譚朝陽(yáng) 侯玉蘭 謝 鳳 劉大偉 羅文蘋 鄧資翔

重慶市璧山區(qū)人民醫(yī)院心內(nèi)科 402760

高膽固醇血癥是造成心腦血管梗阻栓塞的主要原因之一，既往研究發(fā)現(xiàn)血膽固醇水平每下降1%，冠心病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)降低2%～3%，因此，高膽固醇血癥的早期治療對(duì)于預(yù)防冠心病的發(fā)生十分重要[1]。在高膽固醇血癥的治療過(guò)程中，他汀類藥物一直是治療的基礎(chǔ)藥物[2]。它能通過(guò)抑制肝臟制造膽固醇，來(lái)降低血中膽固醇含量，其中辛伐他汀是常見(jiàn)的他汀類藥物，臨床應(yīng)用十分廣泛。近年來(lái)，部分學(xué)者提出他汀類藥物如阿托伐他汀可能能通過(guò)調(diào)節(jié)腸道菌群菌屬，進(jìn)一步調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，而辛伐他汀對(duì)腸道菌群的影響目前仍不明確。 本文通過(guò)探討辛伐他汀治療對(duì)高膽固醇血癥患者血脂及腸道菌群的影響，為進(jìn)一步研究提供參考。

1 對(duì)象與方法

1.1 觀察對(duì)象 選取2019年5—10月我院心內(nèi)科初診高膽固醇血癥患者50例作為觀察對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國(guó)成人血脂異常防治指南(2016年修訂版)》[3]中對(duì)于高膽固醇血癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，血總膽固醇≥6.22mmol/L。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)既往接受降血脂治療；(2)患有胃腸疾病包括但不限于惡性腫瘤、胃潰瘍、炎癥性腸病、急性胃腸炎、消化道出血；(3)感染性疾??；(4)1個(gè)月內(nèi)服用抗生素及益生菌類藥物。所有受試者均簽署知情同意書，本研究通過(guò)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。入組患者中男33例，女17例，年齡(43.6±7.9)歲，體重(59.3±8.4)kg,BMI 26.6±3.8。

1.2 治療方法 所有患者予以辛伐他汀(默沙東制藥有限公司，批號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H19990366)10mg，口服，1次/晚，療程為12周。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 血脂(TC、TG、HDL-C及LDL-C)測(cè)定：所有患者治療前后收集空腹靜脈血標(biāo)本，3 000r/min離心5min取上清，存儲(chǔ)于-20℃冰箱，所有樣本同批次全自動(dòng)生化分析儀(貝克曼庫(kù)爾特AU5800)測(cè)定血清TC、TG、HDL-C及LDL-C水平。

1.3.2 C反應(yīng)蛋白及內(nèi)毒素測(cè)定：所有患者治療前后收集空腹靜脈血標(biāo)本，3 000r/min離心5min取上清，存儲(chǔ)于-20℃冰箱，所有樣本同批次檢驗(yàn)，CRP采用免疫透射比濁法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)買自北京世紀(jì)沃德生物科技有限公司；LPS采用鱟試劑動(dòng)態(tài)比濁法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自武漢云克隆科技股份有限公司。

1.3.3 腸道菌群測(cè)序：治療前后收集患者糞便，并保存于-8℃冰箱內(nèi)，同批次行通過(guò)16S rDNA的V3-V4區(qū)域測(cè)序分析腸道菌群的多樣性，提取DNA模板采用糞便標(biāo)本使用Stool DNA試劑盒(Omega Bio-Tek公司，美國(guó))，通過(guò)設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增16S rRNA的V3區(qū)域，得到分離的DNA樣本。通過(guò)兩步PCR法建立DNA樣本庫(kù)，在第二步時(shí)加上Illumina測(cè)序適配元件，并進(jìn)一步通過(guò)Illumina MiSeq系統(tǒng)(TinyGene Bio-Tech公司，上海)對(duì)分離得到的DNA樣本庫(kù)進(jìn)行測(cè)序，并通過(guò)相關(guān)軟件對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行分析。

1.4 觀察指標(biāo) (1)比較患者治療前后血脂相關(guān)指標(biāo)(TC、TG、HDL-C及LDL-C)水平的改變；(2)比較患者治療前后C反應(yīng)蛋白及內(nèi)毒素水平的改變；(3)比較患者治療前后腸道菌群菌屬的改變；(4)觀察并記錄辛伐他汀治療療程內(nèi)患者不良反應(yīng)的發(fā)生情況。

2 結(jié)果

2.1 患者治療前后血脂相關(guān)指標(biāo)情況 與治療前相比，辛伐他汀治療后患者TC、TG、LDL-C水平顯著降低，HDL-C水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 患者治療前后血脂相關(guān)指標(biāo)情況

2.2 患者治療前后C反應(yīng)蛋白及內(nèi)毒素水平情況 與治療前相比，辛伐他汀治療后患者CRP及LPS水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 患者治療前后C反應(yīng)蛋白及內(nèi)毒素水平情況

2.3 患者治療前后腸道菌群菌屬情況 與治療前相比，治療后患者腸道菌群菌屬中乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬及擬桿菌門未分類普氏菌屬顯著升高，腸球菌屬顯著下降，其中未分類瘤胃菌屬、未分類毛螺菌屬、鏈球菌屬及葡萄球菌屬均無(wú)顯著改變(P>0.05)，見(jiàn)表3。

表3 患者治療前后腸道菌群菌屬情況

2.4 不良反應(yīng)發(fā)生情況 辛伐他汀治療后2例患者發(fā)生不良反應(yīng)，1例患者發(fā)生胃腸脹氣，1例患者發(fā)生腹痛。

3 討論

血脂異常是一種常見(jiàn)心血管疾病，其中以低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)增高為主要表現(xiàn)的高膽固醇血癥是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病，例如冠心病、缺血性卒中以及外周動(dòng)脈疾病等疾病發(fā)生的最重要的危險(xiǎn)因素[4]。對(duì)于高膽固醇血癥的治療，他汀類藥物是基礎(chǔ)類藥物，非而他汀類藥物常作為補(bǔ)充藥物[5]。

既往研究發(fā)現(xiàn)，人類胃腸道中的微生物群對(duì)個(gè)體的健康具有顯著影響。近期研究發(fā)現(xiàn)，腸道的微生物失衡可能在心血管疾病(CVD)的發(fā)病機(jī)制中起作用。一項(xiàng)研究[6]發(fā)現(xiàn)，與單獨(dú)給予大鼠模型瑞舒伐他汀治療相比，給予大鼠模型瑞舒伐他汀及抗生素治療后，腸道菌群的多樣性明顯減少(乳酸桿菌和雙歧桿菌的豐度顯著降低)，同時(shí)瑞舒伐他汀的降脂功效也顯著受損，說(shuō)明腸道菌群的改變對(duì)于他汀類藥物的降脂作用有一定影響。同時(shí)另一項(xiàng)納入202例高脂血癥患者的研究[7]發(fā)現(xiàn)，他汀類藥物治療后，對(duì)他汀類藥物敏感的患者乳酸桿菌、真細(xì)菌、糞腸球菌和雙歧桿菌比例顯著增加，說(shuō)明腸道菌群改變可能與他汀藥物的療效有一定相關(guān)性，但該研究并未對(duì)這一現(xiàn)象進(jìn)一步的機(jī)制進(jìn)行探討。而近期一項(xiàng)對(duì)于實(shí)驗(yàn)小鼠模型的基礎(chǔ)研究[8]發(fā)現(xiàn)，抗生素治療后的小鼠腸道菌群發(fā)生了相應(yīng)改變，同時(shí)所產(chǎn)生的次級(jí)膽汁酸的水平下降，進(jìn)一步利用定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析腸道菌群所產(chǎn)生的次級(jí)膽汁酸對(duì)于小鼠糖脂代謝的影響發(fā)現(xiàn)，小鼠體內(nèi)參與糖原代謝和膽固醇及膽汁酸生物合成的蛋白質(zhì)的表達(dá)水平都發(fā)生了改變，說(shuō)明腸道菌群的改變也能在一定程度上影響體內(nèi)膽固醇的水平。不僅如此，他汀類藥物對(duì)于腸道菌群的改變還與機(jī)體炎癥因子的水平有一定相關(guān)性，一項(xiàng)對(duì)小鼠糖尿病模型的基礎(chǔ)研究[9]發(fā)現(xiàn)，阿托伐他汀治療糖尿病小鼠后，腸桿菌和腸球菌均減少 , 乳桿菌、雙歧桿菌和擬桿菌增加，同時(shí)CRP及LPS水平顯著下降，表明糖尿病小鼠炎癥狀態(tài)得到一定減輕，但這個(gè)方面在臨床研究中尚無(wú)相關(guān)資料支持，因此，本文中同時(shí)檢測(cè)CRP及LPS的水平，擬對(duì)該點(diǎn)進(jìn)行臨床上的探討。

本文結(jié)果顯示，辛伐他汀治療后患者TC、TG、LDL-C、CRP及LPS水平顯著降低，HDL-C水平顯著升高，同時(shí)腸道菌群菌屬中乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬及擬桿菌門未分類普氏菌屬顯著升高，腸球菌屬顯著下降，說(shuō)明辛伐他汀不僅降低高膽固醇血癥患者血脂水平，還能減輕其輕度炎癥狀態(tài)，同時(shí)調(diào)節(jié)腸道微生物菌群的改變，使得益生菌比例顯著增加，通過(guò)對(duì)既往文獻(xiàn)復(fù)習(xí)，筆者有理由提出假說(shuō)，其輕度炎癥狀態(tài)的改善，可能是腸道菌群調(diào)整后，進(jìn)一步影響了次級(jí)膽汁酸的水平導(dǎo)致，但這一方面，仍需進(jìn)一步基礎(chǔ)研究進(jìn)行驗(yàn)證。