周敏 邱粵勇 鄭燕賢

【摘要】 目的：探討肺結(jié)核患者血液和胸腔積液IL-35的表達(dá)情況。方法：選取2017年10月-2019年10月于筆者所在醫(yī)院治療的肺結(jié)核患者60例作為研究組，60例健康患者作為對照組，對比患者和健康志愿者IL-35表達(dá)水平的差異。結(jié)果：研究組治療1個月后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較治療前下降明顯（P<0.05）;研究組治療前與治療后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較對照組更高（P<0.05）;研究組中性粒細(xì)胞絕對值和百分比較對照組高（P<0.05）。結(jié)論：肺結(jié)核患者較健康者的胸腔積液及血液IL-35表達(dá)水平升高，治療后表達(dá)水平顯著下降，具有診斷參考意義。

【關(guān)鍵詞】 肺結(jié)核 血液 胸腔積液 IL-35

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2020.25.025 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2020）25-00-03

[Abstract] Objective： To explore the expression of blood and pleural effusion IL-35 in tuberculosis patients. Method： A total of 60 cases of tuberculosis patients treated in our hospital from October 2017 to October 2019 were selected as study groups， and 60 healthy patients were used as a control group， compared the differences in the expression levels of IL-35 in patients and health volunteers. Result： The level of IL-35 expression of peripheral blood and chest cavity fluid decreased significantly compared to pre-treatment （P< 0.05）; after 1 month of treatment in the study group， and the IL-35 expression level of peripheral blood and chest fluid before and after treatment was higher than that of the control group （P<0.05）; and the absolute value and the percentage of the neutrophils cells of the study group were higher than those of the control group （P<0.05）. Conclusion： The level of IL-35 in pleural effusion and blood of patients with pulmonary tuberculosis is higher than that of healthy patients， and the expression level after treatment decreases significantly， which is of diagnostic reference significance.

[Key words] Tuberculosis Blood Pleural effusion IL-35

First-authors address： Huidong County Peoples Hospital， Huidong 516300， China

肺結(jié)核是呼吸道的一種慢性疾病，同時也是我國國內(nèi)進(jìn)行重點(diǎn)防治的具有強(qiáng)烈傳染性的疾病之一[1]。該疾病大多是由結(jié)核桿菌引發(fā)，并與患者的變態(tài)反應(yīng)及免疫力的具有密切的聯(lián)系[2]。IL-35是一種負(fù)向免疫調(diào)節(jié)因子，屬于少數(shù)幾種具有抑制免疫活性的信號分子之一，主要發(fā)揮免疫抑制和抗炎作用[3]。本研究主要通過研究受試者血液及胸腔積液中IL-35的具體表達(dá)情況，探討IL-35在肺結(jié)核免疫抑制調(diào)節(jié)中的意義，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年10月-2019年10月于筆者所在醫(yī)院治療的肺結(jié)核患者60例作為研究組，60例健康患者作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：均符合《WS-288-2008肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)》中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[4];經(jīng)CT、X線、病理檢查確診為肺結(jié)核患者;無免疫及免疫相關(guān)疾病;既往5個月未服用免疫抑制劑或激素者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并心、肝腎等重大臟器疾病者;存在意識或精神障礙不能與患者取得良好配合者。研究組男31例，女29例;年齡35～88歲，平均（47.3±3.2）歲。對照組男30例，女30例;年齡35～87歲，平均（46.3±3.4）歲。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。患者及其家屬均同意本研究進(jìn)行，醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)研究實(shí)施。

1.2 方法

肺結(jié)核患者入院后常規(guī)進(jìn)行抗結(jié)核治療，若患者肝功能出現(xiàn)異常，需將抗結(jié)核治療暫時停止，增加護(hù)肝治療。

血液檢測方法：兩組患者均于入院后的24 h以內(nèi)于患者空腹?fàn)顟B(tài)下抽取患者2 ml肘靜脈血仔細(xì)置于血常規(guī)管內(nèi)，肝素抗凝，靜置5 min，控制溫度為4 ℃，以2 500 r/min的速度進(jìn)行離心，離心時間為10 min，研究組治療1個月后重復(fù)以上步驟。

采用上海酶聯(lián)生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒及Biotek有限公司生產(chǎn)的酶標(biāo)儀進(jìn)行，操作步驟參照試劑盒所標(biāo)注的內(nèi)容嚴(yán)格進(jìn)行，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

采用SysmexXT-1800i全自動血球分析以對患者治療后外周血淋巴細(xì)胞百分比及中性粒細(xì)胞水平進(jìn)行檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)應(yīng)用Graphpad prism 5.0進(jìn)行分析，其中計數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后IL-35表達(dá)水平對比

研究組治療1個月后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較治療前下降明顯（P<0.05）;研究組治療前與治療后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較對照組更高（P<0.05），見表1。

2.2 兩組中性粒細(xì)胞絕對值及其百分比對比

治療后研究組中性粒細(xì)胞絕對值和百分比較對照組高（P<0.05），見表2。

3 討論

研究指出，人感染結(jié)核菌后不一定發(fā)病，當(dāng)機(jī)體抵抗力低或細(xì)胞介導(dǎo)的變態(tài)反應(yīng)增高時，才能引起臨床發(fā)病[5]。有研究報道感染MTB（結(jié)核分枝桿菌）后，Th1型免疫反應(yīng)被抑制，或者Th2反應(yīng)性增加，Th1/Th2失衡，最終導(dǎo)致結(jié)核病;但隨著病情的好轉(zhuǎn)呈現(xiàn)逐漸降低趨勢，且不同轉(zhuǎn)歸的患者體內(nèi)各種細(xì)胞因子的變化趨勢不同，Th1/Th2的失衡可能是影響結(jié)核病發(fā)病和轉(zhuǎn)歸的一個重要因素[6]。機(jī)體Th1、Th2平衡失調(diào)，與腫瘤免疫逃逸、細(xì)菌、病毒等微生物感染有一定的關(guān)系，并參與變態(tài)反應(yīng)性疾病，自身免疫性疾病和移植排斥反應(yīng)的發(fā)生。與傳統(tǒng)的臨床檢驗(yàn)項目不同，檢測Th1、Th2相關(guān)因子的意義，并不著重于輔助疾病的診斷，而更注意分析疾病發(fā)生發(fā)展的狀況，為臨床調(diào)整Th1、Th2失衡提供正確的治療措施，在抗結(jié)核的免疫反應(yīng)中不同細(xì)胞因子呈現(xiàn)出不同的變化趨勢。Th1型和Th2型細(xì)胞因子在肺結(jié)核活動期處于高水平狀態(tài)。但隨著病情的好轉(zhuǎn)呈現(xiàn)逐漸降低趨勢且不同轉(zhuǎn)歸的患者體內(nèi)各種細(xì)胞因子的變化趨勢不同[7]。因此，Th1型、Th2型免疫水平過低或者Th1/Th2的失衡可能是影響結(jié)核病發(fā)病和轉(zhuǎn)歸的一個重要因素。許多免疫治療的目的是提高Th1的免疫反應(yīng)水平，維持Th1/Th2的再平衡[8]。

本文研究的IL-35是一種負(fù)向免疫調(diào)節(jié)因子，在抑制效應(yīng)T細(xì)胞增殖、Th17細(xì)胞分化和IL-17的合成中發(fā)揮作用，IL-35在抑制效應(yīng)T細(xì)胞增殖、Th17細(xì)胞分化和IL-17的合成、維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境免疫平衡和免疫性/炎癥性疾病發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用[9]。因此，檢測肺結(jié)核患者IL-35的表達(dá)水平，可能對觀察肺結(jié)核患者的免疫狀態(tài)有幫助，實(shí)現(xiàn)Th1/Th2的再平衡。同時IL-35是由調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）分泌的具有抗炎和免疫抑制作用的細(xì)胞因子，并且在多種免疫相關(guān)疾病中起到關(guān)鍵的作用[10]。IL-35生物學(xué)作用不同于IL-12家族的其他成員，它可以增加調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）的抑制能力，屬于少數(shù)幾種具有抑制免疫活性的信號分子之一，主要發(fā)揮免疫抑制和抗炎作用[11]。B細(xì)胞可通過提供IL-35限制EAE發(fā)病，從EAE恢復(fù)需要B細(xì)胞的IL-35表達(dá)，B細(xì)胞可以通過產(chǎn)生IL-35抑制抗微生物免疫，IL-35是T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑[12]。在結(jié)核病的潛伏期、發(fā)病、治療及轉(zhuǎn)歸的過程中，Th1、Th2、Th17和Treg型免疫細(xì)胞和因子均參與反應(yīng)，細(xì)胞因子的變化趨勢在不同的結(jié)核病患者中顯著不同[13]。

本研究數(shù)據(jù)顯示，研究組治療1個月后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較治療前下降明顯（P<0.05）;研究組治療前與治療后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較對照組更高（P<0.05），提示肺結(jié)核患者胸腔積液及外周血中IL-35表達(dá)水平較正常人明顯升高，臨床檢查中可參照患者IL-35水平來判斷患者是否患有肺結(jié)核;研究組中性粒細(xì)胞絕對值和百分比較對照組升高（P<0.05），提示肺結(jié)核患者對于病原菌所致的炎性反應(yīng)具有較大的反應(yīng)度，機(jī)體難以對炎癥反應(yīng)進(jìn)行有效控制。

本研究對前期收集的符合本研究觀察條件的病例按研究方案的要求進(jìn)行血液和胸腔積液IL-35的檢測發(fā)現(xiàn)其在不同的結(jié)核病患者及不同的治療療程中的表達(dá)和變化趨勢有所不同，關(guān)于IL-35在肺結(jié)核患者血液和胸腔積液的表達(dá)，尚需進(jìn)行更進(jìn)一步的研究。

綜上所述，肺結(jié)核患者相較于健康患者來說，胸腔積液及血液IL-35表達(dá)水平出現(xiàn)升高，治療后表達(dá)水平顯著下降，具有診斷輔助參考意義。

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（收稿日期：2020-06-29） （本文編輯：郎序瑩）