雷 平，劉長松，陳 嫻，王升平※，陳曉安，王 剛

（1.湖南省微生物研究院，湖南長沙410009；2.山東省臨沂市牧旺獸藥有限公司，山東臨沂276000；3.湖南粒豐生物科技有限公司，湖南長沙410125）

鮮豆渣資源豐富，適合用于畜禽養(yǎng)殖，但由于含水量較高，夏秋高溫季節(jié)，如不及時利用，極易發(fā)霉腐敗變質(zhì)，污染環(huán)境[1]。同時，鮮豆渣含有胰蛋白酶抑制素、致甲狀腺腫素和凝血素等抗?fàn)I養(yǎng)因子，抑制豬等單胃家畜的吸收利用[2]。而對于牛羊等反芻動物而言，豆渣可在瘤胃微生物的作用下，經(jīng)過發(fā)酵分解，形成可利用的菌體蛋白、氨基酸和多肽等營養(yǎng)物質(zhì)。因此，目前鮮豆渣多用于飼喂牛羊等反芻動物。

為了將豆渣實(shí)現(xiàn)飼用資源化利用，本研究采用枯草芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌三菌聯(lián)合進(jìn)行鮮豆渣發(fā)酵，并進(jìn)行喂豬試驗(yàn)，取得了良好效果。

1 材料與方法

1.1 復(fù)合益生菌制劑和豆渣發(fā)酵

試驗(yàn)用復(fù)合益生菌制劑由湖南粒豐生物科技有限公司研制并提供，含活菌數(shù)為≥2×109CFU/mL。復(fù)合益生菌制劑主要成分為乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母菌等[3]。發(fā)酵底物為山東金鑼集團(tuán)新鮮豆渣和玉米粉質(zhì)量比9∶1 比例混合，發(fā)酵時將菌液按照質(zhì)量比3%的比例添加到發(fā)酵底物中。發(fā)酵時間為3～7 天，飼料發(fā)酵3 天以上即可使用。飼料接種發(fā)酵液菌種混勻后使用尼龍袋包裝，用繩子系緊袋口即可。

1.2 試驗(yàn)動物和分組

將90 頭20 kg 左右的杜洛克×長白×大白雜交保育仔豬隨機(jī)分成2 個處理，每個處理3 個重復(fù)，每個重復(fù)15 頭仔豬。對照組A 以豬場飼喂的常規(guī)日糧為基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組B 用發(fā)酵豆渣替代10%基礎(chǔ)日糧（10%發(fā)酵豆渣+90%常規(guī)日糧）。試驗(yàn)在臨沂新程金鑼牧業(yè)有限公司豬場進(jìn)行。

1.3 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧

常規(guī)日糧配方及營養(yǎng)水平如表1。

表1 試驗(yàn)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理

預(yù)試期7 天，進(jìn)入正試期后兩組分別喂相應(yīng)日糧。自由采食，自由飲水，按豬場正常程序進(jìn)行免疫。試驗(yàn)期30 天。

1.5 測定指標(biāo)

1.5.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)

①日增重：分別于試驗(yàn)的第一天和最后一天空腹稱重，按照每欄總重和頭數(shù)計(jì)算平均頭重，根據(jù)平均頭重的初重和末重計(jì)算平均日增重。

②采食量：每周記錄各組的采食量，試驗(yàn)結(jié)束后結(jié)算各組消耗飼料，計(jì)算出平均日采食量。

③料重比：根據(jù)日增重和采食量計(jì)算。

1.5.2 糞便微生物檢測：在試驗(yàn)后期采集糞樣。采用平板稀釋方法對樣品中的乳酸菌、大腸桿菌和沙門氏菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。

(1)乳酸菌：稱取糞樣5g 左右，采用倍比稀釋法，稀釋至10-6梯度，用移液器分別吸取10-4～10-6梯度稀釋液1 mL 加入無菌平皿中，再傾注約15 mL的MRS 培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)48h 后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)[4]。

(2)大腸桿菌菌落計(jì)數(shù)：用移液器移取樣品按照10-4～10-6梯度稀釋，稀釋液1mL 涂布接種于麥康凱培養(yǎng)基平皿上，37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 小時，選取粉紅色或紅色，表面光滑、凸起，邊緣整齊不透明的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。

(3)沙門氏菌：用微量取液器分別吸取不同梯度的樣品稀釋液1.0mL 于培養(yǎng)血中，與冷卻至45℃的SS 培養(yǎng)基混合，各稀釋度3 次重復(fù)，傾注法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，37℃培養(yǎng)24 h，進(jìn)行計(jì)數(shù)[5]。

1.5.3 腹瀉指數(shù)

每日收集仔豬糞便測定水分含量，水分含量超過70%被認(rèn)定為腹瀉，腹瀉率按照以前的研究方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，簡而言之，仔豬腹瀉率按照以下公式進(jìn)行計(jì)算：

腹瀉率（%）=（腹瀉仔豬頭數(shù)×腹瀉天數(shù)）/（仔豬總頭數(shù)×總試驗(yàn)天數(shù)）×100%

1.6 數(shù)據(jù)處理

采用SAS 統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行T 檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)酵豆渣活性益生菌含量

新鮮豆渣發(fā)酵7 天后，乳酸菌含量為3.1×109CFU/g，枯草芽孢桿菌5.6×106CFU/g ，酵母菌6.0×107CFU/g。

2.2 發(fā)酵豆渣對生長育肥豬生長性能的影響

從表2 可知，10%發(fā)酵豆渣替代常規(guī)日糧，平均日增重?zé)o明顯變化，而平均日采食量顯著高于對照組。腹瀉指數(shù)顯著降低。

表2 發(fā)酵豆渣對生長育肥豬生產(chǎn)性能的影響

2.3 發(fā)酵豆渣對生長育肥豬腸道微生物數(shù)量變化的影響

在試驗(yàn)后期對兩個處理組的試驗(yàn)豬只糞樣進(jìn)行了乳酸菌、大腸桿菌和沙門氏菌的活菌數(shù)檢測。

由表3 可見，發(fā)酵豆渣顯著提高糞便中的乳酸菌數(shù)量（P＜0.05），降低糞便中大腸桿菌和沙門氏菌含量（P＜0.05）。

表3 發(fā)酵豆渣對生長肥育豬糞便中微生物的影響

3 討論

使用發(fā)酵豆渣替代10%基礎(chǔ)日糧，沒有顯著改變仔豬的生長性能，但使用10%發(fā)酵豆渣能顯著降低飼料生產(chǎn)成本，同時也解決了豆渣廢棄污染環(huán)境的問題，一舉兩得。在采食量指標(biāo)上，發(fā)酵豆渣組采食量顯著提高，可能因?yàn)榘l(fā)酵豆渣含水量比較高（40%左右），相當(dāng)于提高了整個飼料的含水量，降低了干物質(zhì)含量，從而造成采食量升高。也有可能使用發(fā)酵豆渣，里面含有較多的益生菌，包括乳酸桿菌、酵母菌和枯草芽孢桿菌等，可以提高仔豬的采食量。添加10%發(fā)酵豆渣，顯著提高了仔豬糞便中乳酸桿菌的含量，顯著降低大腸桿菌和沙門氏菌等致病菌的含量，這主要是因?yàn)榘l(fā)酵豆渣中所含的益生菌所起的作用，而仔豬腹瀉指數(shù)的顯著降低也可能因?yàn)檫@個原因[6]。