李文莉 汪汝沛 徐燕

（四川省食品藥品檢驗檢測院，四川 成都 611731）

硫辛酸，是一種存在于生物線粒體中的輔酶。硫辛酸注射液可用于靜脈注射或肌肉注射，臨床上被廣泛用于治療糖尿病周圍神經(jīng)病變引起的感覺異常[1]。受原料藥、輔料和生產(chǎn)工藝等方面的影響，硫辛酸注射液在生產(chǎn)過程中可能會帶來雜質(zhì)元素。

由于雜質(zhì)元素不能為患者提供任何治療效果，為了降低對人體的毒害作用，其含量要控制在可接受的范圍內(nèi)，因此必須建立嚴(yán)格的控制措施和標(biāo)準(zhǔn)[2], 依據(jù)人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會（International conference on harmonization of technical requirements for registration of pharmaceuticals for human use，ICH）Q3D元素雜質(zhì)指導(dǎo)原則中對注射液的雜質(zhì)元素進行了嚴(yán)格的要求[3]。目前，國內(nèi)外常用的元素檢測方法主要有:比色法、石墨爐原子吸收分光光度法、火焰原子吸收分光光度法、氫化物原子熒光光度法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法等[4]。本文采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法對硫辛酸注射液中砷（As）、鉛（Pb）、鎘（Cd）、鐵（Fe）、鈦（Ti）和銻（Sb）6種痕量雜質(zhì)元素進行測定，建立了一種高效、準(zhǔn)確的測量硫辛酸注射液中雜質(zhì)元素的分析方法。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器

THERMO ICAPQC電感耦合等離子體質(zhì)譜；梅特勒XS204電子天平；CEM MARS微波消解儀；默克公司Advantage A10純水儀。

1.1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液

砷（As）標(biāo)準(zhǔn)溶液（批號:211065073，1000μg·mL-1）、鉛（Pb）標(biāo)準(zhǔn)溶液（批號:211035050）、鎘（Cd）標(biāo)準(zhǔn)溶液（批號:211095083，1000μg·mL-1）、鐵（Fe）標(biāo)準(zhǔn)溶液（批號:212015035，1000μg·mL-1），購于AccuStandard?；鈦（Ti）標(biāo)準(zhǔn)溶液（批號:13538-1，1000μg·mL-1）、銻（Sb）標(biāo)準(zhǔn)溶液（批號:13560-1，1000μg·mL-1）購于國家有色金屬及電子材料分析測試中心；內(nèi)標(biāo)溶液:銠（Rh）標(biāo)準(zhǔn)溶液（批號:122811，1000μg·mL-1）購于NSI Solutions incorporateol。

1.1.3 試劑

水為超純水: 硝酸、過氧化氫為優(yōu)級純。

1.1.4 樣品

硫辛酸注射液6批，由企業(yè)提供（13052214S、13052314S、13052414S、13052214S、13052215S、13052216S）。

1.2 方法

1.2.1 ICP-MS 工作條件

碰撞反應(yīng)池（CCT）模式，經(jīng)調(diào)諧液優(yōu)化的工作參數(shù):載氣:氮氣，進入透鏡:-70伏特，偏轉(zhuǎn)進入透鏡:-35伏特，提取透鏡1極性:0，提取透鏡1負:0伏特，提取透鏡1正:0伏特，霧室溫度:2.7℃，蠕動泵轉(zhuǎn)速:40 轉(zhuǎn)·min-1，冷卻氣流量:14 L·min-1，采樣深度:5 mm，輔助氣流量:0.8 L·min-1，霧化氣流量:1.02 L·min-1，矩管水平位置:0.13 mm，矩管垂直位置:0.6mm，提取透鏡:2-200伏特，重復(fù)次數(shù):3次。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的制備

分別精密量取As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL，置同一100 mL容量瓶中，用2%硝酸溶液定容后搖勻，精密量取上述溶液1 mL，用2%硝酸溶液定容至10mL，搖勻，得濃度為1000 μg·L-1的As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。再分別精密量取混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液0.25，0.5，1.25，2.5，3.75 mL，分別至25 mL兩瓶中，用2%硝酸溶液稀釋并制成含As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb為10，20，50，100，150 μg·L-1的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。

1.2.3 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密量取銠標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL，置100 mL容量瓶中，用2%硝酸溶液定容后搖勻，再精密量取上述溶液1 mL置10 mL容量瓶中，用2%硝酸溶液定容至刻度，搖勻，再精密量取上述溶液0.25 mL，用2%硝酸溶液定容至25 mL，搖勻，即得10 μg·L-1的內(nèi)標(biāo)溶液。

1.2.4 供試品溶液的制備

取本品1 mL，置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加入硝酸10 mL，浸泡過夜，加入過氧化氫2 mL，蓋好內(nèi)蓋，旋緊外套，置微波消解爐內(nèi)，進行消解（消解功率:1600 W可調(diào)，升溫程序:8 min升至120℃，保持15 min；7 min升至160℃，保持20 min，7 min升至185℃，保持25 min），冷卻至室溫，取消解內(nèi)罐置加熱器上160℃加熱至酸液剩余1 mL左右，用2%硝酸溶液轉(zhuǎn)移并定容至25 mL容量瓶中，過濾，作為供試品溶液。同時同法制備全試劑空白溶液。

1.2.5 測定法

以銠Rh（103）作內(nèi)標(biāo)，手動進樣，在給定儀器條件下將上述標(biāo)準(zhǔn)系列溶液由蠕動泵進樣分析，以As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb元素濃度（ppb）為橫坐標(biāo)，相應(yīng)儀器響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；供試品溶液在同樣條件下進樣分析，自動扣除樣品試劑空白后，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb元素的濃度（ppb），并計算出樣品中As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb的含量。待測同位數(shù)質(zhì)量數(shù)見表1。

1.2.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限

取標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液進樣測定，分別以各元素理論濃度（X，μg·L-1）為橫坐標(biāo)，對應(yīng)濃度下各元素信號值（Y）（內(nèi)標(biāo)校正后結(jié)果）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性關(guān)系良好。取空白溶液連續(xù)測定11次，計算樣品檢出限，見表2。

表1 待測同位數(shù)質(zhì)量數(shù)

表2 標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限

1.2.7 重復(fù)性試驗

精密量取樣品6份，分別加入1.25 mL混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液，按照“1.2.4”項下制備，進樣分析，結(jié)果樣品中As75、Pb208、Cd111、Fe56、Ti47、Ti48、Sb121元素平均含量分別為1.053，1.179，1.149，1.273，1.020，1.462，1.003 mg·L-1，RSD分別為1.2%，2.4%，1.5%，6.1%，2.2%，5.3%，2.2%（n=6），均小于10%，表明方法的重復(fù)性良好。

1.2.8 加樣回收率試驗

精密量取樣品6份，分別加入1.25mL混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液進樣分析，各元素的平回收率在80.3～112.2%之間，表明方法的準(zhǔn)確度良好，結(jié)果見表3。

2 結(jié)果

9批硫辛酸注射液中元素雜質(zhì)結(jié)果見表4，各批次樣品中元素雜質(zhì)含量均遠小于限度值。

表3 回收率結(jié)果表

3 討論

樣品的前處理方法有濕法消解、干法消解、微波消解等。微波消解具有密閉、高壓、時間短、消耗試劑少等優(yōu)點，適用于該產(chǎn)品的前處理。

本實驗采用微波消解樣品，采用ICP-MS法測定了硫辛酸注射液中砷、鉛、鎘、鐵、鈦、銻6種元素的含量。采用碰撞反應(yīng)池（CCT）模式測定消除了樣品中可能存在的其他元素以及氣體對測定的干擾。

本方法回收率良好，檢出限低、靈敏度高，為硫辛酸注射液中砷、鉛、鎘、鐵、鈦、銻6種雜質(zhì)元素含量的測定提供了可行的方法。

表4 樣品測定結(jié)果表（μg·mL-1）