懷閃閃，湯有宏，徐小偉，程 偉，郭乾玲，朱娜娜，孫 猛，張 燕

（安徽古井貢酒股份有限公司，安徽亳州 236820）

由于含汞農(nóng)藥的廣泛使用，汞對(duì)食品污染的問(wèn)題愈來(lái)愈嚴(yán)重。長(zhǎng)期接觸汞會(huì)引起細(xì)胞中毒和毛細(xì)血管中毒，有時(shí)會(huì)誘發(fā)惡性腫瘤。食品中汞限量衛(wèi)生國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最低限量為0.01 mg/kg。由于食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的較低限量指標(biāo)，需要與之相適應(yīng)的高靈敏度檢驗(yàn)方法。微波消解由于其溶樣能力強(qiáng)、溶劑用量少和速度快等特點(diǎn)，已經(jīng)成為一種新穎的分析測(cè)試樣品預(yù)處理技術(shù)，目前被廣泛地應(yīng)用于各種試樣的前處理方法中。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

原料：小麥(國(guó)產(chǎn))。

儀器設(shè)備：PL2002電子分析天平，原子熒光光譜儀(北京瑞利AF-640A)，微波消解儀，控溫電熱板。

試劑：硝酸（HNO3），優(yōu)級(jí)純；鹽酸（HCl），優(yōu)級(jí)純；硼氫化鉀，分析純；氫氧化鉀，分析純。

1.2 試驗(yàn)方法

采用GB 5009.17—2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中總汞及有機(jī)汞的測(cè)定》的檢驗(yàn)方法（原子熒光光譜分析法），測(cè)定釀酒小麥中汞含量。依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》中測(cè)量范圍的確認(rèn)方法，對(duì)本方法的測(cè)量范圍、檢出限和定量限進(jìn)行確認(rèn)，驗(yàn)證其方法應(yīng)用于釀酒小麥中汞含量測(cè)定的重復(fù)性、準(zhǔn)確性、可行性。

1.3 檢驗(yàn)方法

1.3.1 方法原理

試樣經(jīng)酸加熱消解后，在酸性介質(zhì)中，試樣中汞被硼氫化鉀還原成原子態(tài)汞，由載氣（氬氣）帶入原子化器中，在汞空心陰極燈照射下，基態(tài)汞原子被激發(fā)至高能態(tài)，再由高能態(tài)回到基態(tài)時(shí)，發(fā)射出特征波長(zhǎng)的熒光，其熒光強(qiáng)度與汞含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列溶液比較定量。

1.3.2 樣品制備

稱取固體試樣小麥0.2～0.5 g（精確到0.001 g）于消解罐中，加入5 mL硝酸，加蓋放置過(guò)夜，旋緊罐蓋，按照微波消解儀的標(biāo)準(zhǔn)操作步驟進(jìn)行消解，冷卻后取出，緩慢打開(kāi)罐蓋排氣，用少量水沖洗內(nèi)蓋，將消解罐放在控溫電熱板上，于80 ℃加熱，驅(qū)趕棕色氣體，取出消解液轉(zhuǎn)移至25 mL塑料容量瓶中，用少量水分3次洗滌內(nèi)罐，洗滌液合并于容量瓶中并定容至標(biāo)線，混勻，待測(cè)。同法制備空白試樣。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制

1.3.3.1 試劑配制

鹽酸溶液(2 %)：量取20 mL硝酸,緩慢加入到980 mL水中，混勻。

硼氫化鉀溶液0.05%（W/V）溶液：（a）稱取2 g氫氧化鉀溶于約50 mL去離子水，加入1 g硼氫化鉀并使其溶解，用去離子水稀釋100 mL，搖勻。此溶液為1%KBH4。（現(xiàn)用現(xiàn)配）；(b)稱取2 g氫氧化鉀溶于約200 mL去離子水，加入1 % KBH4溶液50 mL，用去離子水稀釋至1000 mL，搖勻。此溶液為0.05%KBH4。（現(xiàn)用現(xiàn)配）。

硝酸溶液(1+9)：量取硝酸50 mL緩緩加入到450 mL水中。

1.3.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（10 μg/mL）。

汞標(biāo)準(zhǔn)中間液（100 μg/L）：準(zhǔn)確吸取汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（10 μg/mL）1.00 mL于100 mL容量瓶中，用含有0.5%g重鉻酸鉀的5%的硝酸溶液定容至刻度，混勻。

汞標(biāo)準(zhǔn)系列溶液：分別吸取汞標(biāo)準(zhǔn)中間液(100 μg/L)0.00 mL、0.10 mL、0.25 mL、0.50 mL、0.75 mL、1.00 mL于50 mL容量瓶中，用硝酸溶液(1+9)稀釋至刻度，混勻。此汞標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的質(zhì)量濃度分別為0.00 μg/L、0.20 μg/L、0.50 μg/L、1.00 μg/L、1.50 μg/L和2.00 μg/L。

1.4 結(jié)果計(jì)算方法

試樣中汞的含量按式(1)計(jì)算：

式中：X——試樣中汞的含量，mg/kg；

C——供試品溶液中汞的含量，μg/L；

C0——試劑空白溶液中汞的含量，μg/L；

V——樣品定容體積，mL；

m——樣品質(zhì)量，g。

2 結(jié)果與分析

2.1 測(cè)量范圍

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》中5.2測(cè)量范圍的確認(rèn)方法，對(duì)本方法的測(cè)量范圍進(jìn)行確認(rèn)，對(duì)0.2 μg/L、1.0 μg/L和1.5 μg/L 3個(gè)不同濃度的汞標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行6次檢測(cè)分析，其結(jié)果見(jiàn)表1和圖1。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性

試驗(yàn)所得標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)R2為0.998648，結(jié)果（見(jiàn)表1標(biāo)準(zhǔn)曲線線性）符合GB/T 27417—2017中對(duì)于準(zhǔn)確定量方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不低于0.99的要求。

精密度以不同濃度的汞標(biāo)準(zhǔn)溶液6次檢測(cè)結(jié)果值的室內(nèi)變異系數(shù)表示，其結(jié)果（見(jiàn)表2標(biāo)準(zhǔn)溶液變異系數(shù)及正確度結(jié)果表）符合GB/T 27417—2017中被測(cè)組分含量為0.1～10 μg/L時(shí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變異系數(shù)≤21%的要求。

表2 標(biāo)準(zhǔn)溶液變異系數(shù)及正確度結(jié)果表

表3 方法檢出限和定量限結(jié)果表

表4 正確度及精密度結(jié)果

正確度以不同濃度的汞標(biāo)準(zhǔn)溶液的回收率來(lái)表示，即汞標(biāo)準(zhǔn)溶液6次檢測(cè)結(jié)果的平均值與已知濃度的比值，其結(jié)果（見(jiàn)表2標(biāo)準(zhǔn)溶液變異系數(shù)及正確度結(jié)果表）符合GB/T 27417—2017中被測(cè)組分含量為＜100μg/L時(shí)方法回收率在60%～120%的要求。

2.2 線性范圍

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》中5.3線性范圍的確認(rèn)方法，對(duì)本方法的線性范圍進(jìn)行確認(rèn)，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)R2為0.998648，結(jié)果（見(jiàn)表1標(biāo)準(zhǔn)曲線線性）符合GB/T 27417—2017中對(duì)于準(zhǔn)確定量方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不低于0.99的要求。

2.3 檢出限和定量限

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》中5.4檢出限和定量限的驗(yàn)證方法，采用空白標(biāo)準(zhǔn)偏差法對(duì)本方法的檢出限進(jìn)行驗(yàn)證，方法的檢出限為空白試驗(yàn)的平均值與3倍的標(biāo)準(zhǔn)偏差之和，方法定量限為方法檢出限的3倍。故本方法的方法檢出限為0.014 μg/L，定量限為0.042μg/L，見(jiàn)表3。

2.4 正確度

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》中5.5正確度的確認(rèn)方法，采用加標(biāo)回收的方法對(duì)準(zhǔn)確度進(jìn)行確認(rèn)，方法回收率（見(jiàn)表4）符合GB/T 27417—2017中被測(cè)組分含量＜100μg/L時(shí)回收率在60%～120%的要求。

3 結(jié)論

本次研究依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》對(duì)GB 5009.17—2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中總汞及有機(jī)汞的測(cè)定》中汞含量的測(cè)定方法（原子熒光光譜分析法）進(jìn)行驗(yàn)證，驗(yàn)證參數(shù)中的測(cè)量范圍、線性范圍、正確度及精密度均符合相關(guān)要求。