)進(jìn)行方法比對(duì)和偏倚評(píng)估，以保證同一檢測(cè)項(xiàng)目在不同檢測(cè)系統(tǒng)上檢驗(yàn)結(jié)果的可比性。

【關(guān)鍵詞】 BUN;Crea;Cobas 8000;Cobas 501;可比性

中圖分類號(hào)：R446 ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A ? DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2020.11.011

【Abstract】 Objective To explore the comparability of the results of blood urea nitrogen（BUN） and creatinine （Crea） among different detection systems in the same clinical laboratory， so as to provide experimental data for the standardization of laboratory test results.

Methods According to EP9-A2 file of National committee for Clinical Laboratory standards （ NCCLS）， the detection system composed of Roche original reagent， c.f.a.s calibrator and controller of Roche was used as comparative method， and the detection system composed of Cobas 501 biochemical analyzer， Roche original reagent， c. f. a. s calibrator and controller of Roche was used as experimental method， and two parallel measurements of BUN and Crea were performed simultaneously on two detection systems using fresh serum from patients. Then relative bias between experimental method （Y） and comparison method （X） was calculated， and the comparability of different detection systems was judged by allowing 1/2 of the range of interventricular quality evaluation specified by total allowable error.

Results The experimental system Cobas 501 had a good correlation with comparison system Cobas 8000. Except the relative bias of BUN at the low value of medical decision level was beyond the clinical acceptable range， the errors of other detection results of BUN and Crea between the two detection systems were within clinical acceptable ranges.

Conclusion The results of BUN and Crea determined by the two detection systems are comparable. When the same item is tested in more than two detection systems in the same laboratory， the method comparison and bias evaluation should be carried out to ensure the comparability of the detection results of the same test item on different detection systems.

【Key words】 BUN; Crea; Cobas 8000; Cobas 501; comparability

隨著醫(yī)院規(guī)模的不斷擴(kuò)大，許多醫(yī)院同時(shí)擁有兩臺(tái)以上自動(dòng)生化分析儀，由于不同品牌試劑和校準(zhǔn)品不同，各自構(gòu)成不同的檢驗(yàn)系統(tǒng);即使是同一公司生產(chǎn)的分析儀由于使用試劑和參數(shù)不同，對(duì)標(biāo)本產(chǎn)生不同的基質(zhì)效應(yīng)，都會(huì)造成檢測(cè)系統(tǒng)間偏倚的存在。這就需要通過一定的方法學(xué)比較實(shí)驗(yàn)對(duì)不同檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行對(duì)比分析和預(yù)期偏倚評(píng)估，以確保檢測(cè)結(jié)果具有連續(xù)性和一致性。尿素氮（BUN）及肌酐（Crea）為兩個(gè)傳統(tǒng)的腎功能指標(biāo)，其結(jié)果的準(zhǔn)確與否影響腎臟疾病的療效判定和監(jiān)測(cè)。我們參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）的EP9-A2[1]文件，對(duì)我院平診和急診Cobas 8000全自動(dòng)生化分析儀與Cobas 501全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行BUN和Crea測(cè)定的方法學(xué)比較和偏倚評(píng)估，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器、試劑

Cobas 8000生化分析儀、羅氏原裝試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品;Cobas 501生化分析儀、羅氏原裝濃縮試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

1.2 標(biāo)本

以真空采血管收集本院住院患者新鮮血清，濃度覆蓋醫(yī)學(xué)決定水平的高、中、低值，要求無溶血、脂血、黃疸、凝塊，標(biāo)本量2.0～3.0 mL。

1.3 方法學(xué)比較實(shí)驗(yàn)

參照EP9-A2文件進(jìn)行[1]，以Cobas 8000為比較檢測(cè)系統(tǒng)（X），因其使用羅氏原裝試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，且多年來參與室間質(zhì)評(píng)取得良好的結(jié)果。Cobas 501為我院檢驗(yàn)科新購(gòu)入生化分析儀，作為實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)前由儀器廠家專業(yè)工程師對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)，評(píng)價(jià)其精密度，結(jié)果顯示，Cobas 8000和Cobas 501兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)BUN和Crea批內(nèi)精密度均<1/4允許總誤差（TEa），批間精密度均<1/3 TEa。每日檢測(cè)前對(duì)儀器進(jìn)行常規(guī)保養(yǎng)、維護(hù)和質(zhì)量控制，使儀器處于在控狀態(tài)。

每天收集8份標(biāo)本，在兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)上分別進(jìn)行雙份平行測(cè)定，在樣本的雙份測(cè)定中，指定第一次測(cè)定順序，按反向順序在同一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)第二次，即為雙份測(cè)定，每天的測(cè)定在2小時(shí)內(nèi)完成。以上步驟重復(fù)5天。

1.4 數(shù)據(jù)收集與處理

剔除明確有誤差的結(jié)果。（1）方法內(nèi)和方法間離群值檢查：首先進(jìn)行方法內(nèi)離群值檢查，然后進(jìn)行散點(diǎn)圖和偏倚圖檢查，最后進(jìn)行方法間離群值的檢查。（2）相關(guān)分析：用相關(guān)系數(shù)r或r2粗略判斷比較系統(tǒng)（X）的分布范圍是否合理，EP9-A2文件對(duì)此做了規(guī)定，若r≥0.975或r2≥0.95，則認(rèn)為X范圍分布合理，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠。（3）線性回歸統(tǒng)計(jì)：計(jì)算線性回歸方程

？倴 =bX+a。通過線性方程，可以計(jì)算出相應(yīng)的預(yù)期偏倚和可信區(qū)間范圍、允許誤差和相對(duì)誤差，以1/2允許總誤差規(guī)定的允許誤差作為儀器比對(duì)的相對(duì)誤差范圍，通過比較對(duì)其臨床可接受性進(jìn)行評(píng)價(jià)。（4）統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)均在Excel 2007和SPSS 19.0軟件包上進(jìn)行。不同檢測(cè)系統(tǒng)新鮮血清測(cè)定結(jié)果的統(tǒng)計(jì)采用配對(duì)t檢驗(yàn)、相關(guān)分析和回歸分析。

2 結(jié) ?果

2.1 離群值檢查

按EP9-A2文件的要求進(jìn)行離群值檢查，方法內(nèi)及方法間均未發(fā)現(xiàn)離群值。方法間及線性評(píng)估時(shí)的散點(diǎn)圖和偏倚圖見圖1、圖2。

2.2 統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

每日隨同樣本一起檢測(cè)的質(zhì)控品LevelⅠ、LevelⅡ、Level Ⅲ均在控。配對(duì)t檢驗(yàn)顯示，Cobas 8000與Cobas 501結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（BUN t=0.095，P>0.05;Crea t=0.007，P>0.05）。相關(guān)分析表明，實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)Cobas 501與參考系統(tǒng)Cobas 8000間的相關(guān)系數(shù)r均大于0.975，說明數(shù)據(jù)分布較好，回歸方程的斜率及截距的估計(jì)較可靠，其相關(guān)分析見表1。

2.3 臨床可接受性評(píng)價(jià)

按照1/2允許總誤差允許誤差的標(biāo)準(zhǔn)，BUN的允許誤差為4.5%，Crea的允許誤差為7.5%。Cobas 501的相對(duì)偏倚見表2。結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)對(duì)BUN和Crea檢測(cè)結(jié)果與參考系統(tǒng)之間檢測(cè)結(jié)果的差異，除BUN其醫(yī)學(xué)決定水平低值的相對(duì)偏倚不在臨床可接受范圍內(nèi)，BUN和Crea醫(yī)學(xué)決定水平其余值均在臨床可接受范圍內(nèi)。

3 討 ?論

隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展及其被廣泛應(yīng)用于檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，同一實(shí)驗(yàn)室同時(shí)擁有不同的檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)同一項(xiàng)目是普遍存在的現(xiàn)象[2]。不同生化檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)同一生化檢測(cè)項(xiàng)目的結(jié)果是否具有可比性，能否都為臨床所接受，是實(shí)驗(yàn)室工作人員所關(guān)注的問題?！夺t(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》（ISO15189）中明確提出：對(duì)于使用不同程序或設(shè)備和（或）不同地點(diǎn)進(jìn)行的檢驗(yàn)工作，應(yīng)有確定的機(jī)制在適當(dāng)?shù)呐R床范圍來驗(yàn)證這些結(jié)果的可比性，這種驗(yàn)證應(yīng)根據(jù)程序或儀器的特性定期進(jìn)行;實(shí)驗(yàn)室應(yīng)記載、記錄這些比對(duì)結(jié)果，適當(dāng)時(shí)對(duì)結(jié)果迅速作出反應(yīng)，對(duì)存在的問題和不足應(yīng)進(jìn)行糾正并保留記錄。

針對(duì)我院臨檢中心和急診檢驗(yàn)科使用不同型號(hào)羅氏生化儀分別負(fù)責(zé)平診和急診項(xiàng)目的檢測(cè)，我們采用EP9-A2[1]文件提供的方法，探討B(tài)UN和Crea在Cobas 8000全自動(dòng)生化分析儀與Cobas 501全自動(dòng)生化分析儀上的檢測(cè)結(jié)果是否具有一致性或檢測(cè)結(jié)果的偏倚是否在允許誤差范圍內(nèi)。因Cobas 8000多年來參加衛(wèi)生部、省臨檢中心的室間質(zhì)評(píng)均取得較好的結(jié)果，因此我們以其作為比較系統(tǒng)，而把新購(gòu)買的Cobas501作為實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)來進(jìn)行研究。在本研究前對(duì)兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行了精密度評(píng)價(jià)，各檢測(cè)系統(tǒng)BUN和Crea批內(nèi)精密度均<1/4 TEa，批間精密度均<1/3 Tea，兩個(gè)系統(tǒng)精密度符合臨床要求。對(duì)于結(jié)果的允許誤差范圍，美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正案[3]給定的BUN可接受范圍是靶值±0.71 mmol/L或±9%（取大者），Crea的可接受范圍是靶值±0.265 μmol/L（0.3 mg/dL）或±15%（取大者）。我們參照余文輝等采用的方法[4]：以1/2允許總誤差作為方法學(xué)比較結(jié)果系統(tǒng)誤差的限值，以1/3允許總誤差為日間不精密度的限值進(jìn)行了比對(duì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，BUN其醫(yī)學(xué)決定水平在3.0 mmol/L時(shí)，其相對(duì)偏倚為-5.01%，超出臨床可接受范圍，當(dāng)BUN醫(yī)學(xué)決定水平在7.1 mmol/L和14.2 mmol/L時(shí)，其相對(duì)偏倚為-2.43 %和-1.49 %，其偏倚能被臨床接受。Crea醫(yī)學(xué)決定水平在40.0 μmol/L、141.0 μmol/L、530.0 μmol/L時(shí)，其相對(duì)偏倚為-0.20%、0.14%、0.23%，均可被臨床接受。通過比對(duì)試驗(yàn)，可以發(fā)現(xiàn)兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)間相同項(xiàng)目BUN、Crea的檢測(cè)結(jié)果部分存在偏倚，BUN在醫(yī)學(xué)決定水平低值的偏倚不在臨床可接受范圍內(nèi)，應(yīng)尋找問題所在，進(jìn)一步采取相應(yīng)的改正措施，保證同一實(shí)驗(yàn)室相同檢測(cè)項(xiàng)目在不同檢測(cè)系統(tǒng)上的檢測(cè)結(jié)果具有可比性。李佳等人[5]的研究也發(fā)現(xiàn)低濃度BUN在不同分析系統(tǒng)中不可比，認(rèn)為可能原因一方面是試劑成分、檢測(cè)參數(shù)并不完全相同，可能會(huì)造成結(jié)果的偏倚，這種偏倚在較低濃度水平時(shí)更加凸顯;另一方面，BUN的允許誤差本身較小，使其評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)較高，也不容易達(dá)到要求。也有學(xué)者認(rèn)為，因?yàn)檠錌UN濃度降低在臨床上缺乏必要的實(shí)際意義，所以，雖然血清BUN濃度在低值處的相對(duì)偏倚>1/2允許總誤差規(guī)定的允許誤差，也可認(rèn)為實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)與目標(biāo)檢測(cè)系統(tǒng)具有可比性[6]。筆者認(rèn)為BUN低值偏倚不可接受，其原因還有可能是當(dāng)醫(yī)學(xué)決定水平為低值時(shí)，絕對(duì)偏倚即使很小，但相對(duì)偏倚已經(jīng)很大，引起超出臨床可接受范圍的假象。

本研究顯示，在Cobas 8000和Cobas 501兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)上分別檢測(cè)BUN和Crea兩個(gè)生化項(xiàng)目，其相關(guān)系數(shù)r均>0.975，說明這兩個(gè)系統(tǒng)所采用實(shí)驗(yàn)方法的精密度和系統(tǒng)間的可比性較好。但對(duì)BUN和Crea兩個(gè)生化項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果臨床可接受性的研究，表明兩個(gè)系統(tǒng)間存在一定的差距，說明即使室內(nèi)質(zhì)控CV滿足要求并且相關(guān)性好，也不能證明在對(duì)病人新鮮血清檢測(cè)時(shí)其結(jié)果相關(guān)性和可被接受性都滿足要求。覆蓋測(cè)定方法測(cè)量范圍的多份患者新鮮血清是進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)的最佳標(biāo)本來源。

綜上所述，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化的今天，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)高度重視不同分析系統(tǒng)之間檢驗(yàn)結(jié)果存在是否一致性的問題，當(dāng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)同一檢測(cè)項(xiàng)目在兩套以上分析系統(tǒng)檢測(cè)或使用一些新方法、試劑、儀器時(shí)，必須對(duì)其進(jìn)行比對(duì)實(shí)驗(yàn)和偏倚評(píng)估。通過比對(duì)實(shí)驗(yàn)，可以發(fā)現(xiàn)同一實(shí)驗(yàn)室不同檢測(cè)系統(tǒng)間是否具有可比性，若存在偏倚，不在臨床可接受范圍，必須對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)、溯源，必要時(shí)，在不同系統(tǒng)建立各自的參考區(qū)間，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[7～8]。

參 考 文 獻(xiàn)

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（收稿日期：2019-10-21 修回日期：2020-09-09）

（編輯：潘明志）