王 越

（長春市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與檢測中心,吉林長春 130032）

有機磷農(nóng)藥具有藥效高、作用方式多樣、適用范圍廣等特點，主要用于防治植物病蟲害，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛。但同時它也具有一定的毒性，不合理的使用會給人們的身體健康帶來嚴重威脅。農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果常作為判斷農(nóng)產(chǎn)品是否符合最大殘留量要求的重要依據(jù)，由此可見，提高農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果的可靠性和準確性具有十分重要的意義。不確定度是測定結(jié)果的重要組成部分，它反映了測定結(jié)果的可靠性以及不確定度分量對檢測過程中產(chǎn)生的影響，在測定結(jié)果接近限量值時必須給出標準方法的不確定度[1]。本文根據(jù)NY/T761-2008的標準方法，建立數(shù)學(xué)模型，以西紅柿中毒死蜱測量不確定度評定為例，系統(tǒng)分析了氣相色譜法測定蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留量不確定度的評定全過程。

1 材料與方法

1.1 材料

（1）蔬菜樣品：當(dāng)?shù)啬呈吖乩谐闄z的西紅柿樣品。

（2）試劑與材料：乙腈（色譜純）；丙酮（色譜純）；氯化鈉，140℃烘烤4h；蒸餾水；濾膜，0.2μm，有機溶劑膜。

（3）標準品：毒死蜱，1000μg/ml，容量1ml，農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)監(jiān)檢測中心。

（4）儀器設(shè)備：Agilent 7890B GC（FPD）；食品加工器；旋渦混合器；氮吹儀；電子天平；勻漿機。

1.2 方法

1.2.1 樣品制備

西紅柿樣品經(jīng)四分法縮分，將其粉碎，混勻，裝入指定容器內(nèi)，制成試樣。

1.2.2 提取

用電子天平準確稱取25.0g試樣放入250ml燒杯內(nèi)，加入50.0ml乙腈，進行2min的高速勻漿，過濾收集到裝有7g氯化鈉的具塞量筒中，收集得到大約50ml濾液，蓋好塞子，震蕩約1min，使氯化鈉與濾液充分混勻，常溫放置30min，待有機相與水相分層。

1.2.3 凈化

準確吸取10.00ml乙腈層溶液，放入100ml燒杯中，在80℃水浴鍋上加熱，同時通入氮氣，蒸發(fā)近干時用分度吸量管吸取5.00ml丙酮，沖洗燒杯內(nèi)壁，將提取液混勻后，過有機濾膜待測。

1.2.4 色譜條件

色譜柱為DB-1701，30m×0.25mm×0.25μm；進樣口溫度250℃；檢測器溫度290℃；程序升溫：初始120℃保持2min，然后10℃/min升溫到270℃保持12min；載氣為氮氣；柱流量為1.99ml/min；進樣方式：不分流；進樣量：1μl。

2 不確定度的數(shù)學(xué)模型

根據(jù)NY/T761-2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》[2]可知：蔬菜中有機磷類農(nóng)藥定量結(jié)果計算公式為：

式中：ω表示試樣中毒死蜱農(nóng)藥殘留量（mg/kg）；V1表示乙腈提取溶劑總體積（ml）；A表示試樣中毒死蜱的峰面積；V3表示試樣定容體積ml；ρ表示毒死蜱標準溶液的濃度（mg/L）；V2表示用于檢測的溶液體積（ml）；As表示毒死蜱標準溶液的峰面積；m表示試樣的質(zhì)量（g）。

3 不確定度的來源

從不確定度的數(shù)學(xué)模型可知，氣相色譜法測定西紅柿中有機磷農(nóng)藥殘留量不確定度的主要來源包括：（1）A類不確定度：測量的重復(fù)性；（2）B類不確定度：標準物質(zhì)、樣品稱量、樣品處理過程中溶液體積、色譜儀峰面積的測量等因素。

4 各標準不確定度分量的評定

4.1 標準不確定度的A類評定

從前處理過程到氣相色譜儀檢測，相同的試樣、試驗條件、操作人員，進行8次平行試驗，濃度為0.10mg/L的毒死蜱標準工作液在同一條件下平行配制8次，測定結(jié)果的平均值用于外標法定量。測量覆蓋整個方法的全過程，包括樣品的制備、前處理、上機檢測和數(shù)據(jù)處理。測定結(jié)果見表1。

表1 樣品中毒死蜱殘留量的檢測結(jié)果

根據(jù)貝塞爾公式計算：

按正態(tài)分布計算，平均值的標準偏差為：

重復(fù)測定的相對標準不確定度為：

4.2 標準不確定度的B類評定

4.2.1 試樣制備均勻性引入的相對標準不確定度的評定

因為整個樣品制備過程，均嚴格遵循標準的操作規(guī)程進行處理，并且經(jīng)過了高速勻漿機的充分混合，所以，試樣制備均勻性引入的相對標準不確定度可以忽略不計。

4.2.2 天平稱取試樣質(zhì)量（m）引入的相對標準不確定度的評定

稱取試樣的質(zhì)量為25.0g，根據(jù)電子天平的檢定證書可知，天平的最大允許差為±0.01g，因為稱量分為兩次操作，一次去皮，一次是添加試樣，所以分量應(yīng)該計算兩次。按均勻分布：。

稱量試樣質(zhì)量（m）的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

4.2.3 樣品前處理過程中溶液體積（V）引入的相對標準不確定度的評定

冬林，認識你，我要感謝多年好友張笑天先生。那年，身為吉林省作協(xié)主席的張笑天，帶了一批擬評上首屆吉林省文學(xué)獎的文學(xué)作品，進京請雷達、李敬澤、白燁，以及筆者再研究一下。我們審讀后一致認為胡冬林的《青羊消息》為最佳。第二年全國第一屆環(huán)境文學(xué)評獎終審會上，我發(fā)現(xiàn)竟沒有《青羊消息》，便向主持評獎的全國人大環(huán)境與資源保護委員會主任委員曲格平先生指出，這次評獎漏掉《青羊消息》是很大的遺憾。會上，同任環(huán)境文學(xué)獎評委的雷達、李敬澤同意我的看法。根據(jù)評獎規(guī)則，有三位終評委同時提議、推薦，便可列入評議對象。包括王蒙在內(nèi)的全體終評委看了《青羊消息》，便一致同意該作品榮獲首屆環(huán)境文學(xué)獎。

（1）乙腈提取液總體積（V1）引入的相對標準不確定度

樣品前處理過程中，用50ml量筒量取50.0ml乙腈，根據(jù)JJG196-2006《常用玻璃量器》可知[3]，50ml量筒的最大允許差為±0.50ml。按均勻分布：。

提取液總體積（V1）的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

（2）吸取用于檢測的提取液體積（V2）引入的相對標準不確定度

樣品前處理過程中，用10ml單標線吸量管吸取上層濾液10.00mL，根據(jù)文獻[3]可知，10ml單標線吸量管的最大允許差為±0.020ml。按均勻分布：。

吸取用于檢測的提取液體積（V2）的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

（3）試樣溶液最后定容體積（V3）引入的相對標準不確定度

試樣溶液最后定容體積（V3）的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

（4）樣品前處理過程中溶液體積（V）引入的相對標準不確定度

將以上三項不確定度分量合成得到：

樣品前處理過程中溶液體積（V）引入的相對標準不確定度為：

4.2.4 標準溶液配制過程中溶液質(zhì)量濃度（ρ）引入的相對標準不確定度的評定

（1）標準儲備液質(zhì)量濃度（ρ1）引入的相對標準不確定度

測量所使用的毒死蜱標準溶液由農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)監(jiān)檢測中心生產(chǎn)，濃度為1000μg/ml，由標準物質(zhì)證書可知，毒死蜱的擴展不確定度為7μg/ml，包含因子k=2。

標準儲備液質(zhì)量濃度（ρ1）的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

（2）標準溶液稀釋過程中質(zhì)量濃度（ρ2）引入的相對標準不確定度

毒死蜱標準溶液的稀釋過程：第一次用1ml單標線吸量管取1 000μg/ml的標準儲備液，用丙酮定容到10ml容量瓶中，配制成100μg/ml的標準工作液。第二次用1ml單標線吸量管取100μg/ml的標準工作液，用丙酮定容到10ml容量瓶中，配制成10μg/ml的標準工作液。第三次用1ml單標線吸量管取10μg/ml的標準工作液，用丙酮定容到10ml容量瓶中，配制成1μg/ml的標準工作液。第四次用1ml單標線吸量管取1μg/ml的標準工作液，用丙酮定容到10ml容量瓶中，配制成0.1μg/ml的標準工作液。此稀釋過程，共使用4次1ml單標線吸量管，4次10ml單標線容量瓶。根據(jù)文獻[3]可知，1ml單標線吸量管的最大允許差為±0.007ml，10ml單標線容量瓶的最大允許差為±0.020ml。按均勻分布，。

1ml單標線吸量管引入的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

10ml單標線容量瓶引入的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

標準溶液稀釋過程中質(zhì)量濃度（ρ2）引入的相對標準不確定度為：

（3）標準溶液配制過程中溶液質(zhì)量濃度（ρ）引入的相對標準不確定度

將以上兩項不確定度分量合成得到：

標準溶液配制過程中溶液質(zhì)量濃度（ρ）引入的相對標準不確定度為：

5 氣相色譜儀峰面積（A1，AS）測量引入的相對標準不確定度的評定

根據(jù)儀器檢定證書可知，氣相色譜儀的定量重復(fù)性為1.5%。按均勻分布：。因試樣和標樣各進行一次峰面積測量，則氣相色譜儀峰面積（A1，AS）測量引入的相對標準不確定度為：

6 相對合成標準不確定度

因以上各不確定度分量相對獨立，則試樣中毒死蜱殘留量的相對合成標準不確定度為：

7 擴展不確定度及測定結(jié)果表示

在置信概率p=95%時，包含因子k=2，則擴展不確定度為：

試樣中毒死蜱的殘留量為：

8 結(jié)論

綜上所述，以NY/T761-2008檢測蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留量的不確定度的主要來源包括色譜儀峰面積的測量、標準溶液的制備過程、前處理過程中的溶液體積以及重復(fù)性檢測，其他因素影響較小。由此可見，對檢測樣品做多次平行試驗；對標準物質(zhì)進行期間核查；對檢測儀器進行校準；檢測人員規(guī)范操作都可以在一定程度上有效的降低不確定度，保證檢測結(jié)果的準確性和可靠性。