李二潤*，路超亞

(寧波三江益農(nóng)化學(xué)有限公司，寧波 315204)

虱螨脲(lufenuron)是一種高效、安全、廣譜的苯甲酰脲類殺蟲劑，是昆蟲蛻皮抑制劑，抑制昆蟲幾丁質(zhì)的合成，主要用于防治棉花、果樹、玉米等鱗翅目害蟲幼蟲[1-2]。蟲螨腈(chlorfenapyr)是一種芳基吡咯類殺蟲殺螨劑，由天然抗生素改造合成。其作用于害蟲體內(nèi)細(xì)胞線粒體上，破壞細(xì)胞內(nèi)的能量產(chǎn)生過程，從而使細(xì)胞衰竭，最終導(dǎo)致害蟲死亡。該藥具有殺蟲譜廣，高效，與其他殺蟲藥劑無交互抗性，對作物安全，對抗性害蟲防效優(yōu)異等特點(diǎn)[3-4]。目前，虱螨脲、蟲螨腈單劑或與其他藥劑復(fù)配制劑的檢測方法已有報(bào)道，但二者復(fù)配產(chǎn)品的檢測方法未見報(bào)道。本文采用反相高效液相色譜法對24%虱螨脲·蟲螨腈懸浮劑中的虱螨脲和蟲螨腈同時(shí)進(jìn)行分離測定。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

美國安捷倫 HP1200型高效液相色譜儀，具有可變波長紫外檢測器；150×4.6 mm(i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝Eclipse XDB-C18，粒徑5 μm；KH7200DE超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司)；BSA224S萬分之一電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)；甲醇(色譜純)；水(二次重蒸餾)；虱螨脲標(biāo)樣(純度≥98.0%)，蟲螨腈標(biāo)樣(純度≥98.0%)；24%虱螨脲·蟲螨腈懸浮劑(5%虱螨脲+19%蟲螨腈，由寧波三江益農(nóng)化學(xué)有限公司研制)。

1.2 色譜操作條件

流動(dòng)相：甲醇∶水＝75∶25(體積比)；檢測波長：254 nm；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣體積：5 μL；柱溫：室溫。蟲螨腈的保留時(shí)間約為7.8 min；虱螨脲的保留時(shí)間約為10.9 min。

上述色譜操作條件系典型操作參數(shù)，檢測時(shí)可根據(jù)不同儀器特點(diǎn)，對方法中給定的操作參數(shù)作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以獲得最佳效果。虱螨脲、蟲螨腈標(biāo)樣和24%虱螨脲·蟲螨腈懸浮劑的典型的液相色譜圖見圖1、圖2。

圖1 虱螨脲、蟲螨腈標(biāo)樣的高效液相色譜圖

圖2 24%虱螨脲·蟲螨腈懸浮劑的高效液相色譜圖

1.3 溶液配制

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

分別稱取虱螨脲標(biāo)樣0.03 g、蟲螨腈標(biāo)樣 0.08 g(精確至0.000 1 g)，置于100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解，再用超聲波振蕩5 min使標(biāo)樣充分溶解，搖勻，定容至刻度。

1.3.2 試樣溶液的配制

準(zhǔn)確稱取試樣 0.4 g (精確至 0.000 02 g)，置于100 mL容量瓶中，加入適量流動(dòng)相溶解，再用超聲波振蕩5 min使試樣充分溶解，搖勻，定容至刻度，過0.45 μm有機(jī)系濾膜，待測。

1.4 測定

在上述色譜操作條件下，待儀器運(yùn)行穩(wěn)定后，先注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，當(dāng)連續(xù)兩針進(jìn)樣的峰面積相對偏差不大于1%時(shí)，再進(jìn)行定量分析。按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液順序進(jìn)樣。

1.5 計(jì)算

將測得的2針試樣溶液及試樣溶液前后2針標(biāo)樣溶液中虱螨脲(蟲螨腈)的峰面積分別進(jìn)行平均，試樣中虱螨脲(蟲螨腈)質(zhì)量分?jǐn)?shù)X按下式計(jì)算：

式中：A1為標(biāo)樣溶液中虱螨脲或蟲螨腈峰面積的平均值；A2為試樣溶液中虱螨脲或蟲螨腈峰面積的平均值；m1為虱螨脲或蟲螨腈標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為試樣的質(zhì)量，g；P為標(biāo)樣中虱螨脲或蟲螨腈的純度，%。

1.6 允許差

兩次平行測定結(jié)果之差，虱螨脲、蟲螨腈分別應(yīng)不大于0.3%、0.5%，取其算術(shù)平均值，作為測定結(jié)果。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測波長的選擇

通過Agilent 1200高效液相色譜儀的光譜數(shù)據(jù)采集功能，經(jīng)過全波長掃描，考慮到短波長處紫外吸收會(huì)有溶劑或助劑的干擾，同時(shí)兼顧虱螨脲和蟲螨腈的峰面積和峰高的差距盡量小，最終選擇254 nm作為虱螨脲、蟲螨腈的檢測波長。在該波長下2種有效成分液相色譜圖分離峰形都很好，響應(yīng)值和峰高比例都較為合適。

2.2 流動(dòng)相的選擇

試驗(yàn)選擇 Eclipse XDB-C18色譜柱，分別試用不同比例的甲醇+水、乙腈+水、甲醇+乙腈+水作為流動(dòng)相對試樣進(jìn)行分離檢測。經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，用甲醇+水=75+25(體積比)作為流動(dòng)相，流速控制在1.0 mL/min時(shí)，各組分能有效分離，無其他組分的干擾，且峰形尖銳、對稱，且保留時(shí)間適中，因此選用甲醇+水=75+25(體積比)作為流動(dòng)相。

2.3 分析方法的線性關(guān)系曲線

配制5個(gè)不同濃度的虱螨脲(蟲螨腈)標(biāo)樣溶液，在上述色譜條件下測定虱螨脲(蟲螨腈)，取兩次測定的平均值作為測定結(jié)果。以虱螨脲(蟲螨腈)的濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得到虱螨脲的回歸方程為y=1.865 0x+0.033 8,r=0.999 3(圖3)；蟲螨腈的回歸方程為y=1.668 6x-0.012 3,r=0.999 9 (圖4)。結(jié)果表明該方法的線性關(guān)系良好。

2.4 分析方法的精密度

在上述色譜操作條件下對同一個(gè) 24%虱螨脲·蟲螨腈懸浮劑試樣進(jìn)行10次平行測定。測得虱螨脲和蟲螨腈的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.04和0.07；變異系數(shù)分別為0.82%和0.35%(表1)。結(jié)果表明此方法的精密度能夠滿足定量分析的要求。

表1 24%虱螨脲·蟲螨腈懸浮劑精密度測定

圖3 虱螨脲相關(guān)線性關(guān)系圖

圖4 蟲螨腈相關(guān)線性關(guān)系圖

表2 24%虱螨脲·蟲螨腈懸浮劑回收率測定

2.5 分析方法的準(zhǔn)確度

在已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的24%虱螨脲·蟲螨腈懸浮劑中加入一定量的虱螨脲、蟲螨腈的標(biāo)樣，在上述色譜操作條件下進(jìn)行測定，計(jì)算每個(gè)試樣的回收率和平均回收率。得到虱螨脲的回收率為 99.28%～100.6%，平均回收率為99.80%；蟲螨腈的回收率為99.61%～100.3%，平均回收率為99.91%(表2)。由以上結(jié)果可知該方法具有較高的準(zhǔn)確度，滿足定量分析要求。

3 結(jié) 論

上述試驗(yàn)結(jié)果表明，本文中的分析方法擁有較好的分離效果，其精密度和準(zhǔn)確度較高，線性關(guān)系良好，具有省時(shí)、簡便、準(zhǔn)確度高的優(yōu)點(diǎn)，可以滿足生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)中的質(zhì)量控制要求，是此復(fù)配產(chǎn)品較理想的分析檢測方法。