曹 凱，陳 濤，付麗新

尋常型天皰瘡（pemphigus vulgaris，PV）、大皰性類天皰瘡（bullous pemphigoid，BP）均屬大皰性皮膚病，在發(fā)病機制上除了已經(jīng)明確的抗原抗體反應外，還涉及細胞免疫、補體系統(tǒng)、固有免疫等方面[1]。2003年首次發(fā)現(xiàn)白細胞介素（IL）-29，它是IL-10家族中的一種細胞因子。國內外研究發(fā)現(xiàn)，IL-29與類風濕關節(jié)炎[2]、系統(tǒng)性紅斑狼瘡[3]、系統(tǒng)性硬化[4]、過敏性紫癜[5]、銀屑病[6]、骨關節(jié)炎[7]等發(fā)病有關。筆者采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測PV、BP患者血清IL-29水平，并探討IL-29與PV和BP發(fā)病的關系，其發(fā)病機制在生物學中的作用。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 病例資料 選取2017年12月－2018年6月就診于成都市第二人民醫(yī)院皮膚科門診及住院部的患者。納入標準：經(jīng)過臨床表現(xiàn)、組織病理和直接免疫熒光檢查，最終確診的PV、BP患者。排除標準：①患有腫瘤；②其他自身免疫性疾病；③急性感染的患者。共收集PV患者22例，男10例，女12例，年齡28～88歲，平均（54.45±14.78）歲；BP患者13例，男11例，女2例，年齡38～84歲，平均（69.64±12.87）歲。本院同期健康體檢部正常人健康對照組14例，男7例，女7例，年齡18～78歲，平均（39.64±19.16）歲。

1.1.2 試劑與儀器 IL-29 ELISA試劑盒（博士德EK0964），酶標儀（BIO-RAD 680）。

1.2 方法

1.2.1 血清IL-29檢測 抽取所研究對象外周血 5 ml，肝素鈉抗凝，低溫離心后取血清保存于-70℃凍存。待標本收齊后，用ELISA法檢測標本IL-29的表達水平，步驟嚴格按照說明書進行。

1.2.2 觀察指標 觀察PV、BP患者血清標本通過ELISA法所測得的IL-29濃度。

1.3 統(tǒng)計學方法

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行處理。PV組、BP組、健康對照組分別經(jīng)正態(tài)性檢驗，P＜0.05，不符合正態(tài)分布，故選用非參數(shù)檢驗-Wilcoxon秩和檢驗法。計量資料以均數(shù)±標準差表示，PV、BP組分別與健康對照組比較，PV與BP組比較，檢驗水準α=0.05。

2 結果

PV組與健康對照組比較，IL-29水平顯著升高（u=45，P＜0.0001），差異有統(tǒng)計學意義；BP組與健康對照組比較，IL-29水平顯著升高（u=16，P＜0.0001），差異有統(tǒng)計學意義；PV組與BP組比較（u=93，P＞0.05），差異無統(tǒng)計學意義（表1）。

表1 3組患者血清IL-29水平比較 （xˉ ±s）

3 討論

PV是一種表皮內棘層松解性大皰性自身免疫性皮膚病，其基本發(fā)病機制為Dsg1、Dsg3導致角質形成細胞失去細胞間的黏附。除自身抗體外，細胞因子和炎癥遞質可能參與天皰瘡的水皰形成，包括FasL、腫瘤壞死因子-α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-17、IL-22、IL-35等[8-11]。BP表現(xiàn)為表皮下緊張性大皰，其基本發(fā)病機制為BP抗原（bullous pemphigoid antigen，BPAG）導致細胞膜半橋粒和錨絲等斷裂及消失[12]。此外，角質形成細胞可能獨立于補體吸引中性粒細胞，通過與BP-IgG/E結合，分泌IL-6和IL-8，誘發(fā)水皰的形成[11]。

IL-29屬于III型干擾素（IFN），也稱為IFN-λ1。在受到某些病毒感染或者細菌及其分泌物刺激時，有核細胞均可低水平產(chǎn)生IL-29。單核細胞來源的成熟樹突狀細胞[13]、肥大細胞[14]、Th17細胞[15]均可高表達產(chǎn)生IL-29。IL-29的生物學作用主要為抗病毒[16]、抗腫瘤[17]、免疫調節(jié)活性[18]和通過誘導效應改變細胞前類型[19]等。IL-29在炎癥、變態(tài)反應性皮膚病中，如銀屑病[15]、慢性自發(fā)性蕁麻疹[20]等發(fā)揮著重要的抗炎、調節(jié)免疫的作用。

筆者的研究結果顯示，PV組和BP組分別與健康對照組相比，IL-29水平顯著升高，其具體機制不明。Wolk等[15]關于IL-29與銀屑病的相關研究表明IL-29在表皮中高表達，主要影響角質形成細胞，IL-29上調病毒和微生物傳感細胞受體的表達，包括Toll樣受體2、Toll樣受體3和黑素瘤分化相關基因5。在未感染的皮膚中，IL-29增強角質形成細胞與病毒和微生物產(chǎn)物反應的能力，并間接地上調抗炎潛能和先天免疫[13]。PV、BP與銀屑病同屬炎癥性皮膚病，由此推測IL-29在PV和BP患者血清升高的原因為IL-29參與了抗炎及免疫調節(jié)過程。

筆者的研究結果顯示，PV組與BP組IL-29檢測水平相比較差異無統(tǒng)計學意義，而角質形成細胞均參與PV、BP的發(fā)病機制[11]。由此推測，本文的研究結果和既往IL-29與炎癥性皮膚病實驗研究[15,20]結果相吻合，即IL-29影響角質形成細胞，參與了抗炎反應。

目前臨床上治療PV常用的生物制劑包括靜脈滴注免疫球蛋白、抗CD20單克隆抗體、腫瘤壞死因子抑制劑、T淋巴細胞免疫療法等。近年來，利妥昔單抗（rituximab，RTX）與糖皮質激素被推薦為PV的一線治療藥物[21]。RTX是一種以B淋巴細胞表面的CD20抗原為靶點的單克隆抗體, 通過抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用、補體依賴的細胞毒作用以及誘導細胞凋亡使B淋巴細胞清除[22]。Ahmed和Shetty[23]等分析了500例使用RTX治療的頑固性PV患者，在使用不到6周內，有90%～95%的患者臨床緩解。臨床緩解期后，有5例患者出現(xiàn)嚴重不良事件，最重要的是感染并發(fā)敗血癥，與RTX有關的死亡為2例。RTX是目前可用于治療頑固性天皰瘡的最佳生物制劑之一。雖然RTX療效顯著，但缺乏大型、多中心隨機對照試驗，其安全性有待提高。此外，一些其他生物制劑，如BAFF、P13K、BTK抑制劑，逐漸在大皰性皮膚病治療中使用[24]。因此，針對不同治療靶點的新型生物制劑亟待研究。

綜上，筆者的檢測發(fā)現(xiàn)PV和BP患者的血清IL-29水平較健康對照組顯著升高，目前國內外鮮見PV、BP患者血清IL-29水平及其機制的相關研究報道。雖納入本研究的患者排除了急性感染，但是否存在潛在微小感染還不能排除，因此IL-29是否也同時參與了抗感染過程尚不能除外。受限于本研究收集的病例數(shù)過少，部分為已經(jīng)治療的患者，僅對患者血清水平的分析，并未對皮損、皰液中的IL-29進行分析，并不能闡明IL-29與PV和BP的具體發(fā)病機制。IL-29可能參與了PV、BP的發(fā)病過程，在PV、BP中的生物學作用可能表現(xiàn)為抗炎、免疫調節(jié)，存在潛在的靶向治療方向，需后續(xù)進一步研究。