■肖再利 譚清甜，2 陳家烙 Daniel Sindaye 盧亞萍 鄧百川*

（1.華南農業(yè)大學動物科學學院，廣東廣州510642；2.清遠市廣生元畜牧發(fā)展有限公司，廣東清遠511500；3.杭州市康源飼料科技有限公司，浙江杭州310051）

溶菌酶又稱為胞壁質酶，是一種在人和動物機體中廣泛存在的酶[1]，它能夠分解細菌細胞壁肽聚糖層結構中的β-1，4 糖苷鍵，從而破壞細胞壁骨架，導致細菌死亡[2-3]，因而在抗菌方面尤其是抑制革蘭氏陽性細菌中發(fā)揮著重要作用。有研究報道，溶菌酶還能夠增強機體抵抗力和促進腸道有益菌的繁殖[4]，尤其是具有對人類和畜禽無毒副作用和無藥害殘留等優(yōu)點[5]，因而得到了相關從業(yè)者的密切關注[6]。例如，美國農業(yè)部研究中心研究發(fā)現(xiàn)在豬飼糧中添加溶菌酶可有效改善豬的生長性能[7]，Ma等[8]和宋忠柯[9]分別在21 日齡斷奶仔豬和肉雛雞飼糧中添加溶菌酶發(fā)現(xiàn)顯著提高了飼料轉化率。楊榮芳[10]報道，添加溶菌酶可顯著提高蛋雞的產蛋率和平均蛋重水平，這些研究均表明溶菌酶可作為新型飼料添加劑應用到畜禽生產中。但目前為止，溶菌酶在蛋雞上的相關報道較少。因此，本試驗旨在探究飼糧中添加溶菌酶對產蛋高峰期蛋雞的生產性能、蛋品質和血清生化指標的影響，確定溶菌酶的適宜添加水平，為溶菌酶在蛋雞生產上的應用提供一定的科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本試驗所使用的溶菌酶，通過基因工程和液體發(fā)酵工藝獲得，溶菌酶純度約10%，酶活力為3 110 U/mg，由浙江艾杰斯生物科技有限公司提供。

1.2 試驗設計及飼糧組成

試驗采用單因子隨機設計，選取360只產蛋率和體重相近的40 周齡京粉1 號蛋雞，隨機分成4 組，每組6 個重復，每個重復15 只雞。對照組飼喂基礎飼糧，試驗組分別在基礎飼糧中添加200、350 mg/kg 和500 mg/kg 溶菌酶。預試期7 d，正式試驗期28 d?；A飼糧為參照NRC（1994）需要配制的粉狀配合飼料，其基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平如表1 所示。試驗地點為清遠廣生元畜牧發(fā)展有限公司的蛋雞養(yǎng)殖基地。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗雞舍為半開放式雞舍，3 層階梯式籠養(yǎng)，3 只/籠。每天喂料兩次（7:00、15:30），自由采食和飲水，15:00 準時收集雞蛋。試驗期間舍內溫度為23～30 ℃，自然通風結合縱向負壓通風，舍內每天光照15 h，主要采用自然光照，早晚為人工光照，每天清理糞便1次，勻料3次，常規(guī)免疫，每3 d進行禽舍消毒1次。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平（干物質基礎）

1.4 指標測定與方法

1.4.1 生產性能

試驗期間每天以重復為單位記錄喂料量、產蛋數(shù)量和產蛋總重，每周末進行結料，計算產蛋率、平均日采食量、料蛋比、平均日產蛋量和平均蛋重。

1.4.2 蛋品質

正式試驗第28 d，每重復取10枚外形完好、大小基本一致的雞蛋用于蛋品質檢測。依次使用游標卡尺、蛋殼強度測定儀（Egg Force Reader，Orka Technology Ltd.）、蛋品質分析儀(Egg NnalyzerTM，Orka Technology Ltd.)和螺旋測微儀測定蛋形指數(shù)、蛋殼強度、蛋黃顏色和哈氏單位等指標；每重復隨機取2枚雞蛋的蛋黃樣，使用比色皂化法[11]測定蛋黃膽固醇含量。

1.4.3 血清生化指標

正式試驗第28 d，每個重復隨機選擇2 只雞，空腹12 h 后翅靜脈采血各4 ml 左右，待血清析出后3 000 r/min 離心10 min，分裝的血清樣于-80 ℃保存。血清尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、谷丙轉氨酶（ALT)、谷草轉氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、總蛋白（TP）、甘油三酯（TG）和總膽固醇（TC）含量均使用雷杜全自動生化分析儀Chemray 240測定。

1.5 數(shù)據統(tǒng)計與分析

所有試驗數(shù)據經Excel 2010 初步進行統(tǒng)計后，采取SPSS 25.0 進行單因素方差分析，多重比較用Duncan's法，結果用“平均值±標準誤”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 飼糧中添加溶菌酶對蛋雞生產性能的影響（見表2）

表2 溶菌酶對蛋雞生產性能的影響

從表2 可見，與對照組相比，飼糧添加200、350、500 mg/kg 溶菌酶顯著降低了蛋雞平均日采食量（P＜0.05），而對產蛋率、平均日產蛋量和平均蛋重均無顯著影響（P＞0.05），飼糧添加200 mg/kg 溶菌酶料蛋比降低了3.4%（P＞0.05），為各組最低值。

2.2 飼糧中添加溶菌酶對蛋雞蛋品質的影響(見表3)

表3 溶菌酶對蛋雞蛋品質的影響

從表3可見，與對照組相比，飼糧添加350 mg/kg溶菌酶，雞蛋的哈氏單位在數(shù)值上有所提高，但差異不顯著（P＞0.05），隨著溶菌酶添加水平的提高，蛋黃膽固醇含量逐漸降低，飼糧添加500 mg/kg溶菌酶顯著降低了蛋黃膽固醇的含量（P＜0.05）。飼糧添加200、350 mg/kg和500 mg/kg溶菌酶對蛋雞的蛋形指數(shù)、蛋殼強度、蛋白高度、蛋黃顏色和蛋殼厚度均無顯著影響（P＞0.05）。

2.3 飼糧中添加溶菌酶對蛋雞血清生化指標的影響(見表4)

從表4 可見，與對照組相比，隨著溶菌酶添加水平的提高，蛋雞血清尿酸含量和總膽固醇含量逐漸降低，飼糧添加500 mg/kg 溶菌酶顯著降低了血清尿酸和總膽固醇含量（P＜0.05）。飼糧添加200、350 mg/kg和500 mg/kg 溶菌酶對蛋雞血清中的尿素氮、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、白蛋白、總蛋白和甘油三酯含量均無顯著影響（P＞0.05）。

表4 溶菌酶對蛋雞血清生化指標的影響

2.4 飼糧中添加溶菌酶對蛋雞經濟效益的影響(見表5)

由表5 可知，在試驗期內，基礎飼糧價格和雞蛋價格大致為2.5 元/kg 和9 元/kg，該溶菌酶參考價格為100 元/kg，隨著溶菌酶添加水平的提高，飼料的單價成本逐漸上升，200、350 mg/kg 和500 mg/kg 溶菌酶組飼料成本比對照組分別降低了0.270、0.207 元/只和0.063 元/只。與對照組相比較，200 mg/kg 溶菌酶組每只蛋雞利潤提高了0.207 元/只，350 mg/kg 和500 mg/kg 溶菌酶組利潤分別減少了0.466 元/只和0.093 元/只。

表5 飼料成本與利潤

3 討論

3.1 飼糧中添加溶菌酶對蛋雞生產性能的影響

在養(yǎng)殖蛋雞的過程中，生產性能是評價經濟效益的一個重要指標，也是評價飼料添加劑效果的重要指標。本試驗表明，飼糧添加200、350 mg/kg和500 mg/kg溶菌酶對蛋雞產蛋率、平均日產蛋量和平均蛋重均無顯著影響，添加200 mg/kg 溶菌酶料蛋比降低了3.4%，這與前人研究結果不盡相同，楊榮芳[10]發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加溶菌酶可顯著提高蛋雞產蛋率，Yun 等[12]和Gong 等[13]研究結果表明，肉雞飼糧中添加溶菌酶對生長性能無顯著影響，而目前有部分在肉雞[14-15]、肉雛雞[16]、肉鴨[17-18]、斷奶仔豬[8，19]的報道均表明，飼糧中添加溶菌酶能提高畜禽的生長性能，這可能是與本試驗發(fā)現(xiàn)添加溶菌酶以后顯著降低了蛋雞平均日采食量以及飼養(yǎng)時間過短有關。邵春榮等[20]在飼糧中添加4～100 mg/kg蛋清溶菌酶（1 200 U/mg）、張世卿等[21]在飼糧中添加300～600 mg/kg溶菌酶（1 000 U/mg）和Torki等[22]在飼糧中添加40 mg/kg蛋清溶菌酶（純度≥90%）的結果均顯示，添加溶菌酶降低了肉仔雞的平均日采食量，這與本試驗結果相似。但May 等[23]在流質飲食中添加溶菌酶（100 mg/l）飼喂斷奶仔豬和Xu等[24]在飼糧中添加150 mg/kg和300 mg/kg溶菌酶（5 000 U/mg）飼喂哺乳母豬時發(fā)現(xiàn)，飼糧添加溶菌酶均可顯著提高其平均日采食量，這與本研究結果不同。造成上述試驗結果差異的原因也許是本試驗使用的溶菌酶產品有發(fā)酵后的味道，添加到基礎飼糧后其氣味和味道改變，從而降低采食量，另外溶菌酶的加工工藝、純度和酶活力不同，試驗的畜禽、品種和日齡也不同。本試驗表明，溶菌酶添加在蛋雞飼糧中應保持在適量水平。

3.2 飼糧中添加溶菌酶對蛋雞蛋品質的影響

蛋品質是評價雞蛋優(yōu)劣的一項重要指標，近年來，由于消費意識的提高，消費者更傾向購買蛋白濃厚、蛋黃顏色更深、蛋殼質量好的雞蛋[25]。雞蛋的蛋清品質一般用蛋白高度和哈氏單位來判定，其數(shù)值越高表示雞蛋新鮮程度和口感越好[26]。本試驗表明，飼糧添加350 mg/kg 溶菌酶飼喂蛋雞，雞蛋的哈氏單位在數(shù)值上有所提高。研究表明，溶菌酶的添加可顯著提高十二指腸[14，16，27]和回腸[23]腸絨毛的高度，且能改善腸道菌群的組成[8]。黃群[28]研究發(fā)現(xiàn)，蛋清所含卵白蛋白約占新產雞蛋總蛋白的54%，隨著貯藏時間的推移卵白蛋白轉變成S-卵白蛋白，而S-卵白蛋白含量與哈氏單位負相關。鄭彩燕[29]研究表明，卵白蛋白與溶菌酶之間存在相互作用，這些結果可能與飼糧添加350 mg/kg 溶菌酶影響雞蛋的蛋清品質有關。

蛋雞主要合成膽固醇的器官是肝臟和卵巢，肝臟不僅擔負機體主要膽固醇總合成量且合成速度快，血液總膽固醇也主要來源于此，大部分血液膽固醇隨極低密度脂蛋白通過卵母細胞原生質膜受體介導和吞噬轉入蛋黃，由此轉化成95%蛋黃總膽固醇[30]。本研究表明，隨著溶菌酶添加水平的提高，蛋黃膽固醇含量逐漸降低，飼糧添加500 mg/kg 溶菌酶顯著降低蛋黃膽固醇含量，這與溶菌酶對血清總膽固醇含量的影響趨勢一致，說明可能是因為溶菌酶有效地降低了血清膽固醇的含量，從而蛋黃中的膽固醇含量減少[31]。溶菌酶作為一種新型飼料添加劑，目前在蛋品質方面的研究較少。在本試驗中，飼糧添加溶菌酶對蛋雞的蛋形指數(shù)、蛋殼強度、蛋殼厚度和蛋黃顏色均無顯著影響，這與楊榮芳[10]在蛋雞上的試驗結果一致。

3.3 飼糧中添加溶菌酶對蛋雞血清生化指標的影響

通過對試驗雞只血清生化指標的測定，能反映其健康水平以及機體對營養(yǎng)物質的吸收程度和代謝狀態(tài)[32]。尿酸不僅是畜禽機體代謝產物，還是核酸代謝和氨代謝的關鍵去路[33-34]。本試驗表明，飼糧添加500 mg/kg 溶菌酶顯著降低血清中尿酸含量，可能是由于溶菌酶的添加促進了蛋雞對氮素的利用，加快了蛋白質的合成代謝。血清中總膽固醇和甘油三酯的水平與脂類物質的代謝相關，在產蛋高峰期蛋雞中，脂類物質不僅為機體供能，還能為蛋黃的形成提供基礎[35]。本試驗結果表明，飼糧添加500 mg/kg 溶菌酶顯著降低蛋雞血清總膽固醇水平，可能是機體脂類物質的消化代謝加快，飼糧添加溶菌酶能促進蛋雞機體脂類物質的代謝。另一方面，蛋雞血液膽固醇大部分隨極低密度脂蛋白轉入蛋黃，且蛋雞血清總膽固醇與蛋黃膽固醇含量的變化趨勢一致，說明飼糧添加500 mg/kg 溶菌酶蛋黃膽固醇含量的降低可能是由于其血清膽固醇含量的降低。蛋雞產蛋性能主要受下丘腦-垂體-卵巢軸調控，其中促性腺激素釋放激素是重要因子，雌激素可直接和間接作用于促性腺激素釋放激素神經元，從而誘導和調節(jié)其合成與分泌，影響產蛋性能[30]。本試驗表明，隨著溶菌酶添加水平的提高，血清總膽固醇含量和產蛋率變化趨勢一致，說明血清膽固醇含量的降低可能與雌激素的水平有關，進而影響蛋雞產蛋率，具體原因有待進一步分析。

血清總蛋白包括白蛋白和球蛋白，白蛋白在肝臟形成，而球蛋白是反映機體免疫能力的指標[36]。有研究表明，日糧中添加溶菌酶，能夠提高肉仔雞血清總蛋白[37]和白蛋白的含量[9,21]，可能是溶菌酶能加強畜禽機體蛋白質吸收和代謝能力[38]。本試驗中，飼糧中添加溶菌酶對蛋雞血清的尿素氮、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、白蛋白、總蛋白和甘油三酯的含量無顯著影響，可能是飼養(yǎng)周期短，溶菌酶中的有效成分發(fā)揮作用的時間更長，也可能和試驗雞的健康狀況相關[39]。

3.4 飼糧中添加溶菌酶對蛋雞經濟效益的影響

經濟效益直接反映了溶菌酶在蛋雞生產中的應用效果。按照蛋雞試驗期市場價格，隨著飼料成本的提高，與對照組相比較，200 mg/kg溶菌酶組每只蛋雞利潤提高了0.207 元/只，350 mg/kg 和500 mg/kg 溶菌酶組利潤分別減少了0.466元/只和0.093元/只。由此可知，飼糧添加200 mg/kg溶菌酶經濟效益最高。

4 結論

飼糧添加200、350 mg/kg 和500 mg/kg 溶菌酶可顯著降低蛋雞的平均日采食量，添加200 mg/kg 溶菌酶對產蛋率無顯著影響，可降低料蛋比3.4%，提高了企業(yè)經濟效益，添加500 mg/kg 溶菌酶可顯著降低蛋黃膽固醇含量以及血清尿酸和總膽固醇含量。綜上可見，200 mg/kg 溶菌酶在蛋雞生產上的應用效果較好，推薦其為蛋雞飼糧中的合適添加水平。