俞喜娜 陳 康 張燕平 崔益瑋 汪 藝 戴志遠(yuǎn) 王萍亞 趙巧靈 沈 清*

（1 浙江省水產(chǎn)品加工技術(shù)聯(lián)合重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 浙江工商大學(xué)海洋食品研究院 杭州310012 2 舟山市食品藥品檢測(cè)檢驗(yàn)研究院 浙江舟山316000）

南極磷蝦是一種主要生活在南極洲水域的甲殼類動(dòng)物，生物資源豐富[1]。雖然其體積較小，但是含有豐富的蛋白質(zhì)及磷脂，磷脂中含大量Ω-3 系列多不飽和脂肪酸鏈，尤其是 EPA（二十碳五烯酸）和DHA（二十二碳六烯酸）。EPA 可降低膽固醇的含量和血液的黏稠度，促進(jìn)血液的循環(huán)[2]。DHA 可預(yù)防心血管疾病和癌癥[3]，健腦明目[4]。相對(duì)于傳統(tǒng)魚油中脂質(zhì)來說，南極磷蝦中的脂質(zhì)吸收性較高，且無毒副作用，因此具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。目前國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)磷脂的原料主要為蛋黃和大豆，開發(fā)南極磷蝦資源有利于緩解資源緊缺的問題，研究南極磷蝦磷脂的提取和應(yīng)用不僅具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值，還具有一定的社會(huì)價(jià)值[5]。

現(xiàn)階段研究多集中于油脂類（魚油、蝦油）研究，而從海洋生物中提取磷脂的報(bào)道較少。傳統(tǒng)磷脂提取方法主要有超臨界萃取法[6]、超聲波[7]和微波酶輔助提取法[8]、有機(jī)溶劑萃取法[9]、酶水解結(jié)合溶劑法[10]等。如邊晶晶等[11]用正己烷和異丙醇溶劑提取南美白對(duì)蝦蝦頭中的磷脂；崔益瑋等[12]用氯仿和甲醇提取南極磷蝦粗脂，并用丙酮純化。雖然溶劑提取法分離的效率較高，便于連續(xù)操作，但磷脂提取率較低[13]，操作步驟繁瑣，而且磷脂中殘留的有機(jī)溶劑的含量易超標(biāo)，有些有機(jī)溶劑具有較高毒性，這些原因都使此方法的使用受到限制。超臨界萃取法和超聲波酶輔助提取法等具有操作溫度低，提取成分不易被破壞的優(yōu)點(diǎn)，然而這些方法的設(shè)備昂貴，生產(chǎn)成本較高。陳文娟等[14]采用蛋白酶水解結(jié)合溶劑法提取大黃魚的卵磷脂，并對(duì)酶解的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明酶水解法的提取率比溶劑法和超聲波法高。

脂質(zhì)組學(xué)是在大范圍的分子水平上對(duì)細(xì)胞脂質(zhì)組進(jìn)行研究，其內(nèi)容主要包括脂質(zhì)的提取、分離及分析鑒定，進(jìn)而了解脂質(zhì)相關(guān)的結(jié)構(gòu)信息。目前脂質(zhì)組學(xué)的研究方法有很多，如核磁共振法、軟電離質(zhì)譜技術(shù)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等，隨著這些技術(shù)的快速發(fā)展，提高了微量脂質(zhì)分析檢測(cè)的準(zhǔn)確性和快速性，其在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)及藥學(xué)等領(lǐng)域應(yīng)用較為廣泛，而在食品科學(xué)領(lǐng)域的研究相對(duì)較少[15]。對(duì)于南極磷蝦脂質(zhì)組學(xué)的研究有助于開發(fā)和利用南極磷蝦磷脂，提高相關(guān)產(chǎn)品的應(yīng)用價(jià)值。

本試驗(yàn)中采用酶輔助提取法提取南極磷蝦中的磷脂，確定最佳的工藝條件，并對(duì)磷脂的脂質(zhì)組學(xué)進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1 原料與試劑

原料：南極磷蝦肉糜凍品，遼寧省大連海洋漁業(yè)集團(tuán)公司。將南極磷蝦肉糜凍結(jié)后于-18 ℃運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室，-30 ℃凍藏備用。

胃蛋白酶（來自豬胃黏膜，800～2 500 U/mg 蛋白質(zhì)，鱈魚蛋白P700）和胰蛋白酶（來自豬胰腺，活性相當(dāng)于4 IU，cod P1750），美國(guó)Sigama-Aldrich 公司；色譜級(jí)乙腈、甲醇和二氯甲烷，美國(guó)Fisher Scientific 公司；PC 28:0 （14:0/14:0）、PE 30:0（15:0/15:0）和PI 32:0（16:0/16:0） 3 種磷脂標(biāo)準(zhǔn)品，美國(guó)Avanti Polar Lipids 公司；鹽酸、氫氧化鈉、1，2-二氯乙烷、甲醇鈉、三氟化硼-甲醇配合物、正己烷、均為分析純級(jí)試劑，國(guó)藥試劑公司。

1.2 主要儀器與設(shè)備

4000 QTRAP 串聯(lián)四極桿質(zhì)譜配ESI 離子源，美國(guó)AB Sciex 公司；Agilent 1100 高效液相色譜儀，美國(guó)Agilent 公司；7890A 氣相色譜儀，美國(guó)Agilent 公司；METTLER-AL204 電子天平，美國(guó)Mettler 公司；超純水系統(tǒng)，法國(guó)Milli-Q 公司。其余為實(shí)驗(yàn)室常用的儀器與設(shè)備。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 磷脂提取 將南極磷蝦脂質(zhì)的提取率作為考察提取效果的指標(biāo)，以提取溫度、pH 值、提取時(shí)間作為影響提取效果的因素，對(duì)胃蛋白酶和胰蛋白酶兩種輔助提取磷脂的方法進(jìn)行比較。磷脂的提取方法如下：

1）胃蛋白酶法 定量稱取5 g 磷蝦蝦糜，放入250 mL 燒杯中，加入50 mL 胃蛋白酶溶液（0.2%胃蛋白酶溶于0.075 mol/L 鹽酸中），用0.1 mol/L 鹽酸溶液調(diào)整pH 值為2.6～2.8。在42 ℃的恒溫室中用磁力攪拌器攪拌過夜。室溫下冷卻后，用1 mol/L 氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)提取液的pH 值至7.4±0.2，磷脂的提取采用1，2-二氯乙烷替換氯仿后的Bligh & Dyer 法[16]。

2）胰酶法 定量稱取5 g 磷蝦蝦糜，與50 mL 胰酶溶液（1%胰酶溶于0.2 mol/L 磷酸緩沖液）于250 mL 燒杯中混合。將混合物置37 ℃恒溫室攪拌過夜，冷卻至室溫，用1 mol/L 鹽酸溶液調(diào)節(jié)提取物的pH 值至7.4±0.2。磷脂的提取采用1，2-二氯乙烷替換氯仿后的Bligh & Dyer 法[16]。

1.3.2 南極磷蝦脂質(zhì)的脂肪酸組成分析

1.3.2.1 脂肪酸甲酯化 將2 mL 甲醇鈉溶液（2 g 氫氧化鈉加到100 mL 甲醇溶液中）與0.1 g 磷蝦油混合、振蕩均勻，在65 ℃水浴條件下酯交換30 min，加入2 mL 三氟化硼-甲醇配合物混勻后繼續(xù)在65 ℃水浴中加熱3 min。冷卻后加入2 mL 正己烷和2 mL 飽和氯化鈉溶液。在上清液中加入適量的無水硫酸鈉后，用0.22 μmol/L 有機(jī)膜過濾。

1.3.2.2 氣相色譜分析[17]色譜柱：HP-88 毛細(xì)管柱 （100%氰丙基聚硅氧烷，30 m×0.25 mm，0.25 μm 膜，美國(guó)Agilent 公司）；載氣：氮?dú)?；流速?.65 mL/min；火焰離子化檢測(cè)（FID）溫度：250 ℃；升溫程序：設(shè)定初始溫度70 ℃并保持5 min，然后以15℃/min 速率升至120 ℃并保持1 min，接著以5 ℃/min 速率升至175 ℃并保持5 min，最后5 min 內(nèi)升至220 ℃。

1.3.3 HILIC-QTOF/MS 法分析 用二氯甲烷和甲醇（2:1，V/V）混合溶液溶解提取的磷脂，過0.22 μmol/L 有機(jī)膜后用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用設(shè)備分析。色譜和質(zhì)譜條件如下：

1）色譜條件 用Agilent 1100 高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離。色譜柱：YMC Triart diol HILIC 柱（4.6 mm×250 mm，3 μm）；柱溫：40 ℃；流速：0.2 mL/min；進(jìn)樣量：2 μL；流動(dòng)相組成：流動(dòng)相A（乙腈中添加53 mmol/L 甲酸，pH 4.0～4.5）和流動(dòng)相B（添加60 mmol/L 甲酸胺和53 mmol/L 甲酸的超純水溶液，pH 3.6）；梯度洗脫條件：0～3 min，A維持在95%；3～13 min，A 從95%降至70%；13～18 min，A 持續(xù)下降至50%。

2）質(zhì)譜條件 用4000 QTRAP 串聯(lián)四極桿質(zhì)譜配ESI 離子源設(shè)備進(jìn)行質(zhì)譜分析。正/負(fù)離子模式：負(fù)離子模式；離子噴霧電壓：4 500 V；溫度：500 ℃；干燥氣壓力：344.76 kPa；霧化氣壓力：413.80 kPa；氣簾氣壓力：172.38 kPa；質(zhì)譜測(cè)量范圍：m/z 450～950；儀器控制和數(shù)據(jù)采集軟件：Analyst 1.5.1。

1.3.4 數(shù)據(jù)處理分析 用Origin 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算數(shù)據(jù)的平均值、標(biāo)準(zhǔn)差及顯著性水平。P<0.05，具有顯著性差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 蛋白酶的選擇

蛋白酶對(duì)磷脂含量的影響見圖1?？梢钥闯?，添加任意兩種酶都可提高磷蝦糜中磷脂的提取率。隨著胰蛋白酶濃度的增加，磷脂提取率顯著增加，在胰蛋白酶添加量為0.02%時(shí)達(dá)到最高值；繼續(xù)添加胰蛋白酶，磷脂提取率快速下降，并在酶添加量0.03%時(shí)開始緩慢減少，由于胰蛋白酶自身為蛋白質(zhì)，過量的酶會(huì)引起蛋白酶水解，因此導(dǎo)致磷脂的提取率降低[18]。隨著胃蛋白酶的添加量的增加，磷脂提取率緩慢增加，在胃蛋白酶添加量為0.025%時(shí)達(dá)到最高值1.7%，并保持穩(wěn)定。這是因?yàn)橛擅负偷孜锝Y(jié)合而成的中間產(chǎn)物飽和，當(dāng)?shù)孜餄舛炔辉俑淖兊臅r(shí)候，磷脂提取量保持在平衡范圍。不同的蛋白酶對(duì)南極磷蝦磷脂提取率的影響差異比較顯著，這是因?yàn)椴煌N類的蛋白酶與蛋白質(zhì)的結(jié)合位點(diǎn)不同[19]。當(dāng)酶添加量相同時(shí)，用胰蛋白酶提取磷脂的含量較高。當(dāng)磷脂提取率達(dá)到最大值3.5%時(shí)，所需酶添加量為0.02%。而胃蛋白酶最適酶添加量為0.025%，此時(shí)磷脂提取率為1.74%，遠(yuǎn)低于胰蛋白酶最高的磷脂提取量，因此選取胰蛋白酶作為最優(yōu)提取酶[20]。

2.2 優(yōu)化的提取條件

2.2.1 溫度對(duì)南極磷蝦磷脂提取率的影響 溫度對(duì)磷脂提取率的影響見圖2?？梢钥闯?，在一定溫度范圍，隨著溫度的升高，磷脂提取率先逐漸增加，40 ℃時(shí)達(dá)到最大值，提取率為（2.51±0.05）%；溫度超過40 ℃后，磷脂提取率逐漸降低。這是因?yàn)槊糠N酶都有其最適的溫度范圍，在這一范圍內(nèi)，溫度升高酶活性增強(qiáng)，溫度過高則會(huì)導(dǎo)致酶失活[21]。溫度升高也易導(dǎo)致磷脂自身氧化，胰蛋白酶的最適溫度約為40 ℃[22]。

圖1 酶含量對(duì)磷脂提取率的影響Fig.1 The effect of enzyme concentration on the extraction rate of phosphatide

圖2 溫度對(duì)磷脂提取率的影響Fig.2 The effect of temperature on the extraction rate of phosphatide

2.2.2 pH 值對(duì)南極磷蝦磷脂提取率的影響 pH值對(duì)磷脂提取率的影響見圖3。可以看出，當(dāng)pH9時(shí)，磷脂提取率最高，為（3.35±0.07）%。隨著pH值的增加，提取率呈顯著下降趨勢(shì)。這是由于酶活性中心的分子構(gòu)型隨pH 值的變化而變化，使底物和酶的結(jié)合受到一定的影響，從而影響酶的活性[23]。本試驗(yàn)中選取的胰蛋白酶在堿性條件下活性較強(qiáng)，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道胰蛋白酶的最適pH 值為8左右[24-25]，而圖中胰蛋白酶活性最強(qiáng)時(shí)的pH 值為9 左右，這可能是因?yàn)椴煌课惶崛〉囊鹊鞍酌傅淖钸mpH 不同[26]。

2.2.3 時(shí)間對(duì)南極磷蝦磷脂提取率的影響 時(shí)間對(duì)磷脂提取率的影響見圖4?？梢钥闯鲭S著時(shí)間的增加，磷脂提取率顯著增加，在3 h 附近磷脂的提取率達(dá)到最大值（3.01±0.08）%。之后，隨著時(shí)間的增加，磷脂提取率下降。這是由于長(zhǎng)時(shí)間的酶解導(dǎo)致南極磷蝦中富含的多不飽和脂肪酸發(fā)生氧化分解，因此南極磷蝦磷脂的提取率降低[27]。

圖3 pH 值對(duì)磷脂提取率的影響Fig.3 The effect of pH on the extraction rate of phosphatide

圖4 時(shí)間對(duì)磷脂提取率的影響Fig.4 The effect of hydrolysis time on the extraction rate of phosphatide

2.3 響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)與數(shù)據(jù)分析

由單因素試驗(yàn)得知，溫度、pH 值和時(shí)間對(duì)南極磷蝦磷脂的提取都有影響。采用響應(yīng)面法對(duì)工藝參數(shù)進(jìn)一步優(yōu)化，確定反應(yīng)的最佳工藝條件。由單因素試驗(yàn)可知，在溫度40 ℃，pH10，時(shí)間3 h 時(shí)得到最佳的磷脂提取率。根據(jù)Box-Benhnken 中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，選取溫度、pH 值和時(shí)間作為自變量，每個(gè)因素選取3 個(gè)水平，以磷脂提取率為響應(yīng)值。試驗(yàn)因素與水平編碼表見表1。表2為17 個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)的結(jié)果。采用Design-Expert 8.0.6 Trial 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行響應(yīng)面分析。

表1 響應(yīng)面因素水平表Table 1 Levels and factors of response surface methodology（RSM）

表2 響應(yīng)面方案設(shè)計(jì)和試驗(yàn)結(jié)果Table 2 The program of RSM and experiment result

以南極磷蝦磷脂的提取率為響應(yīng)值進(jìn)行二次多元回歸擬合，得到南極磷蝦磷脂提取率對(duì)溫度、pH 值、時(shí)間3 個(gè)因素的回歸方程為：

Y=3.73+0.058A+0.026B+0.051C-0.43AB-0.27AC+0.015BC-0.23A2-0.76B2-0.41C2

對(duì)該二次多元回歸擬合模型進(jìn)行方差分析和顯著性檢驗(yàn)，結(jié)果見表3。

表3 回歸方程參數(shù)方差分析表Table 3 Analysis of variance table of regression equation parameters

由方差分析表3可以看出，模型P＜0.0001，表明模型極其顯著，失擬項(xiàng)P=0.0507＞0.05 不顯著，表明模型擬合較好。影響磷脂提取率的因素排序?yàn)椋簻囟龋緋H 值＞時(shí)間，即溫度對(duì)南極磷蝦磷脂提取率的影響最大，pH 值次之，時(shí)間的影響最小。溫度、pH 值、時(shí)間的二次項(xiàng)對(duì)磷脂的提取率的影響極其顯著（P＜0.05），交互項(xiàng)中AB 和AC 相互影響極其顯著，BC 影響不顯著。據(jù)文獻(xiàn)[20]可知，酶最適溫度受pH 值、底物種類等因素影響，而時(shí)間對(duì)pH 值影響不大。3 個(gè)因素間相互作用的響應(yīng)面與等高線圖見圖5。

為確定最佳工藝條件，在因素水平內(nèi)以磷脂提取率為指標(biāo)，對(duì)響應(yīng)面進(jìn)行分析，得到最佳工藝組合為：溫度40.7 ℃，pH 8.98，時(shí)間3.02 h，提取率的預(yù)測(cè)值為3.73%。為了便于實(shí)際操作，將工藝條件調(diào)整為溫度41 ℃，pH 9，時(shí)間3 h。在最佳優(yōu)化工藝條件下做5 次重復(fù)試驗(yàn)，提取率為（3.66 ±0.03）%。

2.4 南極磷蝦樣品中磷脂脂肪酸化學(xué)成分

對(duì)提取到的南極磷蝦磷脂進(jìn)行甲酯化衍生處理，用氣相色譜法[28]分析。對(duì)比37 種脂肪酸甲酯混標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)氣相色譜圖與試驗(yàn)所得氣相色譜圖，按照面積歸一化進(jìn)行定量處理，結(jié)果見表4。從南極磷蝦磷脂樣品中共鑒定出16 種脂肪酸，其中多不飽和脂肪酸含量占比最高。飽和脂肪酸（Saturated fatty acid，SFA）的含量占33.91%，以棕櫚酸酯為主，含量達(dá)31.58%，肉豆蔻酸甲酯次之，含量為2.33%。不飽和脂肪酸 （Unsaturated fatty acid，UFA）占68.42%，以多不飽和脂肪酸（Polyunsaturated fatty acid，PUFA）含量為主，占59.52%，單不飽和脂肪酸 （Monounsaturated fatty acid，MUFA）含量占8.90%。不飽和脂肪酸中，以EPA和DHA 為主，其含量分別達(dá)31.94%和20.64%，說明南極磷蝦磷脂中含豐富的Ω-3 多不飽和脂肪酸，EPA 和DHA 總和達(dá)52.58%。

表4 南極磷蝦脂肪酸化學(xué)組分及含量Table 4 The chemical constituent and content of fatty acids in Antarctic krill

2.5 南極磷蝦樣品中磷脂的HILIC-QTOF/MS脂質(zhì)組學(xué)鑒定

利用HILIC-QTOF/MS 對(duì)南極磷蝦磷脂進(jìn)行脂質(zhì)組學(xué)鑒定，南極磷蝦樣品的PC，PE 和PI 的HILIC-MS/MS 色譜圖如圖6所示。在此實(shí)驗(yàn)樣品未檢出磷脂酰絲氨酸（PS），這是因?yàn)槠湓谀蠘O磷蝦蝦肉中屬于豐度較低的磷脂。根據(jù)磷脂標(biāo)準(zhǔn)品PC 28:0（14:0/14:0），PE 30：0（15:0/15:0）和32:0（16:0/16:0） 的洗脫順序得到PC、PE 和PI 的保留時(shí)間分別為10.42，11.3 min 和17.09 min。由于在流動(dòng)相中添加了甲酸，PC 分子易被電離為[M+HCOO]-，共檢測(cè)到39 種PC 分子，大多集中在m/z 750～950 區(qū)域，其中m/z 824.9 離子豐度最大，根據(jù)其MS 信息及先前發(fā)表的文獻(xiàn)[2]，可初步鑒定其結(jié)構(gòu)可能為[PC 16:0/20:5+HCOO]-。另外m/z 850.9 和m/z 906.9 的豐度也較大，結(jié)構(gòu)分別被鑒定為[PC 16:0/22:6 + HCOO]-和[PC 20:0/22:6+HCOO]-。PE 分子被脫質(zhì)為[M-H]-，共檢測(cè)到16 種PE 分子，響應(yīng)值最大的為m/z 836.8，其結(jié)構(gòu)為[PE 22:5/22:6-H]-，其次為m/z 854。PI 的光譜與前兩者相比較為簡(jiǎn)單，出峰較少，因此其分子種類較少。共檢測(cè)到4 種，其中m/z 881.9 的豐度最大，其結(jié)構(gòu)可能為[PI 16:0/22:6-H]-。

由于不同的共價(jià)化合物的離子化效率主要依賴于其偶極電位，磷脂的偶極矩集中在極性頭上，而疏水尾的偶極矩則可忽略不計(jì)，因此根據(jù)提取離子色譜圖得到各磷脂分子物種的峰面積，并對(duì)其相對(duì)含量進(jìn)行歸一化處理，結(jié)果見表5。磷脂的C 原子總數(shù)為30～44，雙鍵數(shù)為1～12。從表5中可以看出南極磷蝦磷脂種類較多，EPA 和DHA 鏈的磷脂含量相對(duì)較高。例如在PC、PE 和PI 中都存在含C16:0/C22:6脂肪酸鏈的磷脂分子，其豐度分別為7.71%，11.32%和41.78%；在PC 和PI 中都存在含C16:0/C20:5脂肪酸鏈的磷脂分子，其豐度分別為8.21%和31.93%；從PC 和PE 中檢測(cè)出含C20:0/C22:6脂肪酸鏈的磷脂分子，豐度分別為6.79%和2.10%。從表5中還可以發(fā)現(xiàn)PC、PE 和PI 的脂肪酸鏈中不飽和度高的脂肪酸鏈含量很高。例如PC中存在含有o-16:1/18:4、16:1/18:4、o-14:0/22:5、14:0/22:5、o-16:0/22:6、o-16:0/22:5、16:0/22:6、16:0/22:5、o-18:0/22:6、18:0/22:6、20:0/22:6、20:0/22:5、22:6/22:6、20:3/24:4、20:2/24:4、20:1/24:4 等脂肪酸鏈的磷脂分子；PE 中存在含有16:0/20:5、o-16:0/22:6、o-16:0/22:5、16:0/22:6、16:0/22:5、20:5/22:6、20:0/22:6、22:6/22:5、22:6/22:4 等脂肪酸鏈的磷脂分子；PI 中存在含有16:0/20:5、16:0/22:6、16:0/22:5 等脂肪酸鏈的磷脂分子。

圖6 南極磷蝦樣品的（a）PC，（b）PE 和（c）PI 的HILIC-MS/MS 色譜圖Fig.6 HILIC-MS/MS chromatograms of（a） PC，（b） PE and （c） PI from Antarctic krill sample

3 結(jié)論

本研究發(fā)現(xiàn)胰蛋白酶水解后用1，2-二氯乙烷改進(jìn)的Bligh & Dyer 法提取，可顯著提高南極磷蝦中磷脂的提取率，其受酶解溫度、pH 值、時(shí)間的影響。為獲得最佳提取條件，采用響應(yīng)面優(yōu)化提取工藝，獲得最佳工藝條件為溫度41 ℃，pH 9，時(shí)間3 h。在最佳工藝條件下磷脂提取率為（3.66±0.03）%。采用優(yōu)化的南極磷蝦磷脂的酶輔助Bligh & Dyer 法提取的南極磷蝦磷脂中共檢出8種脂肪酸，不飽和脂肪酸含量為8.90%，其中多不飽和脂肪酸占總脂肪酸含量的59.52%，富含EPA和DHA；飽和脂肪酸為31.58%，其中棕櫚酸甲酯和肉豆蔻酸甲酯含量較高。采用HILIC-QTOF/MS方法對(duì)磷脂進(jìn)行定量分析、鑒定，共測(cè)定出磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇3 類59 種磷脂分子，其中很多磷脂分子中含有EPA 和DHA 鏈。與其它方法相比，酶輔助提取南極磷蝦中的磷脂得到的脂肪酸種類多，不飽和脂肪酸含量高，磷脂營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)較好。

表5 南極磷蝦中磷脂分子的種類和數(shù)量Table 5 The identity and quantity of phospholipid molecular species in Antarctic krill

（續(xù)表5）