邱時秀， 陳亞迎， 李 娟， 劉瀚揚， 徐麒麟， 吳永勝， 許禎瑩， 朱佳文， 雷春龍， 齊桂蘭

（成都市農(nóng)林科學(xué)院畜牧研究所，四川成都 611130）

中草藥飼料添加劑，是以中草藥為原料制成的飼料添加劑。中草藥源于自然，且有效成分組合天然合理，是用來替代化學(xué)類飼料添加劑的最佳天然藥物。動物源性食品安全是目前最受關(guān)注的問題，對動物源性食品安全威脅最大的是化學(xué)合成類飼料添加劑和飼用抗生素的普遍使用，其常導(dǎo)致這類物質(zhì)在動物體內(nèi)殘留超標(biāo)，引起病原微生物和寄生蟲等病原體產(chǎn)生抗藥性，嚴(yán)重的還可引起“致癌、致畸形和致突變”等后果。近幾年來，歐美等一些經(jīng)濟發(fā)達國家開始禁止在飼料中添加化學(xué)合成類飼料添加劑。歐盟從2006年開始全面禁用飼用飼料添加劑，澳大利亞等國家也開始限制飼用抗生素和治療用抗生素的使用。中草藥添加劑保持了其自然結(jié)構(gòu)和生物活性，并且其來源豐富、成本低廉、作用廣泛，既含有營養(yǎng)物質(zhì)，又具有驅(qū)蟲保健和防病治病作用，各國開始對天然藥物飼料添加劑和天然藥物的抗病原性、抗微生物功效進行深入研究。因此，飼料工業(yè)中開發(fā)應(yīng)用中草藥添加劑具有極其重要的意義。

本試驗以中獸醫(yī)基礎(chǔ)理論為依據(jù)，結(jié)合現(xiàn)代肉兔養(yǎng)殖生產(chǎn)情況，選用桑葉、菊花、黃柏、川芎、當(dāng)歸、金銀花等組成中草藥添加劑復(fù)方，經(jīng)加工制成不同的中草藥飼料添加劑添加于肉兔飼糧中，探討其對肉兔生產(chǎn)性能和免疫功能的影響，旨在揭示中草藥添加劑作用機理，為其應(yīng)用推廣提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 中草藥添加劑復(fù)方 選用桑葉、菊花、黃柏、川芎、當(dāng)歸、金銀花等多種中草藥原料，根據(jù)中草藥配伍原則，結(jié)合肉兔生理特點，按照不同配比形成4種中草藥添加劑復(fù)方，并且經(jīng)加工處理制成中草藥制劑。生產(chǎn)工藝流程：中草藥原料→除雜、干燥處理→粉碎機粉碎處理→按配方稱重→混合均勻→加工處理→裝袋封口待用。復(fù)方1：桑葉、菊花、黃柏、川芎、當(dāng)歸、山楂、神曲；復(fù)方2：桑葉、黃柏、川芎、當(dāng)歸、金銀花、山楂、神曲；復(fù)方 3：桑葉、菊花、黃柏、川芎、當(dāng)歸、陳皮、青皮；復(fù)方 4：桑葉、黃柏、川芎、當(dāng)歸、金銀花、陳皮、青皮。

1.2 試驗設(shè)計與試驗飼糧 試驗選取150只30日齡（斷奶）健康、體重相近的新西蘭公兔，按隨機區(qū)組設(shè)計分為5組，分別為對照組和I、II、III、IV組，試驗每組5個重復(fù)，每個重復(fù)6只，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧（原料組成及營養(yǎng)成分見表1），試驗組分別在基礎(chǔ)日糧中添加4種中草藥制劑，按每2 kg添加100 g中草藥制劑，飼養(yǎng)試驗為期40 d，其中試驗預(yù)飼期為6 d，正式試驗期為34 d。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 在成都市蒲江縣欣欣兔業(yè)新西蘭兔養(yǎng)殖場進行試驗。試驗肉兔采取半開放式籠養(yǎng)，自由采食和飲水，光照采用自然光照時長，地面光照強度為5 lx，按正常程序防疫和兔舍消毒。

1.4 樣品收集與處理

1.4.1 生產(chǎn)性能 試驗期開始后每日準(zhǔn)確測定采食量，試驗開始時稱量初始體重，結(jié)束時稱量末期體重，計算平均日增重，計算公式如下：

日采食量/g=當(dāng)天飼喂飼糧總重量-第二天早晨飼喂前剩余飼糧重量；

平均日增重/g=（末期平均體重-初始平均體重）/時間間隔。

1.4.2 血清生化、抗氧化及免疫指標(biāo) 試驗期第40天晚上停止喂料，第41天早上，每個重復(fù)隨機選取2只體重接近的健康肉兔，每個處理共10只，心臟采血，采集完的血液靜置過夜24 h，3000 r/min離心10 min，收集血清，裝入EP管中，于-20℃保存?zhèn)溆?，用于測定血清生化、抗氧化及免疫性能指標(biāo)。

血清生化指標(biāo)總蛋白（TP）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TCHO）、尿素氮（BUN）、血清酸性磷酸酶（ACP），均采用南京建成生物工程研究所的血液生化指標(biāo)檢測試劑盒進行測定。

血清超氧化物歧化酶（SOD）、總抗氧化能力（T-AOC）、乳酸脫氫酶（LDH）、干擾素-γ（IFN-γ）、白細胞介素-6（IL-6）、免疫球蛋白 G（IgG），均采用北京奇松生物有限公司的酶聯(lián)免疫試劑盒進行測定。

1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)采用SPSS 22軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理。方差分析使用One-way ANOVA，多重比較采用LSD法，P＜0.05為差異顯著。

2結(jié)果分析

2.1 飼糧中添加不同配比中草藥復(fù)合飼料添加劑對肉兔生產(chǎn)性能的影響 由表2可知，II、III、IV組末期重較對照組顯著升高（P＜0.05），四個中草藥添加組平均日采食量較對照組分別增加8.62%、7.24%、7.78%、9.71%，II、III組平均日增重較對照組提高，但差異不顯著。各試驗組料重比與對照組差異不顯著。

2.2 飼糧中添加不同配比中草藥復(fù)合飼料添加劑對肉兔血清生化指標(biāo)的影響 由表3可知，四個中草藥添加組血清膽固醇低于對照組，分別降低 19.32%（P ＞ 0.05）、49.24%（P ＜ 0.05）、25%（P＞ 0.05）、39.39%（P ＜ 0.05）；四個中草藥添加組血清甘油三酯顯著低于對照組（P＜0.05）；II組血清葡萄糖水平顯著提高 （P＜0.05），較對照組提高19.97%，I、III、IV 組與對照組差異不顯著；I、II、III、IV組血清總蛋白水平比對照組分別提高11.33%、4.27%、4.27%和24.18%，其中IV組血清總蛋白水平顯著高于對照組（P＜0.05）；各試驗組血清酸性磷酸酶含量較對照組有提高的趨勢，但差異不顯著 （P＞0.05）。各試驗組血清尿素氮含量與對照組差異不顯著（P＞0.05）。

表2 中草藥復(fù)合飼料添加劑對肉兔生長性能的影響

表3 中草藥復(fù)合飼料添加劑對肉兔血清生化指標(biāo)的影響

2.3 飼糧中添加不同配比中草藥復(fù)合飼料添加劑對肉兔血清抗氧化及免疫指標(biāo)的影響 由表4可知，四個中草藥添加組血清IgG均高于對照組，分別增加18.60%、49.16%、18.92%和9.69%，其中II組血清 IgG 水平顯著提高（P ＜ 0.05）；I、II組血清IFN-γ高于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）；四個中草藥添加組血清IL-6顯著高于對照組，分別提高 109.94%、179.78%、245.31%、207.68%（P＜0.05）。四個中草藥添加組血清LDH顯著低于對照組，分別比對照組降低61.41%、44.13%、58.01%和 86.35%（P ＜ 0.05）；II、III組血清 SOD 分別比對照組增加58.47%和17.81%，其中II組血清SOD 水平顯著提高 （P ＜ 0.05）；II、III組血清 TAOC高于對照組（P＞0.05）。

表4 中草藥復(fù)合飼料添加劑對肉兔血清抗氧化及免疫指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 飼糧中添加不同配比中草藥復(fù)合飼料添加劑對肉兔生產(chǎn)性能的影響 本試驗的中草藥飼料添加劑根據(jù)中獸醫(yī)學(xué)理論，采用清熱解毒、健脾開胃、補養(yǎng)氣血的原則，調(diào)整陰陽、祛邪逐疫，主要成分有：桑葉、菊花、黃柏、川芎、當(dāng)歸、山楂、神曲、金銀花、陳皮、青皮等中草藥組成。結(jié)果表明中草藥復(fù)方能夠不同程度的提高肉兔的平均日采食量和平均日增重。II、III組肉兔全期平均日采食量顯著高于對照組，平均日增重高于對照組，料重比小于對照組（P＞0.05），對肉兔的生長具有一定的促進作用。其原因可能是組方中川芎和當(dāng)歸益氣補血，可抗氧化清除自由基，提高防病能力；桑葉、黃柏、車前草、金銀花、菊花清熱消毒、抗菌消炎，可增強機體抗病能力；陳皮、青皮理氣健脾，可提高免疫力；山楂、神曲一起用藥，可加強消化，促進營養(yǎng)物質(zhì)吸收；因此在一定程度上可以改善動物的生長性能。 吳占福（2007）、許騰（2013）、王震等（2009）均利用不同中草藥組成不同復(fù)方中草藥添加劑添加到兔飼料中，結(jié)果均表明復(fù)方中草藥添加劑具有促進兔生長的作用。劉榮欣等（2013）報道，在肉用幼兔日糧中添加1.5%中草藥，幼兔平均日增重提高14.10%，飼料轉(zhuǎn)化率降低4.48%。這些報道結(jié)果均與本試驗結(jié)果一致，表明日糧中添加中草藥可以促進動物生長。然而其余中草藥添加組效果不顯著的原因可能是由于各試驗組所用中草藥略微不同，各中草藥的藥理作用不同所致，具體原因還有待于進一步研究。

3.2 飼糧中添加不同配比中草藥復(fù)合飼料添加劑對肉兔血清生化指標(biāo)的影響 本試驗結(jié)果表明，中草藥添加組血清總蛋白含量高于對照組。與祝國強等（2004）在肉雞中添加1%中草藥能提高血清總蛋白含量的結(jié)果相一致。血清總蛋白與尿素氮的水平可反映機體蛋白質(zhì)代謝水平，當(dāng)總蛋白含量升高或尿素氮含量降低，機體可能處于正氮平衡狀態(tài)，此時日糧中蛋白質(zhì)的吸收和利用率較高，利于動物生長（陳曉生等，2005）。試驗結(jié)果顯示II組血清葡萄糖水平顯著提高，四個中草藥添加組血清膽固醇及甘油三酯低于對照組。血清葡萄糖是體內(nèi)各組織細胞的主要能量來源，當(dāng)其在生理范圍內(nèi)升高時，機體自身免疫力及抗應(yīng)激能力增強，同時也表示動物對飼料中碳水化合物的利用率提高。復(fù)方中桑葉（王道營等，2011）、菊花（崔艷，2014）、川芎（黃世領(lǐng)等，1999）、當(dāng)歸（俞雷等，1999）、山楂（于蓓蓓等，2015）、金銀花（龍彬等，2018；王強等，2007）、陳皮 （李玲和陳常秀，2009）均有降低血清或組織中膽固醇及甘油三酯的作用。酸性磷酸酶（ACP）是動物體內(nèi)巨噬細胞溶酶體的標(biāo)志性酶，參與磷酸基團的轉(zhuǎn)移和代謝（柳淑琴，2012）。本研究中，投喂中草藥添加劑后ACP活性較對照組總體表現(xiàn)為上升趨勢，表明中草藥添加劑作為一種免疫增強劑增強了肉兔體內(nèi)非特異性免疫力。以上結(jié)果表明，中草藥添加劑能通過影響斷奶新西蘭兔對飼料中蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂類營養(yǎng)的利用，調(diào)節(jié)機體非特異性免疫及抗應(yīng)激能力。

3.3 飼糧中添加不同配比中草藥復(fù)合飼料添加劑對肉兔血清抗氧化及免疫指標(biāo)的影響 IgG是血液中含量最高的免疫球蛋白，在抗體介導(dǎo)的防衛(wèi)機理中占主要地位，IgG比其他免疫球蛋白更易逸出血管，參加體表和組織間的防衛(wèi)。IFN-γ是I型輔助T細胞的標(biāo)志性細胞因子，能夠激活抗原提呈細胞，可抑制變態(tài)反應(yīng)，調(diào)節(jié)細胞免疫水平。IL-6在B細胞生長分化時起關(guān)鍵作用，可在體液免疫中促進B細胞增殖和分化，分泌免疫球蛋白。結(jié)果顯示四個中草藥添加組血清IgG高于對照組，II組血清IFN-γ和IL-6水平提高，其值也是在正常范圍內(nèi)，表明添加中草藥添加劑能提高兔的體液和細胞免疫水平。與賈青輝等（2014）研究結(jié)果一致，五味子、甘露寡糖與益生素合用能提高肉雞免疫功能。

SOD、T-AOC等抗氧化酶類含量和活力往往被用作評價機體組織器官機能的重要指標(biāo)（Felver-Gant等，2014）。LDH存在于機體所有組織細胞的胞質(zhì)內(nèi)，當(dāng)心肌細胞損傷時，LDH從受損細胞內(nèi)釋放出來，進入血液中，致血液中LDH活性升高，因此，血清中LDH的量與心肌損傷和壞死程度呈正相關(guān)（王天等，2007）。本試驗結(jié)果顯示，中草藥添加組血清LDH水平顯著降低，II血清SOD水平顯著提高，II、III組血清T-AOC水平顯著提高。因此在新西蘭肉兔日糧中，添加中草藥添加劑復(fù)方可使機體血清 IgG、IFN-γ、IL-6、SOD和T-AOC活性顯著提高，血清LDH的含量減少，提高了機體整體抗氧化功能，從而有利于兔只生產(chǎn)性能和抗病力的充分發(fā)揮。

4 小結(jié)

飼糧中添加中草藥添加劑復(fù)方可調(diào)節(jié)斷奶新西蘭兔對飼料中蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂類營養(yǎng)的利用，提高機體免疫及抗氧化能力，有利于其生產(chǎn)性能的提高。