謝斌 袁樂(lè)東 楊彩云

【摘要】 目的：探討血清IL-18、IL-33及FeNO與兒童支原體肺炎的相關(guān)性。方法：選取2017年6月-2019年3月本院收治的肺炎兒童127例，根據(jù)肺炎支原體（MP）抗體水平分為MPP組70例和非MPP組57例，另選取同期健康體檢兒童60例為對(duì)照組。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定血清IL-18和IL-33水平，F(xiàn)eNO檢測(cè)儀測(cè)定FeNO水平及肺功能檢測(cè)儀測(cè)定用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼氣容積（FEV1）、用力呼氣流量25%、50%及75%（MEF25%、MEF50%、MEF75%）。觀察比較三組肺功能指標(biāo)，分析血清IL-18、IL-33及FeNO水平和FeNO與IL-18、IL-33相關(guān)性。結(jié)果：三組各肺功能指標(biāo)相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;MPP組各指標(biāo)均低于非MPP組和對(duì)照組，且非MPP組均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。三組血清IL-18、IL-33和FeNO水平相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;且MPP組各指標(biāo)均高于非MPP組與對(duì)照組，非MPP組各指標(biāo)均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。MP患兒FeNO與血清IL-18和IL-33均呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：血清IL-18、IL-33及FeNO均在MPP患者中明顯升高，對(duì)臨床鑒別診斷MPP具有一定診斷價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 兒童支原體肺炎 白介素-18 白介素-33 呼氣一氧化氮

[Abstract] Objective： To investigate the correlation between serum IL-18， IL-33， FeNO and mycoplasma pneumonia in children. Method： A total of 127 children with pneumonia admitted to our hospital from June 2017 to March 2019 were divided into MPP group （n=70） and non-MPP group （n=57） according to the level of MP antibody， another 60 healthy children in the same period were selected as the control group. Serum levels of IL-18 and IL-33 were measured by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. FeNO level were measured by FeNO detector. Forced vital capacity （FVC）， forced expiratory volume （FEV1）， forced expiratory volume 25%， 50% and 75% （MEF25%， MEF50%， MEF75%） were measured by FeNO detector. The pulmonary function indexes， serum levels of IL-18， IL-33 and FeNO， and the correlation between FeNO and IL-18， IL-33 were observed and compared. Result： Compared with the lung function indexes among three groups， the differences were statistically significant （P<0.05）. The indexes of MPP group were lower than those of non-MPP group and the control group， and non-MPP group were lower than those of the control group， and the differences were statistically significant Significance （P<0.05）. Compared with the serum levels of IL-18， IL-33 and FeNO among three groups， the differences were statistically significant （P<0.05）; and the indexes of MPP group were higher than those of non-MPP group and the control group， and the indexes of non-MPP group were all higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. FeNO in children with MP was positively correlated with serum IL-18 and IL-33 （P<0.05）. Conclusion： Serum levels of IL-18， IL-33 and FeNO in MPP patients are significantly increased， which has certain diagnostic value for clinical differential diagnosis of MPP.

[Key words] Mycoplasma pneumonia in children Interleukin-18 Interleukin-33 Fractional exhaled nitric oxide

First-authors address： The Second Peoples Hospital of Nankang District in Ganzhou City， Ganzhou 341411， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.27.013

肺炎支原體（mycoplasma pneumonia，MP）是一種學(xué)齡兒童常見(jiàn)的下呼吸道感染的病原體，近年來(lái)，肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）在5歲以下兒童的報(bào)道逐漸增多，且多數(shù)預(yù)后較好，少數(shù)可能存在肺結(jié)核和/或肺功能損害，目前，關(guān)于MP感染所導(dǎo)致的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，但誘發(fā)MPP發(fā)病的重要機(jī)制之一是MP感染引起的機(jī)體炎癥反應(yīng)[1-2]。有研究表明，部分MPP患者在急性期或恢復(fù)期內(nèi)出現(xiàn)反復(fù)遷延或長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)的喘息癥狀，增加臨床治療的難度[3-4]。呼氣一氧化氮（FeNO）是近年來(lái)應(yīng)用于評(píng)估喘息性疾病的重要指標(biāo)之一，亦與呼吸道發(fā)生炎性反應(yīng)程度有關(guān)，常被臨床用于評(píng)估氣道炎癥反應(yīng)情況[5]。白介素是臨床上較為常見(jiàn)的炎癥因子，且參與了支原體肺炎的發(fā)病及進(jìn)展，逐漸引起重視[6-7]。因此，本研究分析血清IL-18、IL-33和FeNO水平在肺炎患兒及支原體肺炎兒童的表達(dá)，了解血清IL-18、IL-33和FeNO與兒童支原體肺炎的相關(guān)性?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年6月-2019年3月本院收治的肺炎兒童127例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：入組患兒均符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》中關(guān)于社區(qū)獲得性肺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn);年齡3～12歲;積極配合相關(guān)檢查項(xiàng)目;MP-IgM抗體滴度超過(guò)1/160。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有喘息、哮喘病史、免疫系統(tǒng)病史;近期有應(yīng)用糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等藥物;合并精神障礙;嚴(yán)重心、肝、肺及腎疾病;依從性較差或中途轉(zhuǎn)院或退出。根據(jù)患兒血清MP-IgM抗體檢測(cè)結(jié)果，將其分為MPP組70例和非MPP組57例，另選取同期健康體檢兒童60例為對(duì)照組。本研究已上報(bào)醫(yī)院倫理委員會(huì)并獲批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 肺功能指標(biāo)檢測(cè) 采用德國(guó)GANSHORM power cube-body肺功能檢測(cè)儀對(duì)患兒進(jìn)行肺功能檢查，取直立體位，并保持頭部自然水平，調(diào)整口含嘴并將其咬住，以不漏氣為宜，同時(shí)佩戴鼻夾，用力深吸氣，使肺內(nèi)氣體迅速達(dá)到肺總量位，隨后以最大能力和最快速度吸氣，達(dá)到功能殘氣量位，觀察流量-容積曲線和時(shí)間-容積曲線，每位患兒至少重復(fù)上述操作6次，選取其中最佳3次數(shù)據(jù)，取其平均值。記錄用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼氣容積（FEV1）、用力呼氣流量25%、50%及75%（MEF25%、MEF50%、MEF75%）。

1.2.2 血清檢測(cè) 采集所有受檢者清晨空腹肘部淺靜脈血5 mL，以3 000 r/min離心，離心10 min，分離血清并置于-20 ℃冰箱待用，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定血清IL-18和IL-33水平，試劑盒均購(gòu)于上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.2.3 FeNO檢測(cè) 采用瑞典NIOX FeNO檢測(cè)儀測(cè)定患兒FeNO水平，取受檢兒童直立體位，并保持頭部自然水平，用力深呼氣將肺部氣體盡量排出，隨后立即將過(guò)濾裝置含嘴里，用力吸氣[不含一氧化氮（NO）]使氣體充滿肺部，然后緩慢將肺部氣體呼出，使呼氣流速維持在50 mL/s，氣流穩(wěn)定平臺(tái)期不低于6 s，獲取FeNO值，單位為ppb。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察三組受檢兒童肺功能指標(biāo)，血清IL-18和IL33水平變化，F(xiàn)eNO水平，同時(shí)分析FeNO與血清IL-18和IL-33的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 20.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn);相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般資料比較 MPP組，男44例，女26例，平均年齡（6.35±1.23）歲。非MPP組，男36例，女21例，平均年齡（6.18±1.47）歲。對(duì)照組，男39例，女21例，平均年齡（6.08±1.19）歲。三組性別、年齡等一般資料相比，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 三組肺功能指標(biāo)對(duì)比 三組各肺功能指標(biāo)相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;MPP組各指標(biāo)均低于非MPP組和對(duì)照組，且非MPP組均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.3 三組血清IL-18和IL-33水平對(duì)比 三組血清IL-18和IL-33水平相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;且MPP組各指標(biāo)均高于非MPP組與對(duì)照組，非MPP組各指標(biāo)均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.4 三組FeNO水平對(duì)比 MPP組FeNO水平為（28.57±6.03）ppb，非MPP組為（25.76±5.76）ppb，對(duì)照組為（14.36±3.84）ppb，三組FeNO水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=124.39，P<0.05）;MPP組FeNO水平高于非MPP組與對(duì)照組，非MPP組FeNO水平高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.5 MP患者FeNO與血清IL-18和IL-33相關(guān)性分析 MP患者FeNO與血清IL-18和IL-33均呈正相關(guān)（P<0.05），見(jiàn)表3。

3 討論

肺炎支原體感染是兒童呼吸道感染中較為常見(jiàn)的疾病，是導(dǎo)致兒童發(fā)生肺炎的關(guān)鍵病原體，肺炎支原體肺炎的發(fā)生率位居非典型肺炎首位，流行病學(xué)調(diào)查顯示肺炎支原體感染所致的肺炎約占感染性肺炎的1/3[8]。肺功能檢查是目前用于反映肺疾病嚴(yán)重程度及療效的指標(biāo)之一，也是衡量肺炎病情變化的重要方法之一[9]。肺炎支原體感染引起的肺炎，其臨床特征具有反復(fù)性，病情遷延的特點(diǎn)，支原體反復(fù)感染可提升氣道的反應(yīng)性，加重肺炎病情或呼吸道長(zhǎng)期受支原體感染的反復(fù)刺激引起氣道炎癥反應(yīng)，促使氣道進(jìn)一步狹窄[10-11]。氣道痙攣、損傷是肺炎支原體肺炎急性期的主要臨床表現(xiàn)，小氣道功能降低是恢復(fù)期的主要表現(xiàn)，故而，不同期的肺炎支原體肺炎均存在不同程度的呼吸道功能損傷[12]。本研究顯示，三組各肺功能指標(biāo)相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;MPP組各指標(biāo)均低于非MPP組和對(duì)照組，且非MPP組均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。說(shuō)明肺部感染后可使患兒肺功能降低，且肺炎支原體感染后對(duì)患兒肺功能損傷程度大于非MPP患兒。

NO作為人體內(nèi)源性重要調(diào)控分子之一，可由一氧化氮合成酶將L-精氨酸在氣道炎性細(xì)胞或固有細(xì)胞中合成，并以自由擴(kuò)散的方式將NO透過(guò)細(xì)胞壁膜運(yùn)輸至鄰近細(xì)胞，并發(fā)揮作用。NO最初在臨床上作為血管平滑肌松弛劑被應(yīng)用，但1993年國(guó)外學(xué)者首次發(fā)現(xiàn)氣道炎癥與FeNO有關(guān)，隨著FeNO濃度的升高，患者氣道炎癥反應(yīng)程度加重，接受抗感染治療或氣道炎癥反應(yīng)改善后，F(xiàn)eNO濃度可迅速降低。FeNO濃度與支氣管反應(yīng)性、特異性變態(tài)反應(yīng)有關(guān)聯(lián)性，且同氣道嗜酸性粒細(xì)胞的水平相近。FeNO是目前臨床上一種操作簡(jiǎn)單的無(wú)創(chuàng)檢查氣道炎癥反應(yīng)的指標(biāo)，被廣泛應(yīng)用于評(píng)估氣道炎癥反應(yīng)[13]。本研究結(jié)果顯示，三組FeNO水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=124.39，P<0.05）;MPP組FeNO水平高于非MPP組與對(duì)照組，非MPP組FeNO水平高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。說(shuō)明肺炎患兒FeNO明顯升高，且MPP患兒FeNO升高更明顯。

IL-18主要由單核-巨噬細(xì)胞或外樹(shù)突狀細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，參與氣道炎癥及氣道的高反應(yīng)性的發(fā)生過(guò)程。肺炎發(fā)病過(guò)程中可對(duì)Th細(xì)胞促進(jìn)分化，并誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞分泌干擾素[14]。有研究表明，IL-18在呼吸道感染性疾病人群的水平明顯高于健康人群，提示IL-18參與了呼吸道感染性疾病的發(fā)生及發(fā)展[15]。IL-33/ST2信號(hào)通路在病原微生物入侵機(jī)體并誘導(dǎo)免疫應(yīng)答過(guò)程中起重要作用，可促進(jìn)多種細(xì)胞表達(dá)并分泌IL-33，IL-33可結(jié)合于ST2受體，從而啟動(dòng)Th2細(xì)胞的免疫反應(yīng)[16]。本研究結(jié)果顯示，三組血清IL-18和IL-33水平相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;且MPP組各指標(biāo)均高于非MPP組與對(duì)照組，非MPP組各指標(biāo)均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。說(shuō)明肺炎患兒血清IL-18和IL-33均明顯升高，且MPP患兒升高更明顯，即MP感染引起氣道炎癥反應(yīng)程度高于其他病原體引起的肺炎。

綜上所述，兒童支原體肺炎患者血清IL-18、IL-33及FeNO水平均高于非MPP患兒和健康兒童，且FeNO與血清IL-18、IL-33均呈正相關(guān)，可作為臨床鑒別診斷MPP的參考指標(biāo)。

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（收稿日期：2020-03-03） （本文編輯：程旭然）