顏巍，王凌云，鐘麗，施建豐

（南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 江蘇省中醫(yī)藥研究院檢驗(yàn)科，江蘇 南京210028）

在實(shí)際工作中，經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)患者首次檢測總膽紅素和直接膽紅素結(jié)果超過200μmol/L 時(shí)會同時(shí)出現(xiàn)高密度脂蛋白膽固醇結(jié)果偏低只有0.1-0.2mmol/L， 甚至有少數(shù)患者首次檢測總膽紅素和直接膽紅素結(jié)果在150μmol/L 左右時(shí)就會出現(xiàn)高密度脂蛋白膽固醇結(jié)果偏低只有0.1～0.2mmol/L。隨著膽紅素結(jié)果的下降，血清高密度脂蛋白膽固醇結(jié)果又逐漸上升。 所以為了更清楚的了解高密度脂蛋白膽固醇這種極低結(jié)果的出現(xiàn)是檢測方法受到干擾還是合成不足，現(xiàn)依據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會 (CLSI)頒布的EP7-A2 文件，對高密度脂蛋白膽固醇檢測結(jié)果進(jìn)行干擾分析。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 收集當(dāng)天本院體檢且未服用任何藥物的體檢人員標(biāo)本（無黃疸、無脂血、無溶血），重復(fù)測定 20 次測得 HDLC 均值為2.49mmol/L， 作為高值標(biāo)本，將此混合血清分別用去離子水稀釋成中值 1.88mmol/L，低值 0.9mmol/L，極低值 0.13mmol/L。

1.2 儀器與試劑 檢測儀器是羅氏 Cobass8000(ISE/701/701/502)全自動(dòng)生化分析儀，由德國羅氏診斷有限公司生產(chǎn)。 高密度脂蛋白膽固醇(HDLC3)PEG 修飾酶法檢測試劑盒(批號26555401)及其配套校準(zhǔn)品C.fas Lip（批號23301001）、總膽紅素（TB IL）重氮法檢測試劑盒（批號31816101）、直接膽紅素（DBIL）重氮法檢測試劑盒（批號28690001）及其配套校準(zhǔn)品CFAS （批號296954）均由羅氏診斷有限公司生產(chǎn)。 干擾物膽紅素純物質(zhì) （批號 PlusA ZS0002）由日本SYSMEX 公司提供。

1.3 檢測方法

1.3.1 干擾試驗(yàn)1[1-4]將膽紅素純物質(zhì)用去離子水稀釋成 TBIL 值 600μmol/L，DBIL 值為 510μmol/L的溶液(日常工作中未遇見有超過此結(jié)果的患者血清)，作為高濃度（H），將去離子水作為低濃度（L），按照 L、75%L+ 25%H、50%L+ 50%H、25%L+75%H、H 的比例配制成系列濃度溶液后，按 5%體積加入到混合血清中，在與基礎(chǔ)標(biāo)本相同的檢測條件下連續(xù)重復(fù)測定3 次取均值 。

1.3.2 干擾試驗(yàn) 2 將 TBIL 值 600μmol/L，DBIL 值為510μmol/L 的濃溶液按 5%體積加入到不同濃度HDLC 的混合血清中，重復(fù)測定3 次取均值。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度水平膽紅素干擾物檢測血清HDLC的結(jié)果[5]隨著膽紅素干擾物濃度的不斷增加，對H DLC 檢測的負(fù)干擾程度也不斷增加，但干擾范圍均在x±1.96s 范圍內(nèi)，故認(rèn)為沒有明顯負(fù)干擾。 見表1。

2.2 TBIL 值 600μmol/L，DBIL 為 510μmol/L 時(shí)對不同濃度HDLC 檢測的干擾 加入高濃度的膽紅素純物質(zhì)溶液后，隨著HDLC 濃度的增加，負(fù)干擾程度逐漸降低， 當(dāng)HDLC 濃度為1.88mmol/L 及以上時(shí)干擾效應(yīng)在x±1.96s 范圍內(nèi)， 故沒有明顯負(fù)干擾。 見表2。

表1 不同濃度TBIL 和DBIL 對正常水平HDLC檢測的干擾數(shù)據(jù)（mmol/L）及干擾效應(yīng)[4](%)

表2 TBIL 值 600μmol/L，DBIL 為 510μmol/L時(shí)對不同濃度HDLC 檢測的干擾

3 討論

高密度脂蛋白膽固醇(HDLC)，主要是由肝臟合成，它可反映血漿中高密度脂蛋白的多少。 它通過其特有的膽固醇逆轉(zhuǎn)錄功能將肝外組織中過多的膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟，在肝臟中合成脂蛋白、膽汁酸、類固醇激素以及脂溶性維生素，以防止膽固醇在這些肝外組織中過多地聚集。HDLC 的逆轉(zhuǎn)錄功能還可以減少脂類物質(zhì)在血管壁的沉積，它能夠?qū)?dòng)脈粥樣硬化斑塊的泡沫細(xì)胞轉(zhuǎn)移至肝臟排出體外，所以高密度脂蛋白膽固醇一般被通俗地理解為“好”膽固醇，抗動(dòng)脈粥樣硬化的膽固醇[6]。 血清HDLC 的濃度與動(dòng)脈硬化綜合征的發(fā)病率有關(guān)系，有研究表明HDLC 濃度降低，尤其是伴有甘油三酯(TG) 濃度升高的時(shí)侯會增加心血管系統(tǒng)疾病的危險(xiǎn)，即TG/HDLC 比值與心血管系統(tǒng)疾病的發(fā)病危險(xiǎn)呈正相關(guān)[7，8]，也是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[13]。 同時(shí)HDLC 可以調(diào)節(jié)內(nèi)皮NO 的合成活化，抗炎，抗氧化，促進(jìn)纖溶等作用[9，10]。 對血管有一定的保護(hù)功能[11]。目前在臨床常規(guī)的血脂檢測中HDLC 是必不可少的檢查項(xiàng)目[12-16]，故分析清楚HDLC 濃度減低的真實(shí)原因?qū)τ谂R床醫(yī)生的診斷和治療有很大的幫助。

羅氏TBIL、DBIL 檢測試劑盒檢測正常人血清總膽紅素水平在1.7～21.0μmol/L，直接膽紅素水平在0～5.0μmol/L， 日常工作中經(jīng)常會遇見高膽紅素血癥患者，并且高濃度膽紅素會影響很多生化項(xiàng)目的檢測結(jié)果。 羅氏試劑檢測HDLC 也會受到標(biāo)本溶血、脂血的影響，本次實(shí)驗(yàn)中選用的干擾物為膽紅素純物質(zhì)，排除了其他干擾物的影響。選用TBIL濃度最高 600μmol/L，DBIL 為 510μmol/L 是因?yàn)閷?shí)際工作中沒有遇見超過此濃度的患者標(biāo)本。表1的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示 HDLC 血清濃度在 2.49±0.06 mmol/L 時(shí)，隨著膽紅素濃度的不斷增加，對HDLC檢測的負(fù)干擾也逐漸增加， 因干擾的程度均在x±1.96s 范圍內(nèi)，故認(rèn)為沒有明顯負(fù)干擾。表2 的結(jié)果顯示 TBIL 濃度為 600μmol/L，DBIL 為 510μmol/L時(shí)對 PEG 修飾酶法檢測 HDLC 濃度為 0.9±0.02mmol/L 及以下濃度時(shí)存在明顯負(fù)干擾，當(dāng)HDLC 濃度為極低值0.13mmol/L 時(shí)干擾偏倚達(dá)-30.77%，但干擾效應(yīng)絕對值最大只相差0.07mmol/L。 而 HDLC 濃度在 1.88mmol/L 和 2.49mmol/L 時(shí)都顯示沒有明顯負(fù)干擾， 干擾效應(yīng)值也在可接受范圍內(nèi)， 沒有因?yàn)楦吣懠t素的干擾而出現(xiàn)極低值的現(xiàn)象。

總之，高膽紅素血癥尤其是高直接膽紅素血癥患者血清HDLC 出現(xiàn)極低值不是高膽紅素對其檢測的負(fù)干擾，而是由于其血清中的HDLC 真實(shí)值就是很低，應(yīng)該考慮肝臟功能受損導(dǎo)致其合成不足引起，可以建議臨床醫(yī)生從合理改善肝臟功能方面著手治療患者。