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        核苷(酸)類似物治療下產(chǎn)生的HBV病毒顆粒不具有感染性

        2020-12-20 17:53:24張婧,LIUY,LIUH
        臨床肝膽病雜志 2020年4期

        【據(jù)《Hepatology》2020年2月報(bào)道】題:核苷(酸)類似物治療下產(chǎn)生的HBV病毒顆粒不具有感染性(作者Liu Y等)

        核苷(酸)類似物(NAs)被廣泛用于慢性乙型肝炎(CHB)的臨床治療。NAs通過(guò)與dNTP競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,一旦摻入將抑制HBV P蛋白的逆轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶活性,不可逆地終止子代病毒HBV DNA新鏈的延伸、合成,產(chǎn)生基因組截短的HBV子代病毒。NAs治療下產(chǎn)生的子代病毒是否可以在肝細(xì)胞中建立感染,目前尚未見(jiàn)報(bào)道。

        本研究采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Northern Blot、Southern Blot、蔗糖梯度離心、體外細(xì)胞感染和體外內(nèi)源性DNA聚合酶鏈延伸等實(shí)驗(yàn)方法,探討了NAs治療下產(chǎn)生的子代HBV DNA的性質(zhì)以及子代病毒的感染性。結(jié)果表明,在NAs處理下HepAD38細(xì)胞上清中的病毒顆粒或裸核衣殼中的HBV DNA主要為不可逆終止的3’末端截短的單負(fù)鏈DNA,且體外聚合酶鏈延伸實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了新鏈合成被不可逆終止。與之一致,子代HBV病毒顆粒幾乎不感染HepG2-NTCP細(xì)胞或人原代肝細(xì)胞(PHH)。同樣,從接受NAs治療的CHB患者血清制備的HBV顆粒對(duì)PHH也無(wú)感染性。同時(shí),接受NAs治療的患者血清中HBV DNA水平按逆轉(zhuǎn)錄的起點(diǎn)開(kāi)始從X、S、PreC/C到rcDNA逐漸降低。而血清中的HBV RNA水平則呈現(xiàn)出相反的趨勢(shì),從X、S到PreC/C區(qū)域逐漸增加。這種趨勢(shì)也在接受替比夫定治療隨訪隊(duì)列中得到了驗(yàn)證。

        上述結(jié)果表明,由于DNA新鏈合成的不可逆終止造成了病毒基因組截短,NAs治療下產(chǎn)生的子代HBV顆粒主要是失去了感染性的復(fù)制缺陷型。此外,本研究還提示,由于不同廠家HBV DNA定量試劑所檢測(cè)的HBV基因組區(qū)域不同,臨床上,在NAs治療下的CHB患者的病毒載量檢測(cè)可能存在差異。而此時(shí)所謂的“病毒載量”是否真能夠反映感染性HBV病毒顆粒的真實(shí)水平,將是一個(gè)非常值得探討的問(wèn)題。

        摘譯自:LIU Y, LIU H, HU Z, et al. Hepatitis B virus virions produced under nucleos(t)ide analogue treatment are mainly not infectious because of irreversible DNA chain termination[J]. Hepatology, 2020, 71(2): 463-476.

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