楊茜

【中圖分類號(hào)】R446 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【DOI】10.12332/j.issn.2095-6525.2020.11.075

寄生蟲侵入到宿主之后，會(huì)在宿主的體內(nèi)形成多種有害作用，其中涵蓋了機(jī)械性損傷、掠奪營養(yǎng)、毒性作用以及繼發(fā)感染等，嚴(yán)重影響了人體的健康。很多的寄生蟲生活史中卵囊、蟲卵或者是幼蟲會(huì)隨著糞便排出體外，通過糞便進(jìn)行寄生蟲檢查，能夠看其是否感染寄生蟲及其寄生蟲感染種類。病原學(xué)檢查屬于診斷寄生蟲成蟲或者是蟲卵的重要實(shí)驗(yàn)手段，并且檢查方法有許多。基于此，本文主要介紹目前比較常用的腸道寄生蟲糞便病原學(xué)檢查方法，希望能夠?yàn)榇蠹姨峁┮恍﹨⒖肌?/p>

1? 什么是腸道寄生蟲?。?/p>

寄生蟲在人體腸道內(nèi)寄生而產(chǎn)生的疾病，都被稱之為腸道寄生蟲病。常見種類有蠕蟲類以及原蟲類，其中涵蓋了鉤蟲、蟯蟲、鞭蟲、蛔蟲、阿米巴、絳蟲等。腸道中的寄生蟲種類較多，并且在人體寄生的過程十分復(fù)雜，所形成的病變并不是僅限于腸道。根據(jù)感染寄生蟲的種類和部位以及人體宿主的免疫狀況，臨床癥狀以及體征都存在著一定差異。

2? 糞便標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)

糞便標(biāo)本應(yīng)當(dāng)新鮮，并且送檢的時(shí)間不要超過2小時(shí)，特別是要檢查運(yùn)動(dòng)的滋養(yǎng)體，比如鞭毛蟲、阿米巴以及纖毛蟲等，必須要在糞便取材后的半小時(shí)之內(nèi)進(jìn)行檢查，或者是將糞便標(biāo)本保存在溫度為35-37℃環(huán)境中待檢。同時(shí)，裝著糞便的容器應(yīng)當(dāng)保持著無水、干燥、潔凈、無尿液、無粉塵的狀態(tài)，且不要遭受到泥土以及藥物的污染，并且最好使用加蓋的便杯。容器外還需要貼好標(biāo)簽，標(biāo)簽上應(yīng)有受檢人員的姓名、受檢目的以及日期等內(nèi)容。糞便采集的量通常為5到10g，也就是拇指末節(jié)大小。若要求做糞便自然沉淀或者是血吸蟲毛蚴孵化，這時(shí)受檢的糞便量不能少于30g。如果需要檢查蠕蟲的成蟲時(shí)，需要檢驗(yàn)病人24小時(shí)的糞便。糞便檢查時(shí)應(yīng)關(guān)注其顏色、性狀，若有粘液或者是膿血，需要優(yōu)先選擇這些部分，否則要取不同部位的糞便多點(diǎn)取樣。

3? 腸道寄生蟲糞便的病原學(xué)檢查方法

3.1直接涂片法

此種方法適用于檢查原蟲的包囊、滋養(yǎng)體以及蠕蟲的蟲卵。并且，此種檢查方法十分簡便，操作起來也十分簡單。但是，其也存在著一定的劣勢(shì)，由于取材較少，很容易發(fā)生漏檢的情況。因此，可以采取連續(xù)涂片三張檢查的方式，提升檢查率。

生理鹽水直接涂片主要是為了檢驗(yàn)蠕蟲卵以及原蟲滋養(yǎng)體，具體操作為：在載破片中滴入生理鹽水一到兩滴，并取出米粒大小般的糞便，將其在生理鹽水中均勻攤開，涂成薄糞膜。這一操作完成之后，將粗糞渣剔除，覆蓋好蓋膜片，在鏡下完成鏡檢。而碘液染色涂片主要是為了檢測(cè)原蟲包囊，具體操作方法如下：用碘液替代生理鹽水滴在載玻片上，并使用竹簽取出米粒大小的糞便，將其放入碘液中，調(diào)制均勻之后加上蓋玻片進(jìn)行鏡檢。也可以先制備生理鹽水涂片，加上蓋玻片，最后在蓋玻片的一側(cè)邊緣滴入一滴碘液，讓其可以滲透到生理鹽水涂片上，然后進(jìn)行鏡檢。

3.2定量透明法

此種方法適用于糞便中各種蠕蟲卵的計(jì)數(shù)與檢查。通過對(duì)蟲卵的計(jì)數(shù)，能夠基本評(píng)估出寄生蟲體的負(fù)荷，進(jìn)而掌握感染的密度，有助于指導(dǎo)藥物治療的開展，也能夠?yàn)樵u(píng)估療效提供一定的參考。定量透明法的具體操作步驟如下：使用定量板，定量板大小為40mm×30mm×1.37mm，?？诪殚L圓孔，其大小在8mm×4mm，兩端為半圓形，孔內(nèi)能夠容納糞樣41.7mg。把定量板放在載玻片上，使用金屬篩蓋在糞便上，并從篩網(wǎng)上刮取糞便，用刮取的糞便將?？滋顫M。完成這一步驟之后，將定量板掀起，載玻片上會(huì)留下一個(gè)形狀為長條形糞樣，這時(shí)將浸透的甘油—孔雀綠玻璃紙覆蓋到糞樣上，并用橡皮塞輕輕的加壓，讓糞樣展平成橢圓形，等待一小時(shí)到兩小時(shí)糞便成透明狀之后進(jìn)行鏡檢計(jì)數(shù)。所得的蟲卵數(shù)需要乘以24倍，再乘以糞便性狀系數(shù)（成形便1，半成形便為1.5，軟濕便為2，粥樣便為3，水瀉便為4），簡單來講就是每克糞便蟲卵數(shù)。

3.3自然沉淀法

此種方式適用于蠕蟲卵、球蟲卵囊以及原蟲包囊的收集。蠕蟲卵以及原蟲包囊對(duì)比水來說其比重較大，在水中十分容易沉淀，進(jìn)而達(dá)到蟲卵聚集的效果，提高檢出率。

3.4飽和鹽水浮聚法

此種方法適用于各種蠕蟲卵的檢查，特別是檢查鉤蟲卵效果十分的好，也能夠用其檢查帶絳蟲卵以及微小膜殼絳蟲卵，適合用于原蟲包囊以及吸蟲卵的檢查。

3.5鉤蚴培養(yǎng)法

此種檢查方法用于鉤蟲卵的檢查。鉤蟲卵只有在適應(yīng)的溫度以及濕度環(huán)境中，才能夠得到快速、良好的發(fā)育，從而孵化出幼蟲，只需要用放大鏡或者是肉眼進(jìn)行觀察。陽性檢出率會(huì)比糞便直接涂片高7.2倍，并且大于飽和鹽水浮聚法。通過此種方式培養(yǎng)出的絲狀蚴可以用于蟲種鑒定。

3.6毛蚴孵化法

此種檢查方式屬于血吸蟲卵的專用檢查方式，主要是根據(jù)血吸蟲卵中的毛蚴，讓其處于溫度適宜的清水中，進(jìn)而使其能夠在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行孵化而設(shè)計(jì)出的一種孵化手段。

3.7幼蟲分離法

此種方法主要用于在糞便中尋找到蠕蟲的幼蟲。貝爾曼裝置是由一個(gè)較大的玻璃漏斗以及它周圍的豎立成環(huán)形的支撐結(jié)構(gòu)所組成的。漏斗下面連接著乳膠橡皮管，而管子里面有塞子。漏斗中需要裝置好一個(gè)金屬篩片，進(jìn)而起到樣品支撐的作用。在操作過程中，需要讓其處于樣品1到3厘米水平上，倒?jié)M約30℃的水，并將紗布鋪設(shè)到擁有支撐的篩片上，同時(shí)放入5到15g的糞便殘?jiān)?，確保其能夠完全被溫水所覆蓋。等待一夜之后，拿出一塊載玻片，并把載玻片放到橡皮管的下面，將塞子打開使里面的液體能夠流到載玻片的上面，最終將蓋玻片蓋好，之后在顯微鏡下面進(jìn)行幼蟲的檢查。

3.8幼蟲培養(yǎng)法

拿出一些新鮮且易碎的糞便，將其放到培養(yǎng)皿中堆砌成半球狀，讓其頂部高出培養(yǎng)皿，接下來在邊緣處加入少許的水。所用糞便不能過于干燥，稀便也不用額外進(jìn)行加水。為了讓培養(yǎng)皿與糞便能夠接觸的更好，需要在上面蓋上蓋子，并將其放到溫度為25到30℃的培養(yǎng)箱中。放置過后，每天需要對(duì)糞便進(jìn)行觀察，看其是否干燥，并讓其保持在較為合適的濕度，加水展開定期培養(yǎng)。待7到15天左右，第三期幼蟲便會(huì)產(chǎn)生，它們會(huì)從糞便中爬出，這一階段所有的幼蟲基本都已經(jīng)到達(dá)了感染期，幼蟲會(huì)爬到培養(yǎng)皿的周圍或者是蓋子上，此時(shí)可以使用吸管吸入一些生理鹽水將幼蟲沖洗下來，并滴在載玻片上，覆蓋好蓋玻片，最終完成鏡檢。