付琳 袁艷麗 莊件兵 吳秀蓮 路雅萍 甄菊

[摘要]硫代氨基甲酸酯類除草劑是通過阻礙雜草生長(zhǎng)初期根部細(xì)胞的分裂發(fā)展達(dá)到除草目的，主要品種有禾草特、茵草敵、丁草敵、滅草敵、克草敵、燕麥敵、哌草丹等。此類除草劑可損害哺乳動(dòng)物的神經(jīng)系統(tǒng)，并蓄積在肝臟和腎臟等部位。本文擬開發(fā)出可同時(shí)檢測(cè)多指標(biāo)，且檢出限低、回收率好、操作簡(jiǎn)便、溶劑使用量少的QuEChERS/GC-MS/MS法，一方面提高檢測(cè)的時(shí)效性，另一方面也為監(jiān)管和監(jiān)測(cè)提供相應(yīng)參考。

[關(guān)鍵詞]硫代氨基甲酸酯類除草劑;QuEChERS;多指標(biāo);GC-MS/MS;檢測(cè)

中圖分類號(hào)：TS262.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.16465/j.gste.cn431252ts.202009

目前，硫代氨基甲酸酯類除草劑殘留檢測(cè)的方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法[1]、氣質(zhì)聯(lián)用法、液相色譜質(zhì)譜法等。單用氣相色譜法很難避免結(jié)果誤判，因此檢測(cè)需要一個(gè)準(zhǔn)確可靠的確認(rèn)手段[2]。《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（GB 23200.8—2016）[3]中涵蓋了對(duì)大部分硫代氨基甲酸酯類除草劑的檢測(cè)，但該方法針對(duì)的檢測(cè)范圍是水果和蔬菜，用的是單質(zhì)譜的方法。《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018）[4]中采用的是氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（GC/MS/MS）的方法，但僅有4種硫代氨基甲酸酯類除草劑，《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 除草劑殘留量檢測(cè)方法 第5部分：液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測(cè)定 食品中硫代氨基甲酸酯類除草劑殘留量》（GB 23200.5—2016）[5]中采用液質(zhì)聯(lián)用的方法（LC/MS/MS）測(cè)定了食品中包括禾草敵、茵草敵、丁草敵、滅草敵、克草敵、野麥畏、禾草丹、環(huán)草敵、燕麥敵9種硫代氨基甲酸酯類除草劑的殘留量。此外，劉莉萍[6]用UPLC-MS/MS法建立了大米中9種該類除草劑（禾草敵、克草猛、滅草猛、丁草特、禾草丹、燕麥敵、野麥畏、環(huán)草特、撲草滅）的測(cè)定方法。

從現(xiàn)有文獻(xiàn)來看，測(cè)定硫代氨基甲酸酯類除草劑常用的方法是液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS/MS）的方法，但基質(zhì)效應(yīng)對(duì)LC-MS/MS響應(yīng)的穩(wěn)定性及結(jié)果的重現(xiàn)性有一定影響。由于氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法是借助氣相色譜來實(shí)現(xiàn)樣品的進(jìn)樣和分離，一些不易揮發(fā)的大分子基質(zhì)會(huì)留在進(jìn)樣口的襯管里，可以減少一部分基質(zhì)干擾。同時(shí)由于串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）增加了子離子的質(zhì)譜信息，有二級(jí)質(zhì)譜圖，結(jié)構(gòu)解析能力增強(qiáng)，定性更精準(zhǔn)，因此與單級(jí)質(zhì)譜（MS）相比，能夠進(jìn)一步降低基質(zhì)干擾，優(yōu)化待測(cè)物的靈敏度和選擇性?；诖?，本研究擬在以上研究的基礎(chǔ)上開發(fā)一種測(cè)定糧谷中禾草特、茵草敵、丁草敵、滅草敵、克草敵、哌草丹、燕麥敵7種硫代氨基甲酸酯類除草劑的氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（GC/MS/MS）檢測(cè)方法。

1 材料與方法

1.1 儀器

Agilent 7000D型三重四級(jí)桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀;165位自動(dòng)進(jìn)樣器;DB-35MS型彈性石英毛細(xì)管色譜柱（30m×0.25mm×0.25μm）;TTL-DCLL型氮吹儀。

1.2 試劑

燕麥敵（100μg/mL）：農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所;禾草特（100μg/mL）、茵草敵（100μg/mL）、丁草敵（1 000μg/mL）、滅草敵（100μg/mL）、克草敵（100μg/mL）、哌草丹（1 000μg/mL）：北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司。

取7種標(biāo)準(zhǔn)溶液適量至10mL容量瓶中，配制成濃度為1.00μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液，然后分別取100μL、200μL、500μL、1mL、2mL上述標(biāo)準(zhǔn)混合溶液至10mL容量瓶中，加乙腈定容至刻度，得到濃度為0.01μg/mL、0.02μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、 0.20μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.3 樣品的提取與凈化

本文以玉米、大米和小麥作為基質(zhì)，稱取5g試樣（精確至0.01g）于50mL塑料離心管中，準(zhǔn)確加入10mL乙腈，渦旋混勻，超聲提取15min，3 500r/min離心3min，取上清液2mL至內(nèi)含100mgPSA、100mgC18及20mg GCB的10mL離心管中，渦旋混勻1min，過0.22μm濾膜，待上機(jī)測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)工作曲線采用在空白基質(zhì)中加入配置的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液的方法測(cè)定，加入的乙腈的體積為10mL 標(biāo)準(zhǔn)混合溶液的體積，其他操作步驟同上。

回收率實(shí)驗(yàn)選擇0.010μg/mL、0.025μg/mL、0.050μg/mL 三個(gè)濃度點(diǎn)。以0.01μg/mL為例，分別稱取5g（精確至0.01g）玉米、大米、小麥試樣各6份，加入1.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液100μL，再加入9.9mL乙腈溶液，然后按照樣品前處理方法操作，其他濃度的加標(biāo)實(shí)驗(yàn)以此類推。

1.4 儀器條件

儀器條件為升溫程序：90℃保持4min，然后以10℃/min升溫至280℃，保持3min;載氣：氦氣，純度≥99.999%;流速：1mL/min;進(jìn)樣量：1μL;進(jìn)樣口溫度：280℃;進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣。

2 結(jié)果與討論

2.1 定性與定量

先使用Scan模式全掃，積分提取質(zhì)譜圖，根據(jù)分子質(zhì)量來確定保留時(shí)間和特征離子;然后采用子離子掃描模式優(yōu)化碰撞能量，并確定靈敏度最高的子離子;最后采用DMRM模式，根據(jù)保留時(shí)間設(shè)定時(shí)間范圍，掃描母離子和子離子進(jìn)行定量分析。以大米為基質(zhì)掃描混合標(biāo)準(zhǔn)溶液獲得的TIC圖譜如圖1所示。

2.2 回收率與檢出限

根據(jù)基質(zhì)空白所產(chǎn)生的儀器背景信號(hào)的3倍值，7種除草劑的定量限分別為茵草敵12μg/kg、丁草敵3μg/kg、滅草敵6μg/kg、克草敵3μg/kg、禾草特6μg/kg、燕麥敵18μg/kg、哌草丹18μg/kg。按照本文的前處理步驟，以大米、玉米、小麥為基質(zhì)時(shí)，高、中、低三個(gè)濃度的加標(biāo)回收率都在90%～110%，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度≤5%。玉米基質(zhì)中7種除草劑的保留時(shí)間、線性方程、相關(guān)系數(shù)、回收率等如表1所示。

3 結(jié) 論

本方法可以同時(shí)測(cè)定7種硫代氨基甲酸酯類除草劑，前處理選擇簡(jiǎn)單、高效、易操作的QuEChERS法，能滿足批量樣的快速檢測(cè)。進(jìn)一步優(yōu)化后的QuEChERS前處理方法，顯著降低了有機(jī)試劑的消耗量，對(duì)環(huán)境友好（前處理有機(jī)試劑用量減少到10mL，前處理時(shí)間減少到10min）。二級(jí)質(zhì)譜可以更大程度地排除基體干擾，提高待測(cè)物的選擇性和靈敏度，增加了硫代氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢測(cè)手段，為食品安全檢測(cè)提供了多種選擇。

參考文獻(xiàn)

[1]游永，師新進(jìn)，曹穎，等.高效液相色譜法和氣相色譜法分析茵草敵原藥[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2007，28（6）：5-8

[2]呂保英，邵俊杰，沈力生，等.食品分析大全[M].北京：高等教育出版社，1997：79.

[3]國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)，農(nóng)業(yè)部，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局.食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法：GB 23200.8—2016[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2017.

[4]國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部，國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局.食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法：GB 23200.113—2018[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2018.

[5]國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)，農(nóng)業(yè)部，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局.食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 除草劑殘留量檢測(cè)方法 第5部分：液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測(cè)定 食品中硫代氨基甲酸酯類除草劑殘留量：GB 23200.5—2016[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2017.

[6]劉莉萍.UPLC-MS/MS法測(cè)定大米中9種硫代氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留[J].現(xiàn)代食品科技，2012，28（10）：1416-1418.