王迎賓 李丹丹 付玉環(huán)

[摘要] 目的 研究E盒結(jié)合鋅指蛋白2（ZEB2）與E-鈣黏蛋白（E-cadherin）在前列腺癌發(fā)生、發(fā)展中的表達(dá)意義。方法 選取河北省唐山市協(xié)和醫(yī)院2016年1月—2019年3月88例前列腺標(biāo)本，其中60例前列腺癌組織為觀察組，28例良性前列腺增生組織為對(duì)照組，采用免疫組化SP法檢測兩組患者ZEB2、E-cadherin蛋白表達(dá)。分析ZEB2和E-cadherin蛋白表達(dá)與前列腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系。 結(jié)果 兩組ZEB2、E-cadherin蛋白陽性表達(dá)率比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。ZEB2、E-cadherin蛋白的表達(dá)與前列腺癌患者TNM分期和骨轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（P < 0.05或P < 0.01），而與年齡和Gleason分級(jí)無關(guān)（P > 0.05）。Spearman等級(jí)相關(guān)分析顯示，前列腺癌組織中ZEB2與E-cadherin蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r = -0.377，P < 0.01）。 結(jié)論 ZEB2蛋白的高表達(dá)與E-cadherin蛋白的表達(dá)降低在前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展中可能發(fā)揮重要作用。

[關(guān)鍵詞] 前列腺癌;E盒結(jié)合鋅指蛋白2;E-鈣黏蛋白;良性前列腺增生

[中圖分類號(hào)] R737? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-7210（2020）10（b）-0102-04

[Abstract] Objective To study the expression significance of zinc-finger E-box binding protein 2 （ZEB2） and E-cadherin in the occurrence and development of prostate cancer. Methods A total of 88 prostate specimens from Tangshan Union Medical College Hospital from January 2016 to March 2019 were selected. Among them， a total of 60 prostate cancer tissues were in the observation group and a total of 28 benign prostate hyperplasia tissues were in the control group. The immunohistochemical SP method was used to detect ZEB2 and E-cadherin protein in the two groups. The relationship between ZEB2 and E-cadherin protein expression and clinicopathological parameters of prostate cancer were analyzed. Results The positive expression rate of ZEB2 and E-cadherin between the two groups were compared， and the differences were highly statistically significant （P < 0.01）. The expression of ZEB2 and E-cadherin protein were closely related to the TNM staging and bone metastasis of prostate cancer patients （P < 0.05 or P < 0.01）， but had nothing to do with age and Gleason grade （P > 0.05）. Spearman rank correlation analysis showed that ZEB2 and E-cadherin protein expression in prostate cancer tissue were negatively correlated （r = -0.377， P < 0.01）. Conclusion The high expression of ZEB2 protein and the reduced expression of E-cadherin protein may play an important role in the occurrence and development of prostate cancer.

[Key words] Prostate cancer; Zinc-finger E-box binding protein 2; E-cadherin; Benign prostate hyperplasia

前列腺癌是一種常見且惡性程度高的男性泌尿生殖系腫瘤。雖然前列腺癌的各種治療方法得到了很大的發(fā)展和應(yīng)用，但預(yù)后問題仍然存在。前列腺癌患者預(yù)后仍然較差，5年生存率約為50%[1-3]。因此，尋找和鑒定有效的分子標(biāo)志物以評(píng)估前列腺癌患者的預(yù)后是有必要的。越來越多的臨床證據(jù)表明，惡性腫瘤的臨床預(yù)后不良主要是由于浸潤和轉(zhuǎn)移率高所致。近年來，上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）被證實(shí)與前列腺癌的浸潤和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[4]。E-鈣黏蛋白（E-cadherin）被認(rèn)為是通過調(diào)節(jié)啟動(dòng)過程上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化期間細(xì)胞間黏附的關(guān)鍵因子，并且E-cadherin的喪失加速了某些癌癥中的惡性轉(zhuǎn)化和腫瘤進(jìn)展。有研究顯示[5-6]，E盒結(jié)合鋅指蛋白2（ZEB2）可以調(diào)節(jié)E-cadherin的表達(dá)，然后在腫瘤侵襲中發(fā)揮重要作用，包括膠質(zhì)瘤、腎細(xì)胞癌和前列腺癌。本研究擬探討前列腺癌組織中ZEB2與E-cadherin的表達(dá)，并分析其與臨床病理特征的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇河北省唐山市協(xié)和醫(yī)院（以下簡稱“我院”）2016年1月—2019年3月前列腺癌手術(shù)標(biāo)本60例，年齡58～85歲，平均（68.43±8.42）歲，其中臨床分期（TNM分期[7]）：T1～T2期23例、T3～T4期37例;病理分級(jí)（Gleason評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[8]）≤7分（高、中分化）32例、>7分（低分化）28例;伴有骨轉(zhuǎn)移39例。選擇我院同期良性前列腺增生（BPH）手術(shù)標(biāo)本28例作為對(duì)照組，年齡63～82歲，平均（71.36±7.53）歲。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。所有標(biāo)本均經(jīng)病理科確診為前列腺癌或良性前列腺增生，并依據(jù)《前列腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)》（WS336-2011）[9]。排除標(biāo)準(zhǔn)：接受內(nèi)分泌、放化療等治療;合并其他惡性腫瘤。

1.2 試劑與方法

兔抗人ZEB2多克隆抗體為中杉金橋公司產(chǎn)品（生產(chǎn)批號(hào)：183654223），兔抗人E-cadherin多克隆抗體為中杉金橋公司產(chǎn)品（生產(chǎn)批號(hào)：19122682）。DAB染色液批號(hào)：20011502，產(chǎn)品編號(hào)：PV-8000D。顯微鏡生產(chǎn)廠商：OLYPUS;型號(hào)：BX53。免疫組織化學(xué)染色操作參照SP法說明書進(jìn)行，染色結(jié)果用DAB光鏡下顯色，蘇木精復(fù)染，常規(guī)脫水，透明，中性樹膠封片后觀察并分析。

1.3 結(jié)果判斷

ZEB2蛋白染色主要定位于細(xì)胞質(zhì)，為淡黃色至棕褐色顆粒。E-cadherin蛋白染色主要在細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)。免疫組化陽性結(jié)果通過陽性細(xì)胞的百分比和染色強(qiáng)度綜合判斷。每例均由2名病理醫(yī)師隨機(jī)觀察5個(gè)高倍視野（400×），各計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞。陽性細(xì)胞百分比<5%記0分，5%～25%記1分，>25%～50%記2分，>50%記3分;染色強(qiáng)度：無色記0分，淡黃色記1分，棕黃色記2分，棕褐色記3分;最后兩項(xiàng)積分相加，≥3分為陽性，<3分為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

運(yùn)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)表示，采用χ2檢驗(yàn)。Spearman等級(jí)相關(guān)分析法進(jìn)行相關(guān)性分析。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者ZEB2和E-cadherin蛋白表達(dá)比較

兩組患者ZEB2、E-cadherin蛋白陽性表達(dá)率比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。見表1、圖1。

3 討論

EMT使具有極性的上皮細(xì)胞在特定情況下逐漸失去細(xì)胞原有形態(tài)結(jié)構(gòu)、細(xì)胞極性，向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化，在這個(gè)過程中獲得了遷移能力[10-11]。在腫瘤轉(zhuǎn)移的過程中，癌細(xì)胞通過EMT實(shí)現(xiàn)對(duì)周圍組織的浸潤。E-cadherin表達(dá)的降低是EMT過程中的關(guān)鍵事件[12-13]。ZEB2基因?qū)儆贓盒結(jié)合鋅指蛋白基因家族，通過抑制E-cadherin基因轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致E-cadherin的表達(dá)降低，促進(jìn)細(xì)胞發(fā)生EMT，從而增強(qiáng)細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。

鄭麗等[14]研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織中ZEB2蛋白表達(dá)顯著高于乳腺良性病變組織，ZEB2蛋白表達(dá)與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期呈正相關(guān)，且與乳腺癌預(yù)后相關(guān)。羅慶豐等[15]研究提示ZEB2蛋白陽性表達(dá)與鼻咽癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期、病理分型密切相關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)研究顯示[16-17]，下調(diào)ZEB2基因表達(dá)可以抑制卵巢癌細(xì)胞及乳腺癌細(xì)胞的侵襲和遷移能力。本研究結(jié)果顯示，ZEB2在前列腺癌組織中的陽性表達(dá)率高于良性前列腺增生組織，且表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），提示前列腺癌組織中ZEB2蛋白的表達(dá)異常升高;且前列腺癌中ZEB2蛋白表達(dá)與前列腺癌患者的TNM分期、骨轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，而與患者的年齡和Gleason分級(jí)無關(guān)。提示ZEB2蛋白表達(dá)升高可能與前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。

E-cadherin是一種重要的細(xì)胞間黏附分子，是EMT中的關(guān)鍵因子，對(duì)同種細(xì)胞間相互黏附、維持組織結(jié)構(gòu)的完整性和極性及抑制細(xì)胞離散等方面起重要作用，其表達(dá)降低促進(jìn)EMT的進(jìn)展，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力[18-20]。李家平等[21]研究發(fā)現(xiàn)E-cadherin在正常子宮內(nèi)膜呈高表達(dá)，而在子宮內(nèi)膜腺癌顯示低表達(dá)。本研究結(jié)果顯示，在前列腺癌組織中E-cadherin表達(dá)低于良性前列腺增生組織，與陶曉峰等[22]觀點(diǎn)一致。同時(shí)，E-cadherin與前列腺癌患者的TNM分期及骨轉(zhuǎn)移有關(guān)，而與患者年齡、Gleason分級(jí)無關(guān)。提示E-cadherin表達(dá)降低導(dǎo)致癌細(xì)胞間的黏附減弱，從而促進(jìn)前列腺癌浸潤和轉(zhuǎn)移。

已有研究發(fā)現(xiàn)，ZEB2與E-cadherin在鼻咽癌[15]、膀胱癌[23]、食管癌[24]中表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，認(rèn)為兩者存在拮抗作用。本研究中ZEB2與E-cadherin兩者在前列腺癌組織表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，認(rèn)為可能原因?yàn)閆EB2通過抑制E-cadherin的表達(dá)，降低細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與基質(zhì)黏附力，促進(jìn)細(xì)胞發(fā)生EMT，從而促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移。

綜上所述，ZEB2與E-cadherin是前列腺惡性演進(jìn)過程中的兩項(xiàng)重要因子，兩者可能起著既獨(dú)立又協(xié)同的作用，聯(lián)合檢測ZEB2和E-Cadherin可作為判斷前列腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的重要生物學(xué)指標(biāo)。另外，ZEB2可作為評(píng)判預(yù)后的指標(biāo)及治療干預(yù)前列腺癌的新靶點(diǎn)，為臨床診治前列腺癌提供新的思路。

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（收稿日期：2020-04-07）