■張 鑫 封偉杰 王玉璘 丁 毅 郭耀棋

(遼寧禾豐牧業(yè)股份有限公司，遼寧沈陽110866）

近年來，抗生素的過量使用和濫用，導(dǎo)致抗生素在動物體內(nèi)、畜產(chǎn)品中殘留，產(chǎn)生抗藥性，對動物和人類健康造成危害。2020 年飼料中將全面禁止抗生素的使用，尋找抗生素替代物迫在眉睫。并且我國蛋白資源短缺，充分利用工業(yè)廢棄物的飼用價值，能緩解環(huán)境污染和飼料資源緊缺，對畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展起到重要的作用。近年來研究表明，酵母培養(yǎng)物在豬、家禽和反芻動物都有積極的效果[1-3]。釀酒酵母發(fā)酵白酒糟是以鮮白酒糟為基質(zhì)，經(jīng)釀酒酵母固態(tài)發(fā)酵、培養(yǎng)增殖并自溶后，經(jīng)低溫干燥、粉碎、包裝等工序制成的一種新型的酵母培養(yǎng)物，在蛋雞上的應(yīng)用研究少有報道。本試驗旨在研究不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、糞便菌群微生物的影響，確定最適添加量，為釀酒酵母發(fā)酵白酒糟在蛋雞上的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗用釀酒酵母發(fā)酵白酒糟由路德生物環(huán)保技術(shù)（古藺）有限公司提供，主要是酵母胞外代謝產(chǎn)物、酵母自溶破壁的內(nèi)容物、有益菌、酵母細胞壁多糖、發(fā)酵培養(yǎng)基等，實測值容重717 g/l，水分9.70%，粗蛋白23.03%，粗脂肪7.30%，粗灰分8.90%，粗纖維13.30%。

1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

選取體重接近，健康狀態(tài)良好的419日齡海蘭褐蛋雞864 只，隨機分成3 組，每組6 個重復(fù)，每個重復(fù)48只。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，其參照海蘭褐蛋雞產(chǎn)蛋期營養(yǎng)需要配制配合飼料，2個試驗組分別添加1%和2%釀酒酵母發(fā)酵白酒糟，試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗前預(yù)飼期2周，正式試驗期8周，試驗雞自由采食，自由飲水，試驗期間按照常規(guī)操作進行管理。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 檢測指標(biāo)

1.3.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)

每天記錄產(chǎn)蛋枚數(shù)、破蛋數(shù)、雞只數(shù)，以重復(fù)為單位稱量雞蛋重量。

產(chǎn)蛋率（%）=產(chǎn)蛋數(shù)/雞只數(shù)×100

平均蛋重（g）=總蛋重/產(chǎn)蛋數(shù)

產(chǎn)蛋量[g/(只·d)]=每天每個重復(fù)總蛋重/雞只數(shù)

每個重復(fù)選擇12只雞，每組84只雞稱重，稱量初始體重和結(jié)束體重，在試驗開始前1 d 和試驗結(jié)束當(dāng)天16：00～17：00 進行，初始重保證試驗雞體重在平均值的±10%以內(nèi)。

1.3.2 蛋殼顏色評分

在試驗15、30、50 d 每個重復(fù)評定20 枚雞蛋，每組120 枚雞蛋。采用海蘭褐手冊蛋殼顏色評分標(biāo)準110、100、90、80 分和70 分，顏色從深到淺5 個等級。

1.3.3 蛋品質(zhì)檢測

在試驗50 d 每個重復(fù)隨機取20 枚雞蛋，進行蛋品質(zhì)檢測。ETG-1061 蛋殼厚度檢測儀檢測蛋殼厚度，F(xiàn)ESTV2.0 蛋殼強度計檢測蛋殼強度，EMT-7300多功能蛋品分析儀檢測哈夫單位、卵白高度、卵黃顏色，隨后分離卵黃并稱重。

卵黃比例(%)=卵黃重/蛋重×100

1.3.4 糞便狀態(tài)評價

試驗第7、14、21、28、45 d 觀察糞便成型狀態(tài)，每個重復(fù)用接糞板收集糞便，觀察5 個點，四個角和中間，每個觀察點界定20 cm×20 cm 的區(qū)域，對新鮮糞便進行評分。對小腸糞便評分，盲腸糞便不評分，評分標(biāo)準采用4 分制。1 分為硬質(zhì)糞便，糞便可以拿起在手中滾動；2分為糞便成型，但糞便里面是潮濕狀；3分為稀糞；4分為水樣便。

1.3.5 糞便菌群微生物

在試驗58 d放置收糞板，每個重復(fù)隨機收集新鮮糞便，裝入無菌自封袋密封，立即放入冷藏箱運送到實驗室-40 ℃保存，并盡快檢測。每個樣品取3 個平行樣，各3 g，混勻懸浮于無菌稀釋液中，10 倍梯度稀釋至適宜濃度后，取0.1 ml稀釋樣液和培養(yǎng)基加入平板，37 ℃培養(yǎng)后計數(shù)?；罹嫈?shù)方法參考GB/T 13093、GB/T 18869、Q/FMSW.006-2016 執(zhí)行。用LB瓊脂培養(yǎng)基檢測芽孢桿菌，用MRS 培養(yǎng)基檢測乳酸菌，用伊紅美藍（EMB）瓊脂培養(yǎng)基檢大腸桿菌測,用DHL瓊脂培養(yǎng)基檢測沙門氏菌。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)先通過Excel 進行統(tǒng)計整理后，使用SPSS19.0 統(tǒng)計軟件進行單因子方差分析（one-way ANOVA），顯著性檢驗采用Duncan's 法多重比較，試驗數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準差”表示，P＜0.05 表示差異顯著，P＞0.05表示差異不顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對蛋雞生產(chǎn)性能的影響（見表2～表3）

表2 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

表2可以看出，各個階段各組產(chǎn)蛋率差異不顯著(P＞0.05)，1～4周產(chǎn)蛋率試驗組分別比對照組高2.17%和2.03%，5～8周產(chǎn)蛋率試驗組分別比對照組高0.93%和0.77%，全程試驗組比對照組分別高1.55%和0.77%。蛋重、產(chǎn)蛋量各個階段各組之間差異不顯著(P＞0.05)，但1～8周添加YCDG組產(chǎn)蛋量有提高趨勢。1～4周1%和2% YCDG 組采食量顯著高于對照組(P＜0.05)，5～8 周2% YCDG 采食量顯著高于1% YCDG 和對照組(P＜0.05)，全程各組之間采食量均差異顯著(P＜0.05)，試驗組采食量高于對照組。料蛋比各組之間差異不顯著(P＞0.05)，5～8周1%和2% YCDG組分別比對照組低1.44%和0.47%，試驗全程試驗組增均比對照組低0.47%。

表3 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對蛋雞體重的影響(g)

從表3可以看出，開始體重和試驗?zāi)w重各組之間差異不顯著(P＞0.05)，對照組體重增重最多，其次是2% YCDG組，1% YCDG組增重最少。

2.2 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對蛋品質(zhì)的影響（見表4～表5）

表4 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對蛋品質(zhì)的影響

表5 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對蛋殼顏色的影響

從表4可以看出，蛋品質(zhì)檢測各組之間差異均不顯著(P＞0.05)，蛋殼厚度、蛋殼強度、哈夫單位、卵白高度、卵黃比例試驗組有增高趨勢，1%和2% YCDG 組蛋殼強度比對照組高5.56%和5.30%，哈夫單位分別比對照組高0.45%和0.80%。

綜合3 次蛋殼顏色評分，2% YCDG 組蛋殼顏色優(yōu)于其他組，110+100分占比較多，70分占比最少。

2.3 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對糞便狀態(tài)的影響（見表6）

從表6可以看出，五次糞便評各組之間差異不顯著（P＞0.05），綜合看1% YCDG組和2% YCDG組糞便狀態(tài)優(yōu)于對照組，1% YCDG組糞便狀態(tài)最佳。

表6 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對糞便狀態(tài)的影響

2.4 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對糞便菌群微生物的影響（見表7）

表7 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對糞便菌群微生物的影響(log10 CFU/g)

從表7 可以看出，2% YCDG 組乳酸桿菌顯著高于對照組和1% YCDG 組（P＜0.05），沙門氏菌對照組顯著高于兩個試驗組（P＜0.05），2% YCDG 組顯著高于1% YCDG組（P＜0.05）。糞便中大腸桿菌和芽孢桿菌差異不顯著（P＞0.05），但試驗組糞便中大腸桿菌低于對照組，分別低12.48%和3.72%。

3 討論

3.1 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對生產(chǎn)性能的影響

釀酒酵母發(fā)酵白酒糟是酵母胞外代謝產(chǎn)物、酵母自溶破壁的內(nèi)容物、有益菌、酵母細胞壁多糖、發(fā)酵培養(yǎng)基等，富含蛋白質(zhì)、小肽、氨基酸、有機酸、消化酶、酵母細胞壁多糖、寡糖、B族維生素、核酸、核苷酸、微量元素等未知的營養(yǎng)成分，這些營養(yǎng)物質(zhì)有促進蛋雞生產(chǎn)性能的作用[4-5]。馬友彪等[6]研究添加白酒糟酵母培養(yǎng)物有提高產(chǎn)蛋率和平均日采食量的趨勢，添加1%白酒糟酵母培養(yǎng)物組產(chǎn)蛋雞的生產(chǎn)性能最佳。陳娟等[7]研究發(fā)現(xiàn)，飼喂添加2%、4%新型釀酒酵母培養(yǎng)物的日糧，蛋重顯著增加，料蛋比顯著降低。張嘉琦等[8]也發(fā)現(xiàn)飼喂0.6%的酵母培養(yǎng)物顯著提高蛋重，有提高產(chǎn)蛋率和降低料蛋比的趨勢。林伯全等[9]同時添加酵母細胞壁和益生素飼喂蛋雞，可顯著提高產(chǎn)蛋率和日產(chǎn)蛋量，添加0.8 mg/kg 酵母細胞壁+100 ml/t 益生素效果最佳。

本試驗結(jié)果，添加釀酒酵母發(fā)酵白酒糟產(chǎn)蛋率、產(chǎn)蛋量有提高趨勢，料蛋比有降低趨勢，添加1%效果最佳，1～4 周、5～8 周和全程產(chǎn)蛋率分別比對照組高2.17%、0.93%、1.55%，5～8周添加1% YCDG料蛋比比對照組低1.44%，添加YCDG 對蛋重基本沒有影響。本試驗所用YCDG 在1～8 周，隨著添加YCDG 水平增加，采食量增加，可能是YCDG 中富含多種芳香物質(zhì)：脂類、醇類、有機酸和增味物質(zhì)：鳥苷酸、肌苷酸、谷氨酸、多肽等有刺激誘食的作用。以上試驗酵母培養(yǎng)物最優(yōu)添加量有所差異，使用效果各有不同，可能是使用的原生菌株、采用的生產(chǎn)工藝不同影響產(chǎn)物的營養(yǎng)成分、組成、結(jié)構(gòu)等，但綜合看適量添加釀酒酵母培養(yǎng)物能提高生產(chǎn)性能。但避免過量添加酵母培養(yǎng)物，過量飼喂酵母培養(yǎng)物能通過降低肉仔雞對氮素沉積及腸道的發(fā)育，進而抑制仔雞的生長發(fā)育[10]。本試驗所采用的YCDG 與馬友彪等[6]研究使用的白酒糟酵母培養(yǎng)物是效果相似，1%添加效果最佳，有提高產(chǎn)蛋性能的趨勢，試驗在天氣炎熱的夏季進行誘食效果顯著。體增重與產(chǎn)蛋率剛好相反，對照組體增重最大，其次是2% YCDG 組，1% YCDG組體增重最少，可能產(chǎn)蛋量高消耗能量多，導(dǎo)致體增重少。

3.2 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對蛋品質(zhì)的影響

良好的蛋殼厚度一般在0.33～0.35 mm，近500 日齡的蛋雞蛋殼厚度能達到0.35～0.36 mm，說明本試驗雞場飼養(yǎng)水平較高。蛋殼強度能反映蛋殼承重能力，對運輸具有重要意義。哈弗單位和卵白高度直接反應(yīng)蛋白品質(zhì)和蛋新鮮程度的重要指標(biāo)，新鮮雞蛋的哈夫單位在80 以上，它是現(xiàn)在國際上對蛋品質(zhì)評價的重要指標(biāo)和常用方法。本試驗添加YCDG 組蛋殼厚度比對照組高2.86%，蛋殼強度、哈夫單位、卵白高度有升高趨勢，2% YCDG添加效果最佳，對蛋黃顏色沒有改善，可能是因為良好的飼養(yǎng)環(huán)境和營養(yǎng)均衡的飼料掩蓋了YCDG對蛋品質(zhì)的改善作用。武書庚等[11]研究添加酵母培養(yǎng)物顯著改善蛋黃顏色，對哈夫單位、蛋殼厚度、蛋殼強度的改善作用不明顯。張嘉琦等[8]發(fā)現(xiàn)添加0.4%酵母培養(yǎng)物蛋殼厚度顯著增加，有提高蛋殼強度、蛋黃比例、哈夫單位的趨勢。晏家友等[12]也發(fā)現(xiàn)添加1、2、3 kg/t酵母培養(yǎng)物對四川農(nóng)鳳雞蛋殼強度、蛋殼厚度和哈夫單位沒有顯著影響，但隨著飼喂量增加有提高趨勢。以上研究與本研究基本一致，YCDG對蛋品質(zhì)具有改善作用。

蛋殼顏色是消費者直觀感受的蛋殼品質(zhì)的重要指標(biāo)，參考海蘭褐蛋雞手冊將蛋殼顏色從深到淺分成110、100、90、80、70五個等級，一般認為蛋殼顏色越深越好。蛋雞日齡逐漸增大，蛋殼顏色越來越淺，試驗雞日齡500 日齡左右，平均80 分左右，本試驗綜合3 次蛋殼顏色評分，發(fā)現(xiàn)對照組110+100 分和70 分的占比均多于添加YCDG 組，2% YCDG 組110+100 分占比相對較多，70 分占比最少，蛋殼顏色總分也高于其他組。影響褐殼蛋雞蛋殼顏色的因素很多有遺傳、日齡、疾病、應(yīng)激、營養(yǎng)等[13]，可能2% YCDG 能減少熱應(yīng)激損害、改善腸道菌群平衡，對蛋殼顏色有改善作用。

3.3 不同水平釀酒酵母發(fā)酵白酒糟對糞便狀態(tài)和菌群微生物的影響

現(xiàn)場養(yǎng)殖戶經(jīng)常以糞便狀態(tài)判斷雞群狀態(tài)，評價飼料產(chǎn)品的優(yōu)劣，的確糞便是反映機體健康狀態(tài)的因素之一。很少有研究判斷直觀的糞便狀態(tài)，我們通過大量的實踐和參考《蛋雞的信號》制定糞便評價標(biāo)準：1 分為硬質(zhì)糞便，糞便可以拿起在手中滾動；2 分為糞便成型，但糞便里面是潮濕狀；3 分為稀糞；4 分為水樣便。試驗期間糞便基本處于2～3 分之間，糞便基本成型偏潮濕，伴有少量稀便。添加YCDG 有改善糞便狀態(tài)的作用，1%的添加效果最佳，可減少稀糞。由此可見，YCDG 可作為緩解蛋雞腹瀉的有效途徑之一。

本試驗同時檢測糞便中乳酸桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、芽孢桿菌菌群數(shù)量，發(fā)現(xiàn)添加2% YCDG可顯著提高糞便中乳酸桿菌、減少沙門氏菌數(shù)量。乳酸菌可產(chǎn)生有機酸—乳酸，是一種重要的抗菌物質(zhì)，可抑制病原菌的生長，另一方面，乳酸菌定植在腸上皮細胞，競爭性排斥腸道內(nèi)潛在致病菌對腸上皮細胞的黏附、定植[14]。沙門氏菌所有血清型都有潛在致病性，可激發(fā)腸道和循環(huán)系統(tǒng)的急性炎癥反應(yīng)，大部分沙門氏菌是人畜共患病的病原，食用被污染的蛋制品可引起人類沙門氏菌感染[15]。張嘉琦等[8]研究添加0.4%酵母培養(yǎng)物可顯著降低蛋殼表面大腸菌群、細菌總數(shù)。嚴一銘[16]和郭小華等[17]研究表明釀酒酵母培養(yǎng)物可顯著降低盲腸重大腸桿菌數(shù)量，但乳酸桿菌數(shù)量差異不顯著。Jensen等[18]發(fā)現(xiàn)酵母培養(yǎng)物可顯著降低蛋雛雞腸道大腸桿菌數(shù)量，提高酵母桿菌和雙歧桿菌數(shù)量。安勝英等[19]研究表明添加適當(dāng)?shù)慕湍概囵B(yǎng)物可降低蛋雛雞腹瀉頻次，降低腸道內(nèi)大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量，添加0.3%的酵母培養(yǎng)物可替代抗生素改善腸道微生態(tài)效果。周建民等[20]研究發(fā)現(xiàn)添加1%的白酒糟酵母培養(yǎng)物可顯著提高肉仔雞21日齡空腸絨毛高度和42日齡絨毛高度/隱窩深度。以上結(jié)果均表明酵母培養(yǎng)物有提高有益菌，降低有害菌的作用，優(yōu)化腸道菌群，有助于腸道健康生長，可能是生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)改善的原因。

4 結(jié)論

①添加釀酒酵母發(fā)酵白酒糟有提高蛋雞產(chǎn)蛋率、蛋品質(zhì)和降低料蛋比的趨勢，顯著提高采食量，添加1% YCDG 生產(chǎn)性能最佳，添加2% YCDG 蛋品質(zhì)最佳。

②添加釀酒酵母發(fā)酵白酒糟可顯著提高糞便中乳酸桿菌數(shù)量和降低沙門氏菌數(shù)量，可改善糞便狀態(tài)。

③推薦在蛋雞飼糧中適宜添加1%～2%釀酒酵母發(fā)酵白酒糟。