康 樂(lè)，吳星亮，王 銳（翻譯），曲向陽(yáng)（校對(duì)）

（南京博維特健康管理有限公司，江蘇 南京 211800）

薦 語(yǔ)：文章對(duì)豬群豬藍(lán)耳病狀態(tài)監(jiān)控的采樣方法、采樣數(shù)量、檢測(cè)方案及結(jié)果解讀做了詳細(xì)的分析，非常具有臨床實(shí)踐意義，故譯出此文并推薦。希望對(duì)養(yǎng)豬場(chǎng)的豬藍(lán)耳病凈化工作有幫助。

1 在產(chǎn)房?jī)?nèi)監(jiān)控

為了判斷豬場(chǎng)是否處于豬藍(lán)耳病穩(wěn)定狀態(tài)，必須確定新生仔豬是否具有病毒血癥。豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）很容易通過(guò)胎盤(pán)傳播，尤其是在母豬妊娠的后期。因此，若母豬群具有豬藍(lán)耳病病毒血癥，子宮內(nèi)胎兒將非常可能發(fā)生被感染。

因此，必須對(duì)產(chǎn)房?jī)?nèi)豬藍(lán)耳病感染狀態(tài)進(jìn)行監(jiān)控。最好對(duì)新生仔豬進(jìn)行采樣檢測(cè)，但因?yàn)閷?duì)新生仔豬采樣較困難，通常對(duì)臨近斷奶的仔豬進(jìn)行檢測(cè)。若檢測(cè)結(jié)果為陰性，那么說(shuō)明基礎(chǔ)母豬群不存在豬藍(lán)耳病的循環(huán)傳播。若檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，則應(yīng)該對(duì)新生仔豬進(jìn)行檢測(cè)，以判斷仔豬是出生時(shí)已經(jīng)被感染還是因?yàn)椴溉槠陂g存在交叉污染而導(dǎo)致了被感染。

血清是用來(lái)判斷是否存在豬藍(lán)耳病病毒的最佳樣品。開(kāi)始時(shí)，可以共采集30頭仔豬血清樣品（假設(shè)疾病的流行率是10%、結(jié)果的置信區(qū)間是95%的隨機(jī)采樣數(shù)量）。若所采樣樣品的豬只已經(jīng)表現(xiàn)出臨床癥狀，那么敏感性會(huì)高很多。若豬群中豬藍(lán)耳病病毒的循環(huán)量很低，如：豬群正處于豬藍(lán)耳病凈化的最后階段或豬群處于臨床穩(wěn)定階段，此時(shí)采樣的數(shù)量可能是不足夠的，建議將采樣的仔豬數(shù)量增加至60個(gè)，這樣可以對(duì)流行率5%以上的疾病進(jìn)行監(jiān)測(cè)。若病毒的循環(huán)載量很低，就需要在一段時(shí)間內(nèi)進(jìn)行系統(tǒng)性、連續(xù)性的采樣，這樣可能從連續(xù)多個(gè)月陰性的豬場(chǎng)檢測(cè)到陽(yáng)性樣品。一旦開(kāi)始監(jiān)測(cè)到陽(yáng)性的結(jié)果，至少應(yīng)對(duì)一個(gè)完整繁殖周期的仔豬PRRSV狀態(tài)進(jìn)行監(jiān)控。

由于對(duì)仔豬采血比較困難，且有損動(dòng)物福利，在豬藍(lán)耳病病毒血癥流行率較低在仔豬群中，需要采集大量的樣品進(jìn)行檢測(cè)，現(xiàn)在大多采用其他替代性采樣方法。 一種方法是使用處理液——仔豬閹割睪丸和斷尾的滲出液。由于這種滲出液主要由血漿和血液組成，如果仔豬被感染，就會(huì)及時(shí)檢測(cè)到病毒，其與血清樣本幾乎保持一樣良好的靈敏度，并且可以增加樣本數(shù)量。應(yīng)該注意的是，仔豬處理液的使用只適用于進(jìn)行常規(guī)性閹割的豬場(chǎng)，如果僅靠檢測(cè)斷尾浸出液，靈敏度要低得多，不能確切地判斷豬場(chǎng)PRRSV的感染狀態(tài)(vilalta等，2018)。

已證明臍帶血是檢測(cè)新生仔豬PRRSV的可選樣品(martinvalls等，2018)。雖然這個(gè)樣品比較容易獲得，但是需要在仔豬出生前后收集，而且應(yīng)該注意采樣時(shí)避免環(huán)境污染。這是一個(gè)可靠的采樣替代性方案，在母豬分娩時(shí)很容易采樣監(jiān)測(cè)，比僅僅采用仔豬斷尾浸出液好得多。

口腔液也被認(rèn)為是合適的樣本。但問(wèn)題是，哺乳仔豬通常對(duì)采樣繩不感興趣，所以取樣時(shí)間長(zhǎng)，代表性也低，使這種采樣方法在哺乳仔豬變得不可行。為了提高這項(xiàng)技術(shù)的可行性，母豬也被包含在所謂的家庭體液中，母豬帶頭咀嚼繩子，刺激仔豬模仿，增加了采集樣品的檢測(cè)靈敏度。然而，對(duì)這種采樣體系仍在研究中，通常認(rèn)為不是最好的選擇。此外，還討論了用浸濕的毛巾從母豬乳房表面取樣的可能性，其理論基礎(chǔ)是，如果小豬被感染，它們會(huì)在唾液中排出病毒，污染母豬乳房。雖然目前使用這種技術(shù)的經(jīng)驗(yàn)不多，而且評(píng)價(jià)這種系統(tǒng)的價(jià)值還為時(shí)過(guò)早，但從產(chǎn)房采集的乳房表面樣品所獲得的檢測(cè)結(jié)果令人鼓舞。然而，在這種情況下，正如在討論臍帶血方法時(shí)提到的，可能從陰性群體中會(huì)采集到陽(yáng)性樣本，這表明可從污染的環(huán)境中檢測(cè)到病毒 RNA，因此對(duì)檢測(cè)結(jié)果必須仔細(xì)分析(vilalta等，2019)。

最后，使用組織樣本，特別是舌頭的混合樣本，來(lái)確定死胎中是否存在病毒的可能性目前正在探索中 (Baliellas, 2020)。

2 對(duì)繁殖母豬群進(jìn)行監(jiān)控

另一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)是檢測(cè)后備母豬群。在豬群引種前和隔離期結(jié)束 前，都 要 進(jìn) 行ELISA和RTPCR的檢測(cè)，以確認(rèn)豬群的健康狀況、馴化的效果，或者了解發(fā)生被感染的時(shí)間（如果被感染的話(huà)）。如果檢測(cè)到病毒，可通過(guò)測(cè)序來(lái)確定在適應(yīng)期內(nèi)所發(fā)現(xiàn)病毒是疫苗毒還是野毒。雖然這不能完全確保這些母豬不會(huì)對(duì)豬場(chǎng)造成危害，但至少通過(guò)檢測(cè)，確定這些母豬在進(jìn)入妊娠舍前不存在病毒血癥。

另一方面，對(duì)繁殖母豬群進(jìn)行監(jiān)測(cè)是極其困難的。血清學(xué)檢測(cè)幾乎沒(méi)有價(jià)值，因?yàn)槭袌?chǎng)上沒(méi)有豬藍(lán)耳病標(biāo)記疫苗，且S/P值在個(gè)體豬之間差別很大，這取決于被感染毒株的毒力強(qiáng)弱(kim等，2007) ，而且豬群在被感染后會(huì)維持幾個(gè)月的抗體陽(yáng)性。此外，再次被感染后，豬群通常沒(méi)有二次反應(yīng)，且再次被感染呈一過(guò)性，非常迅速，因此采集成對(duì)樣本檢測(cè)在確定病毒循環(huán)方面通常沒(méi)有什么用處。同樣，用RT-PCR監(jiān)測(cè)病毒血癥也是不現(xiàn)實(shí)的，因?yàn)樵谌魏翁囟〞r(shí)間里，病毒血癥的豬只數(shù)量都很少，且病毒血癥在有免疫力的成年豬只中維持時(shí)間很短，這使得檢測(cè)在實(shí)踐中沒(méi)有價(jià)值。綜上所述，可以得出結(jié)論，對(duì)生產(chǎn)母豬進(jìn)行監(jiān)測(cè)只有在陰性豬場(chǎng)和診斷豬藍(lán)耳病暴發(fā)時(shí)才有價(jià)值。

相比之下，對(duì)生長(zhǎng)育肥豬群的豬藍(lán)耳病監(jiān)測(cè)非常容易，幾乎各類(lèi)樣本和技術(shù)都可以使用。唯一需要考慮的是根據(jù)預(yù)期的疾病流行率來(lái)決定采樣數(shù)量和采樣方案，以能夠很好地代表整個(gè)豬群的被感染狀態(tài)。

（文章摘選自www.pig333.com，原 文 作 者：Cinta Prieto Suárez）