葉立新 黃銳華 莫潤(rùn)旺 謝彩連 蔡小娟

【摘要】 目的：了解東莞地區(qū)出生人群葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）缺乏癥發(fā)生率及其基因突變情況。方法：選擇2016年9月1日-2019年12月31日東莞市送檢的新生兒疾病篩查標(biāo)本，共432 820例，其中男232 254例，女200 566例，出生后72 h采集足跟血制作成干血斑，采用熒光定量法進(jìn)行G6PD缺乏癥篩查，對(duì)篩查陽(yáng)性者召回采集靜脈血采用G6PD/6PGD比值法進(jìn)行確診，對(duì)部分確診者采用熒光定量PCR多色熔解曲線法（MMCA）進(jìn)行G6PD基因突變分析。結(jié)果：東莞地區(qū)新生兒G6PD缺乏癥篩查總體陽(yáng)性率為3.60%（15 588/432 820），其中男、女陽(yáng)性率分別為5.06%（11 750/232 254）和1.91%（3 838/200 566），兩者篩查陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=3 067.24，P<0.001）;本市戶籍、本省戶籍、外省戶籍新生兒篩查陽(yáng)性率分別為3.50%（4 684/133 719）、5.79%（5 303/91 553）、2.70%（5 601/207 548），本市戶籍新生兒篩查陽(yáng)性率與本省戶籍、外省戶籍比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=672.31、179.95，P<0.001）。篩查陽(yáng)性新生兒召回7 044例，召回率45.19%，確診5 907例，確診符合率83.86%，推算東莞地區(qū)新生兒G6PD缺乏癥總體發(fā)生率為3.02%;男女的確診符合率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=1 164.83，P<0.001）。219例確診G6PD缺乏癥新生兒中，檢測(cè)出基因突變216例，共檢出10種突變類型：67例（31.02%）c.1376G>T、67例（31.02%）c.1388G>A、26例（12.04%）c.871G>A、25例（11.57%）c.95A>G、7例（3.24%）c.1024C>T、7例（3.24%）c.392G>T、3例（1.39%）c.517T>C、2例（0.93%）c.1004C>A、1例（0.46%）c.1360C>T、1例（0.46%）c.592C>T和7種復(fù)合突變。結(jié)論：東莞地區(qū)是G6PD缺乏癥的高發(fā)區(qū)，最常見(jiàn)的三種基因突變類型為c.1376G>T、c.1388G>A、c.871G>A，積極扎實(shí)開(kāi)展新生兒G6PD缺乏癥篩查具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】 葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥 新生兒疾病篩查 多色熔解曲線法 基因突變

[Abstract] Objective： To investigate the incidence of G6PD deficiency and its gene mutation in the population born in Dongguan. Method： Choice on September 1， 2016 to December 31， 2019， the city makes the newborn screening specimens， a total of 432 820 cases， including male 232 254， female 200 566， 72 h after birth to collect heel blood into dried blood spots， using the fluorescent quantitative method for screening G6PD deficiency， for screening positive recall venous blood was collected， using G6PD/6PGD ratio method to carry on the diagnosis， for part of those Diagnosed G6PD gene mutation were analyzed by fluorescence quantitative PCR multicolor melting curve assay （MMCA）. Result： This study showed that the overall positive rate of screening for G6PD deficiency in newborns in dongguan was 3.60% （15 588/432 820）， and the positive rates of male and female were 5.06%?（11 750/232 254） and 1.91% （3 838/200 566）， respectively， the difference between the two screening positive rate was statistically significant （字2=3 067.24， P<0.001）; the positive screening rate of newborns with the citys household registration， provincial household registration and non provincial household registration was 3.50% （4 684/133 719）， 5.79% （5 303/91 553） and 2.70% （5 601/207 548）， respectively， the positive rate of newborn screening in this city was statistically significant compared with that in this province and other provinces （字2=672.31， 179.95， P<0.001）. There were 7 044 cases of recall of positive newborns after screening， with a recall rate of 45.19%，?5 907 cases confirmed， and a confirmed compliance rate of 83.86%， the overall incidence of G6PD deficiency among newborns in Dongguan was calculated to be 3.02%; there was a significant difference in the confirmed compliance rate between men and women （字2=1 164.83， P<0.001）. Among the 219 newborns diagnosed with G6PD deficiency， 216 were detected with gene mutations， and a total of 10 mutation types were detected： 67 cases （31.02%） of c.1376G>T， 67 cases （31.02%） of c.1388G>A， 26 cases （12.04%） of c.871G>A， 25 cases （11.57%） of c.95A>G， 7 cases （3.24%） of c.1024G>T， 7 cases （3.24%） of c.392G>T， 3 cases （1.39%） of c.517G> c， 2 cases （0.93%） of c.1004C >T， 1 case （0.46%） of c.1360C >T， 1 case （0.46%） of c.592C>T and 7 compound mutations. Conclusion： Dongguan area is a high incidence area of G6PD deficiency， and the three most common gene mutations are c.1376G>T， c.1388G>A， and c.871G>A， it is of great significance to actively and effectively carry out screening for G6PD deficiency in newborns.

2.3 219例G6PD缺乏癥確診陽(yáng)性新生兒基因突變分析 219例確診G6PD缺乏癥新生兒中，檢測(cè)出基因突變216例，共檢出10種突變類型：67例c.1376G>T、67例c.1388G>A、26例c.871G>A（25例c.95A>G、7例c.1024C>T、7例c.392G>T、3例c.517T>C、2例c.1004C>A、1例c.1360C>T、1例c.592C>T和7種復(fù)合突變，見(jiàn)表4。

3 討論

G6PD缺乏癥是目前全球人類最常見(jiàn)的遺傳性酶缺陷病，在全球主要分布在非洲、拉丁美洲、地中海沿岸及東南亞地區(qū);在中國(guó)呈“南高北低”分布，主要在云南、廣西、海南、廣東、貴州、四川等南方地區(qū)高發(fā)[4-5]。據(jù)文獻(xiàn)[6-7]報(bào)道，廣西地區(qū)新生兒G6PD缺乏癥篩查陽(yáng)性率為7.36%，廣西戶籍新生兒G6PD缺乏癥篩查陽(yáng)性率為8.37%;云南10個(gè)民族G6PD缺乏癥篩查陽(yáng)性率為0～8.6%[8];海南省新生兒G6PD缺乏癥篩查陽(yáng)性率為3.17%，確診陽(yáng)性率為1.46%[9];1988年，杜傳書(shū)教授首次報(bào)告廣東地區(qū)人群G6PD缺乏癥發(fā)病率為4.2%[10];廣東省內(nèi)多個(gè)地區(qū)人群G6PD缺乏癥篩查陽(yáng)性率也有相繼報(bào)道，江門(mén)地區(qū)4.14%、廣州4.60%、中山3.6%、梅州5.18%、河源7.371%、珠海3.2%[11-16]。本研究數(shù)據(jù)顯示，本地區(qū)新生兒G6PD缺乏癥篩查陽(yáng)性率為3.60%，根據(jù)確診符合率推算確診發(fā)生率為3.02%，低于全省平均水平，但與筆者前期文獻(xiàn)[17]研究數(shù)據(jù)對(duì)比顯示，本地區(qū)出生人群G6PD缺乏癥發(fā)生率有所上升，可能與本地區(qū)人口結(jié)構(gòu)變化及不同地區(qū)戶籍人群間婚配生育有關(guān);同時(shí)，本次研究樣本基數(shù)大，應(yīng)該更能客觀反映本地區(qū)新生兒G6PD缺乏癥發(fā)生率情況。按戶籍分類統(tǒng)計(jì)分析，本市戶籍新生兒G6PD缺乏癥篩查陽(yáng)性率低于本省戶籍新生兒，但高于省外戶籍新生兒，說(shuō)明G6PD缺乏癥在本地區(qū)也屬于高發(fā)區(qū)，符合世界衛(wèi)生組織（WHO）建議在男性患病率>3%～5%的地區(qū)應(yīng)常規(guī)開(kāi)展G6PD缺乏癥的產(chǎn)前健康教育及新生兒篩查[3]。

G6PD缺乏癥屬于X連鎖不完全顯性遺傳病，由于男性只有1條X染色體而女性有2條X染色體，因此，在基因缺陷上，男性患者只存在半合子形式，女性患者則存在雜合子與純合子兩種形式。男性半合子與女性純合子常出現(xiàn)比較嚴(yán)重的酶缺陷而容易被檢出。而女性雜合子，存在缺陷的G6PD基因既可以在失活的X染色體上，也可以在非失活的X染色體上，致使其體內(nèi)同時(shí)存在G6PD缺乏紅細(xì)胞和正常紅細(xì)胞但非平均分布。不同女性雜合子患者體內(nèi)G6PD缺乏紅細(xì)胞和正常紅細(xì)胞比例不同，決定其G6PD活性具有異質(zhì)性，酶活性即可表現(xiàn)正常、中度缺乏或顯著缺乏。因此，女性雜合子難以單純根據(jù)酶活性進(jìn)行準(zhǔn)確診斷[18-19]。李磊等[20]研究顯示，采用酶活性檢測(cè)的方法，對(duì)攜帶G6PD基因突變的女性，漏檢率達(dá)70.2%，漏檢均為單一G6PD基因雜合突變。這可能也是G6PD缺乏癥篩查陽(yáng)性率女性顯著低于男性的一個(gè)重要原因。因此，采用酶活性檢測(cè)聯(lián)合基因突變檢測(cè)的方式，更有利于女性雜合子的檢出。

目前，全世界已報(bào)道180多種G6PD基因突變類型[21]，在我國(guó)人群中發(fā)現(xiàn)的突變有33種，其中最常見(jiàn)的突變類型為c.1388G>A、c.1376G>T、c.95A>G[18]。本文219例確診G6PD缺乏癥新生兒中，檢測(cè)出基因突變216例，共檢出10種突變類型和7種復(fù)合突變，占比最大的前三種突變類型為c.1376G>T、c.1388G>A、c.871G>A，c.95A>G為第四位，基本與文獻(xiàn)[22]報(bào)道相一致。由于條件限制，其余3例基因突變檢測(cè)陰性者未能做進(jìn)一步測(cè)序以確定是否存在其他基因突變類型。

G6PD缺乏的早期新生兒高膽紅素血癥發(fā)病率高、發(fā)病早、程度重，可引起核黃疸[23]，如處理不及時(shí)可造成智力低下甚至致死。目前，對(duì)G6PD缺乏尚無(wú)根治辦法，臨床上僅對(duì)癥治療。因此，進(jìn)行新生兒G6PD篩查非常必要，對(duì)篩查出G6PD缺乏的新生兒家長(zhǎng)進(jìn)行健康教育，告知其避免讓新生兒接觸特殊藥品、食品，防止溶血的發(fā)生;同時(shí)，可對(duì)G6PD缺乏新生兒生理性黃疸期納入高危兒管理，有效預(yù)防高膽紅素血癥、核黃疸和神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥的發(fā)生、提高人口素質(zhì)。

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（收稿日期：2020-04-03） （本文編輯：張爽）