包強(qiáng) 肖蕾 周品謙 李耀明 歐高財(cái) 王沅江

摘 要：為明確玫煙色棒束孢菌對茶芽粗腿象甲的室內(nèi)毒殺作用，試驗(yàn)以孢子濃度為2.5×107、5.0×107、7.5×107、1.0×108個(gè)/mL 的玫煙色棒束孢菌孢子懸浮液進(jìn)行處理。結(jié)果表明：玫煙色棒束孢菌對茶芽粗腿象甲有明顯致病性，隨著孢子濃度的增大，茶芽粗腿象甲的致死率增大，推薦使用孢子濃度為（7.5～10.0）×107 個(gè)/mL的玫煙棒束孢菌懸浮液防治茶芽粗腿象甲。

關(guān)鍵詞：玫煙棒束孢菌;茶芽粗腿象甲;致病性;防治

中圖分類號：S571.1; S435.4文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1006-060X（2020）10-0072-03

Abstract： In order to evaluate the indoor effect of Isaria fumosorosea Wize on Ochyromera quadrimaculata Voss， four concentrations of Isaria fumosorosea suspension， （2.5×107， 5.0×107， 7.5×107 and 1 .0×108 spores/mL）， were used in the test. The results showed that Isaria fumosorosea Wize had obvious pathogenicity to the pest. With the increase of the concentration of the spore suspension， the lethal rate of Ochyromera quadrimaculata Voss increased significantly. We recommend （7.5-10.0）×107 spores/mL of Isaria fumosorosea suspension for the control of Ochyromera quadrimaculata Voss.

Key words： Isaria fumosorosea Wize; Ochyromera quadrimaculata Voss; pathogenicity; control

玫煙色棒束孢（Isaria fumosorosea Wize）曾被移入擬青霉屬[1]，稱為玫煙色擬青霉（Paecilomyces fumosoroseus），后移入棒束孢屬[2]，是一類常見的昆蟲病原真菌。其瓶梗單生或輪生于孢子梗上，瓶狀或近球形，壁光滑，透明，長7～15 μm，寬1.5～2.0 μm;分生孢子單胞，多柱形或擬梭型，光滑，透明至肉色，長3～4 μm，寬1～2 μm，呈鏈狀[3]，無厚垣孢子。該菌寄主范圍較廣，可寄生菜果茶等園藝作物上一些鱗翅目、鞘翅目、同翅目、膜翅目、雙翅目害蟲[4-5]。研究者發(fā)現(xiàn)玫煙色棒束孢對茶小綠葉蟬等茶樹害蟲有較強(qiáng)的致病力[6]。目前，國內(nèi)外對玫煙色棒束孢相關(guān)研究報(bào)道集中在分類鑒定、生物學(xué)及致病力以及防治應(yīng)用等方面[7-8]。玫煙色棒束孢在自然界一般存活在土壤和昆蟲尸體中，當(dāng)遇到新的寄主昆蟲且環(huán)境適宜時(shí)產(chǎn)生分生孢子，形成新的侵染，并不斷感染新的寄主，在自然生境中形成流行病，在害蟲防治方面有一定優(yōu)勢。

茶芽粗腿象甲（Ochyromera quadrimaculata Voss）又名茶四斑小象甲，近年來在湖南石門縣等湘北茶區(qū)為害程度呈上升態(tài)勢，該蟲一年發(fā)生1代，以幼蟲在茶叢根際土壤中越冬[9-10]。據(jù)調(diào)查，在湖南3月下旬4月上旬始蛹，4月中旬成蟲初見，4月下旬至5月中旬盛發(fā)。成蟲主要取食芽下1～3葉，自葉尖、葉緣開始咬食下表皮及葉肉，殘留上表皮，呈現(xiàn)多個(gè)黃褐色枯斑，據(jù)過婉珍[10]調(diào)查，發(fā)生嚴(yán)重茶園中芽被害率高達(dá)84%，百芽減重率約l5%，每年損失產(chǎn)量約7%。成蟲有假死性，受驚墜地佯死潛逃。對于該蟲的防治研究較少，主要集中在化學(xué)或人工防治上[11-13]，采用化學(xué)防治能夠快速降低蟲口基數(shù)，但容易造成環(huán)境污染和農(nóng)藥殘留，影響茶葉的外銷，同時(shí)對消費(fèi)者的健康容易造成潛在危險(xiǎn)。因此，探尋對茶芽粗腿象甲新的非化學(xué)防治方法十分必要。與化學(xué)防治相比，昆蟲真菌殺蟲劑不污染環(huán)境且具有流行性，對農(nóng)林害蟲化學(xué)防治具有很強(qiáng)的替代性，筆者應(yīng)用玫煙色棒束孢對茶芽粗腿象甲進(jìn)行室內(nèi)殺蟲效果研究，旨在篩選適合的孢子濃度，為利用玫煙色棒束孢田間防治茶芽粗腿象甲奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試菌藥

玫煙色棒束孢，重慶重大生物技術(shù)公司生產(chǎn)，100億個(gè)/g棒束孢孢子。

1.2 供試蟲源

采自于常德市石門縣雁池鄉(xiāng)西山埡有機(jī)茶廠基地，在茶芽粗腿象甲成蟲發(fā)生高峰期，采取茶樹地面鋪膜振落法捕捉成蟲，帶回實(shí)驗(yàn)室采用茶梢飼養(yǎng)于養(yǎng)蟲籠中。1 d后選取健康活潑的成蟲于室內(nèi)生測。

1.3 孢子懸浮液的配置

用分析天平稱取100億個(gè)/g玫煙色棒束孢10.00 g放入滅菌三角錐形瓶，用量筒量取1 000 mL的0.05%吐溫-80溶液搖勻配置成濃度1.0×108孢子/mL的孢子懸浮液母液，用移液管依次移取稀釋配置7.5×107、5.0×107、2.5×107孢子/mL的孢子懸浮液，共計(jì)4個(gè)濃度。

1.4 浸漬法接種

共計(jì)4個(gè)濃度處理，每個(gè)濃度處理重復(fù)3次，以0.05%吐溫-80溶液為對照。采用浸漬法接種，每個(gè)處理試蟲6頭。接種方法：依次將試蟲浸入到不同濃度孢子懸浮菌液中3 s，對照浸沾0.05%吐溫-80溶液后，分別用滅菌的濾紙吸干蟲體表面多余的菌液。接種后把試蟲置于一次性滅菌過自制塑料盒（蓋子表面用紗布自制通氣部位）中，用基部包有濕潤脫脂棉的新鮮茶梢置于培養(yǎng)箱（25℃，95%濕度，L∶D=1∶1）飼養(yǎng)，每2 d更換一次新的茶梢。

1.5 調(diào)查與統(tǒng)計(jì)方法

接菌處理后調(diào)查藥后蟲體存活情況，分別計(jì)算死亡率、校正死亡率。如發(fā)現(xiàn)死蟲及時(shí)將其移出塑料盒，并置于無菌培養(yǎng)皿內(nèi)保濕培養(yǎng)觀察死蟲尸體上是否長出菌絲。死亡率、校正死亡率的計(jì)算公式如下：

1.6 數(shù)據(jù)處理方法

采用SPSS 17.0軟件中單因素方差分析對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。利用鄧肯氏新復(fù)極差法對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 致病性

茶芽粗腿象甲成蟲浸漬感染玫煙色棒束孢，其玫煙色棒束孢孢子萌發(fā)，在體表形成芽管，芽管分化形成附著胞，穿過蟲體皮膚侵入體內(nèi)長成菌絲，菌絲在體內(nèi)大量繁殖，當(dāng)外界條件適宜時(shí)菌絲穿出表皮，產(chǎn)生分生孢子（見圖1），使害蟲新陳代謝紊亂致死。

2.2 室內(nèi)防治效果

從表1可知，玫煙色棒束孢處理的茶芽粗腿象甲死亡率上升，隨著濃度增大需要半數(shù)死亡時(shí)間縮短，致死率升高。2.50×107個(gè)/mL孢子濃度處理在藥后9 d出現(xiàn)死亡，死亡率5.56% ± 4.53%，7.50×107個(gè)/mL孢子濃度在藥后20 d致死率達(dá)到80%，半致死亡時(shí)間為20 d，1.0×108個(gè)/mL孢子濃度下藥后20 d死亡率達(dá)到了100.00% ± 7.86%，差異顯著;藥后25 d，2.50×107個(gè)/mL孢子濃度處理的茶芽粗腿象甲死亡率達(dá)到53.33% ± 4.54%，超過半數(shù)。

3 結(jié)論與討論

昆蟲真菌殺蟲劑與化學(xué)防治相比，不污染環(huán)境，且具有流行性，對農(nóng)林害蟲化學(xué)防治具有很強(qiáng)的替代性。研究結(jié)果表明，玫煙色棒束孢菌對茶芽粗腿象甲有致病性，隨著孢子懸浮液濃度增大，茶芽粗腿象甲致死率增大，7.50×107個(gè)/mL孢子濃度在藥后20 d致死率達(dá)到80.00%，半致死亡時(shí)間為20 d，1.0×108個(gè)/mL孢子濃度下藥后20 d死亡率達(dá)到了100.00%，差異顯著，故采用（7.5～10.0）×107個(gè)/mL孢子濃度防治茶芽粗腿象甲可行，在未來玫煙色棒束孢防治茶芽粗腿象甲的田間應(yīng)用上奠定了基礎(chǔ)。

玫煙色棒束孢進(jìn)入寄主昆蟲的致病過程復(fù)雜多樣，加之玫煙色棒束孢在茶園生態(tài)環(huán)境中的作用還不是完全清楚，可能會限制其在其害蟲防治方面的有效應(yīng)用。另外，玫煙色棒束孢-茶芽粗腿象甲-茶樹間的相互作用方式如何有待于進(jìn)一步解決，未來需要一方面加大對玫煙色棒束孢生物特性、致病機(jī)理及相關(guān)基因、菌株改良進(jìn)行研究，另外一方面擴(kuò)大其實(shí)踐應(yīng)用等技術(shù)方面研究的探討，從而實(shí)現(xiàn)其在茶園對茶芽粗腿象甲防治上的應(yīng)用。

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（責(zé)任編輯：張煥裕）