劉冰彌，張 闖，李 麗,3，劉洋成，欒佳思，劉 宇,3

(1.遼寧大學(xué)藥學(xué)院，遼寧沈陽110036；2.遼寧新藥研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧沈陽110036；3.遼寧省天然產(chǎn)物制藥工程技術(shù)研究中心，遼寧沈陽110036）

0 引 言

姜黃素(Curcumin)是從中國傳統(tǒng)中草藥的根莖中提取的一種成分，對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有抗增殖活性和誘導(dǎo)凋亡作用，在體內(nèi)可抑制腫瘤發(fā)生，具有良好的臨床應(yīng)用潛力[1]。為提高其體內(nèi)抗癌活性，人們對(duì)姜黃素結(jié)構(gòu)進(jìn)行了大量的修飾和改造，出現(xiàn)了許多活性顯著的姜黃素類似物[2]，但是大多數(shù)類似物因體內(nèi)血藥濃度過低或消除迅速而不能發(fā)揮治療作用[3]。聲動(dòng)力療法(SonoDynamic Therapy,SDT)是近年興起的一種極具臨床應(yīng)用前景的腫瘤治療新方法，利用腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞在氧化還原平衡方面的差異，通過超聲波照射聲敏劑(聲敏藥物)產(chǎn)生協(xié)同作用，提高腫瘤細(xì)胞內(nèi)的活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)水平，導(dǎo)致細(xì)胞死亡[4-6]，這種協(xié)同作用產(chǎn)生的效果比單獨(dú)藥物作用更強(qiáng)。因而，使用更小劑量的聲敏藥物結(jié)合超聲波照射就能達(dá)到治療效果。針對(duì)大多數(shù)抗癌活性顯著的姜黃素類似物都存在體內(nèi)血藥濃度低的缺點(diǎn)，設(shè)想從姜黃素類似物中篩選出聲敏劑，利用超聲與低濃度姜黃素類似物的協(xié)同作用達(dá)到抗腫瘤效果。

姜黃素、羥基乙?；S素、4,4-雙甲基姜黃素(dimethylcurcumin,DMCU)的分子結(jié)構(gòu)如圖1所示。研究發(fā)現(xiàn)姜黃素及其衍生物羥基乙酰化姜黃素(見圖 1)均具有聲敏性[7-8]。我們合成的姜黃素類似物 4,4-雙甲基姜黃素[9]，其化學(xué)結(jié)構(gòu)與姜黃素及羥基乙?；S素差異較小，因此推測DMCU具有聲敏性。先前的研究已經(jīng)證實(shí)了DMCU可與小牛胸腺雙鏈DNA以溝槽結(jié)合模式形成穩(wěn)定的復(fù)合物，且兩者的距離在 2～8 nm 范圍內(nèi)[10]。研究表明，當(dāng) ROS與DNA之間的距離在1.5～9 nm范圍內(nèi)時(shí)，可直接攻擊DNA，造成DNA損傷[11]。因而，認(rèn)為超聲結(jié)合DMCU產(chǎn)生的 ROS可有效損傷 DNA，從而引起DNA構(gòu)象發(fā)生變化。為了驗(yàn)證上述推測，本文以4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)作為檢測 DNA 分子構(gòu)象變化的熒光探針，利用熒光光譜技術(shù)研究超聲波照射結(jié)合 DMCU對(duì) DNA的損傷作用，從而為ROS的產(chǎn)生及其作用提供依據(jù)。另一方面，鑒于ROS 生成被認(rèn)為是SDT的主要機(jī)制，本文在模擬人體生理?xiàng)l件下采用氧化-萃取分光光度法[12]檢測超聲過程中產(chǎn)生的ROS，并使用ROS清除劑鑒別ROS種類，從而對(duì)超聲作用條件下 DMCU損傷DNA的聲化學(xué)機(jī)制進(jìn)行初步探討。

圖1 姜黃素、羥基乙?；S素、4,4-雙甲基姜黃素(DMCU)的分子結(jié)構(gòu)Fig.1 The molecular structures of curcumin and hydroxyl- acetylated curcumin,and 4,4-dimethylcurcumin(DMCU)

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器和試劑

KQ-500DE型數(shù)控超聲儀(昆山超聲儀器有限公司)，頻率為 40 kHz，功率為 200 W。UV-2550紫外可見分光光度計(jì)(Shimadzu Co.,日本)；F-7000熒光光譜儀(Hitachi High-Technologies Co.,日本)；AL204電子分析天平(上海梅特勒-托利多儀器有限公司)；PHS-3TC酸度計(jì)；微量進(jìn)樣器。

脫氧核糖核酸(小牛胸腺 DNA，北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司產(chǎn)品)儲(chǔ)備液濃度為7.5×10-5mol·L-1；DMCU(實(shí)驗(yàn)室自制)儲(chǔ)備液濃度為2.5×10-3mol·L-1；三(羥甲基)氨基甲烷(Tris,AR,天津市博迪化工有限公司)；4',6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽(DAPI,AR,上海浩然生物技術(shù)有限公司)濃度為 7.5×10-5mol·L-1；二苯卡巴肼(DPCI,AR,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)儲(chǔ)備液濃度為1.0×10-2mol·L-1；抗壞血酸(Vc,AR,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；甘露醇(D-Mann,AR,天津博迪化工股份有限公司)；L-組氨酸(L-His,AR,天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所)，三種清除劑的儲(chǔ)備液濃度均為5×10-2mol·L-1。實(shí)驗(yàn)用水為二次蒸餾水，其余試劑均為市售分析純。實(shí)驗(yàn)中所有超聲作用過程均避光操作，水溫均保持在35～37 ℃。

2.2 實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1 DMCU的降解及超聲時(shí)間的研究

將7個(gè)規(guī)格均為25 mL的容量瓶，編號(hào)為1～7號(hào)。先向每個(gè)容量瓶加入相同體積的DMCU儲(chǔ)備液，用緩沖液定容。將上述溶液分別轉(zhuǎn)移至規(guī)格為50 mL的錐形瓶中，封口后，超聲作用分別0、1、2、3、4、5、6 h。超聲作用結(jié)束后，測定紫外吸收光譜。

2.2.2 超聲波照射DMCU溶液產(chǎn)生ROS的測定

取6個(gè)規(guī)格均為50 mL的容量瓶，分別標(biāo)為1～6號(hào)，依次向其中加入不同體積的DMCU儲(chǔ)備液，再加入同體積DPCI儲(chǔ)備液，用緩沖溶液定容。移取25 mL上述溶液至規(guī)格為50 mL的錐形瓶中，封口后超聲作用 3 h。剩余溶液避光保存。在超聲作用過程中每隔半小時(shí)將每個(gè)錐形瓶按順時(shí)針方向移位一次，消除因不同位點(diǎn)超聲強(qiáng)度略有差異導(dǎo)致的機(jī)械誤差。超聲作用結(jié)束后，用苯與四氯化碳的混合溶液(體積比1:1)對(duì)兩組溶液進(jìn)行萃取，移取有機(jī)層溶液測定紫外吸收光譜。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

2.2.3 超聲作用前后DMCU對(duì)DNA損傷程度比較

取6個(gè)規(guī)格均為25 mL的容量瓶，編號(hào)為a～f。向a、b、c、d中分別加入同體積的DMCU儲(chǔ)備液，再向c、d、e、f中加入同體積的DNA儲(chǔ)備液，用緩沖液定容。將 b、d、f中的溶液分別轉(zhuǎn)移至規(guī)格為50 mL的錐形瓶中，封口后超聲作用3 h，a、c、e瓶避光保存。超聲作用結(jié)束后，檢測a～f溶液的紫外吸收光譜。

另取4個(gè)規(guī)格均為25 mL的容量瓶，編號(hào)為g～j，分別加入同體積DNA儲(chǔ)備液，在g和h中加入同體積DMCU儲(chǔ)備液，然后向4個(gè)瓶中加入緩沖液，使得每瓶中的溶液體積均為20 mL。將j和h中的溶液轉(zhuǎn)移至規(guī)格為50 mL的錐形瓶中，封口超聲作用 3 h。另外兩瓶溶液避光保存。超聲作用結(jié)束后，分別向這4瓶溶液中加入DAPI儲(chǔ)備液。檢測a～d及g～j溶液在275 nm波長處激發(fā)的熒光光譜。

2.2.4 DMCU濃度對(duì)DNA損傷程度的影響

取7個(gè)規(guī)格為50 mL的容量瓶，編號(hào)為a～g。依次向其中加入不同體積 DMCU儲(chǔ)備液，再加入同體積DNA儲(chǔ)備液，最后加入緩沖液使每瓶中的溶液體積均為40 mL。分別移取上述溶液20 mL至規(guī)格為50 mL的錐形瓶，封口超聲作用3 h。在超聲作用過程中，每隔半小時(shí)將錐形瓶按順時(shí)針方向移動(dòng)一次，以消除不同位點(diǎn)對(duì)超聲強(qiáng)度造成的誤差。剩余溶液避光保存。超聲作用結(jié)束之后，分別向這14份溶液中加入同體積的DAPI儲(chǔ)備液，檢測275 nm波長處激發(fā)的熒光光譜。

2.2.5 ROS的種類

選擇產(chǎn)生 ROS量最大的 DMCU濃度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。取4個(gè)50 mL容量瓶，先加入一定體積DPCI和DMCU儲(chǔ)備液，再向其中3瓶分別加入同體積的Vc、L-His和D-Mann儲(chǔ)備液，剩下一瓶溶液不加清除劑。超聲作用3 h后對(duì)所有溶液進(jìn)行萃取，移取有機(jī)層溶液測定紫外吸收光譜。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

3 結(jié)果與討論

3.1 DMCU的降解及超聲時(shí)間的確定

濃度為 1.5×10-5mol·L-1的 DMCU 溶液在不同超聲作用時(shí)間的紫外吸收光譜以及在波長 356 nm和 280 nm 處的吸光強(qiáng)度如圖 2(a)、2(b)所示。在200～550 nm波長范圍內(nèi)，DMCU在波長 356 nm處出現(xiàn)了最強(qiáng)吸收峰。經(jīng)超聲波照射后 DMCU發(fā)生了降解，在波長280 nm附近出現(xiàn)了新的吸收峰，可能是含有雙α,β-不飽和酮結(jié)構(gòu)的DMCU分子降解生成了含單個(gè) α,β-不飽和酮結(jié)構(gòu)的化合物分子。根據(jù)圖 2(b)可獲得DMCU在這兩個(gè)波長處的吸收強(qiáng)度隨超聲作用時(shí)間變化曲線。如圖2(b)所示，隨著超聲波照射時(shí)間的增加，DMCU在波長356 nm處的吸收強(qiáng)度迅速下降，2 h后趨于穩(wěn)定，表明DMCU已經(jīng)完全降解；在波長280 nm處的吸收強(qiáng)度隨著超聲時(shí)間的增加而升高，3 h后吸收強(qiáng)度存在較明顯的波動(dòng)。因此，將后續(xù)實(shí)驗(yàn)中的超聲作用時(shí)間設(shè)定為3 h。

圖2 DMCU降解的吸收光譜以及DMCU在波長356 nm和280 nm處的吸光度隨超聲照射時(shí)間的變化Fig.2(a)Absorption spectra of DMCU degradation and(b)the absorbance changes of DMCU solution at 356 nm and 280 nm with different ultrasonic irradiation times

3.2 超聲作用條件下DMCU濃度與ROS的產(chǎn)量關(guān)系

氧化-萃取分光光度法是一種簡單有效的檢測ROS的方法，水溶性的DPCI可被ROS氧化成不溶于水的 1,5-二苯基卡巴腙(Diphenylcarbazone,DPCO)，通過有機(jī)溶劑萃取出的 DPCO在波長563 nm處，吸收光譜有最大吸收峰，且吸收強(qiáng)度與ROS的產(chǎn)量呈正相關(guān)性[12]。圖3(a)描述了超聲波照射不同濃度DMCU溶液的過程中生成的DPCO的吸收光譜圖。由圖 3(a)中可以看出，超聲照射 3 h的有機(jī)層溶液均在波長563 nm處有明顯的吸收峰，表明溶液中均產(chǎn)生了ROS。此外，單純超聲作用雖然也能使溶液中產(chǎn)生 ROS，但產(chǎn)量較低，加入DMCU后ROS明顯增多。圖3(b)中比較了超聲照射和未經(jīng)超聲照射兩種情況下，不同濃度的DMCU溶液在波長 563 nm處的吸收值，DPCI濃度為1.0×10-3mol·L-1，超聲作用時(shí)間為 3 h，數(shù)據(jù)用三個(gè)實(shí)驗(yàn)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。如圖 3(b)所示，未經(jīng)超聲照射的不同濃度的DMCU溶液在波長563 nm處的吸收值差別不大，但與超聲照射組相比差異明顯。另外，隨著DMCU濃度增大，ROS產(chǎn)量逐漸升高，當(dāng) DMCU 濃度為 1.5×10-5mol·L-1時(shí)，ROS產(chǎn)量達(dá)到最大，原因可能是當(dāng)濃度高于1.5×10-5mol·L-1后，溶液中過多的 DMCU 阻滯了聲致發(fā)光的傳導(dǎo)，導(dǎo)致產(chǎn)生的ROS減少。

圖3(a)濃度為1.0×10-3mol·L-1的DPCI與不同濃度DMCU混合的溶液中產(chǎn)生的DPCO的吸收光譜；(b)在3小時(shí)超聲照射和無超聲照射下DPCO在563 nm處的吸光度變化Fig.3(a)Absorption spectra of the generated DPCO in the mixed solutions of DPCI(1.0 × 10-3mol·L-1)and DMCU(different concentrations)and(b)the absorbance changes of DPCO at 563 nm under 3 hours of ultrasonic irradiation or non-irradiation

3.3 超聲照射前后DMCU及DMCU+DNA溶液的吸收光譜

在 DNA溶液和 DMCU溶液濃度均為1.5×10-5mol·L-1，DNA、DMCU 及 DNA+DMCU溶液在超聲照射和無照射條件下的吸收光譜如圖 4所示。從圖4可知，單獨(dú)DNA溶液的特征吸收峰值在261 nm處，而DNA與DMCU混合液在波長261 nm處的吸收強(qiáng)度顯著提高，說明加入 DMCU后的 DNA溶液發(fā)生了明顯的增色效應(yīng)，表明DMCU與DNA形成了復(fù)合物DNA-DMCU。超聲作用條件下單獨(dú)DNA溶液相較于無超聲照射的溶液表現(xiàn)出增色效應(yīng)，表明DNA受到了損傷，其構(gòu)型發(fā)生了變化。其原因可以解釋為超聲照射過程中溶液中產(chǎn)生了具有高氧化活性的ROS，它們在短時(shí)間內(nèi)攻擊近旁的DNA分子，使得DNA分子的空間結(jié)構(gòu)遭到破壞，雙螺旋結(jié)構(gòu)展開，DNA的堿基對(duì)被暴露出來，導(dǎo)致其特征吸收峰處的吸收強(qiáng)度增大[13]。此外，由于DMCU的降解產(chǎn)物與DNA的吸收譜帶部分重疊，因而不能通過比較超聲前后DNA與DMCU混合溶液在波長261 nm處附近的吸收強(qiáng)度判斷DNA的受損程度。因此，我們借助熒光探針通過熒光光譜法來進(jìn)行比較。

圖4 DNA、DMCU及DNA+DMCU溶液在3小時(shí)超聲照射和無照射條件下的吸收光譜Fig.4 Absorption spectra of DNA,DMCU and DNA+DMCU solutions under 3 hours of ultrasonic irradiation or nonirradiation

3.4 超聲照射前后DMCU存在下DNA損傷程度的對(duì)比

文獻(xiàn)[10]已經(jīng)證實(shí)，在模擬生理?xiàng)l件下DMCU與DNA可形成復(fù)合物DNA-DMCU，且其可與DNA小溝結(jié)合的熒光探針DAPI發(fā)生競爭取代反應(yīng)。在360 nm的激發(fā)波長下，DNA-DAPI復(fù)合物的最強(qiáng)發(fā)射峰出現(xiàn)在波長 460 nm 附近[14]，超聲前后的DMCU溶液在波長400～500 nm范圍內(nèi)均有熒光，因而對(duì)復(fù)合物的熒光強(qiáng)度可產(chǎn)生干擾。當(dāng)將激發(fā)波長設(shè)定為275 nm，DNA、DMCU、DAPI溶液濃度均為 1.5×10-5mol·L-1時(shí)，超聲波照射前后的 DNA與DMCU混合溶液c與d及單純DMCU溶液a與b的最強(qiáng)熒光發(fā)射峰均出現(xiàn)在波長350 nm附近，而DNA- DAPI復(fù)合物在波長463 nm處出現(xiàn)最強(qiáng)發(fā)射峰(見圖5)。因此，我們選擇275 nm作為激發(fā)波長，以消除其他物質(zhì)對(duì)DNA-DAPI復(fù)合物熒光強(qiáng)度的影響。

由圖5可知，以DAPI作為熒光探針，超聲照射的DNA溶液j相較于無超聲照射的DNA溶液i在波長 463 nm處的熒光強(qiáng)度有所下降，表明單獨(dú)超聲波照射僅對(duì)DNA分子造成輕微損傷。此外，在無超聲照射條件下，先將DMCU加入到DNA溶液，然后再加入DAPI熒光探針，由此形成的混合溶液 g在波長 463 nm處的熒光強(qiáng)度明顯低于DNA+DAPI混合溶液i，表明在溶液g中，DMCU 先與DNA發(fā)生了相互作用，與一定量的DNA分子形成了幾乎無熒光的復(fù)合物 DNA-DMCU，后加入的DAPI與該復(fù)合物上DMCU發(fā)生競爭取代反應(yīng)，將一部分 DMCU取代下來，同時(shí)形成強(qiáng)熒光的DNA-DAPI復(fù)合物。由于溶液i和g中DNA濃度相同，則g中與DAPI相結(jié)合的DNA分子數(shù)量少于 i中的 DNA分子數(shù)量，因而形成強(qiáng)熒光的DNA-DAPI復(fù)合物少于i溶液。然而，超聲照射后的DNA+DMCU混合溶液再加入DAPI熒光探針，由此形成的混合溶液h在波長463 nm附近的熒光強(qiáng)度比無超聲照射的混合溶液g更低。因此可以推測，除了DMCU結(jié)合造成的DNA損傷外，超聲結(jié)合DMCU產(chǎn)生的協(xié)同效應(yīng)也對(duì)DNA產(chǎn)生了損傷。通過4種溶液體系在463 nm附近的熒光強(qiáng)度值可知，由溶液 g→h的熒光強(qiáng)度差值大于由溶液 i→g的差值，表明超聲結(jié)合 DMCU產(chǎn)生的協(xié)同效應(yīng)可使DNA發(fā)生嚴(yán)重?fù)p傷，且效果比單獨(dú)使用超聲波照射或單獨(dú)使用DMCU更好。

3.5 DMCU濃度對(duì)DNA損傷程度的影響

為了進(jìn)一步考察超聲條件下 DMCU濃度對(duì)DNA損傷的影響，以DAPI作為熒光探針通過熒光光譜比較了超聲照射(3 h)和無超聲照射條件下DNA的損傷程度，結(jié)果如圖6所示。實(shí)驗(yàn)中，DNA和 DAPI的濃度均為 1.5×10-5mol·L-1。在無超聲波照射和超聲波照射(3 h)兩種條件下，在波長463 nm處的熒光強(qiáng)度都隨著 DMCU濃度升高而降低，表明隨著DMCU濃度的增加，DMCU與結(jié)合在DNA分子上的熒光探針 DAPI發(fā)生了競爭取代，致使DNA-DAPI復(fù)合物減少，從而導(dǎo)致熒光強(qiáng)度降低，但超聲照射組熒光強(qiáng)度降低的程度比未照射超聲組更大。以上結(jié)果表明，在一定時(shí)長的超聲波照射條件下，隨著DMCU濃度升高，ROS產(chǎn)量增多，因而有更大的幾率破壞 DNA分子，導(dǎo)致在波長463 nm處的熒光強(qiáng)度降低，為超聲結(jié)合DMCU協(xié)同產(chǎn)生的ROS對(duì)DNA造成了進(jìn)一步損傷的結(jié)論提供了有力的證據(jù)支撐。

圖6 在3小時(shí)超聲照射和無照射條件下，以DAPI為探針的不同濃度DMCU與DNA混合溶液在463 nm處熒光強(qiáng)度對(duì)比Fig.6 Comparison of the fluorescence intensity at 463 nm of the mixed solution of DNA and DMCU(different concentrations)with DAPI as a probe under 3 hours of ultrasonic irradiation or non-irradiation

3.6 ROS種類的鑒別

為了鑒定ROS種類，本文選取Vc、L-His和D-Mann三種ROS清除劑進(jìn)行研究。不同類型ROS清除劑對(duì)DPCO吸收值的影響如圖7(a)所示。

實(shí)驗(yàn)中 DPCI濃度為 1.0×10-3mol·L-1，DMCU濃度為 1.5×10-5mol·L-1，D-mann、L-His、Vc 的濃度為2.0×10-3mol·L-1，作用時(shí)間為3 h。數(shù)據(jù)用3個(gè)實(shí)驗(yàn)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。?表示P＜0.05，與對(duì)照溶液(DMCU+DPCI+US)相比有顯著差異，NS表示D-Mann組與L-His組之間無顯著差異。Vc可以清除所有種類的ROS[15]；L-His是單線態(tài)氧(1O2)和羥基自由基(·OH)的清除劑[16]；而D-Man則只能清除溶液中的·OH[17]。

如圖7(a)所示，在加入Vc后，DPCO吸收值明顯降低，降低的程度與ROS清除劑對(duì)不同種類ROS清除的程度有關(guān)，因此可推測混合溶液中將 DPCI氧化為DPCO的物質(zhì)主要為ROS。

根據(jù)圖7(b)，經(jīng)計(jì)算可知，L-His與D-Man兩種清除劑對(duì) DPCO的吸收值之比P﹥0.05。因此，二者對(duì)DPCO吸收值的影響并無顯著差別，表明超聲結(jié)合DMCU產(chǎn)生的ROS主要含有·OH。最近，香港中文大學(xué)的XU C S小組分別用1O2清除劑疊氮化鈉和·OH清除劑硫脲證實(shí)了經(jīng)超聲波照射的姜黃素溶液中產(chǎn)生了1O2和·OH兩種類型的ROS[18]，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有部分一致性。此外，有研究發(fā)現(xiàn)單純對(duì)脫氧水超聲產(chǎn)生的ROS類別主要為1O2，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們認(rèn)為·OH的產(chǎn)生與超聲介導(dǎo)DMCU的降解相關(guān)。

圖7(a)在3小時(shí)超聲照射和存在不同ROS清除劑的條件下DPCI-DMCU混合溶液產(chǎn)生的DPCO的吸收光譜；(b)不同ROS清除劑對(duì)563 nm處DPCO 的吸光度的影響Fig.7(a)Absorption spectra of the generated DPCO of DPCIDMCU mixed solutions in the presence of different ROS scavengers and 3 hours of ultrasonic irradiation and(b)the effects of the different ROS scavengers on the absorbance of DPCO at 563 nm

4 結(jié) 論

本文以DAPI為熒光探針，利用熒光光譜技術(shù)研究了 4,4-雙甲基姜黃素(DMCU)存在條件下超聲波照射對(duì)DNA的損傷，考察了藥物濃度對(duì)DNA損傷程度的影響，并對(duì)相關(guān)機(jī)制進(jìn)行了初步探索。結(jié)果表明，超聲結(jié)合DMCU產(chǎn)生的協(xié)同效應(yīng)對(duì)DNA損傷的程度比單純 DMCU和單純超聲都要大。聲化學(xué)機(jī)制研究表明，超聲與 DMCU協(xié)同作用過程中種類為羥基自由基的活性氧的產(chǎn)生與超聲介導(dǎo)DMCU的降解相關(guān)。本論文的研究結(jié)果一方面嘗試為天然活性產(chǎn)物的藥物化學(xué)研究結(jié)果開辟新的應(yīng)用領(lǐng)域，另一方面希望為新型聲敏劑的篩選和開發(fā)提供理論依據(jù)和實(shí)踐基礎(chǔ)。