蔡言妮, 劉忠軍, 鞠貴春, 衛(wèi)功慶, 張愛(ài)武, 關(guān)軒承, 云祥鴻, 吳 旻
(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,吉林長(zhǎng)春 130118)
水貂作為一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值極高的毛皮動(dòng)物,以其毛絨豐富、保暖效果好等優(yōu)點(diǎn)深受人們喜愛(ài)。貂皮是世界裘皮業(yè)支柱之一,被美譽(yù)為“軟黃金”(高秀華,2014)。與其他單胃動(dòng)物相比,水貂胃容積較小,消化道較短,沒(méi)有盲腸,食物在消化道中停留的時(shí)間較短(黃永凱,2005)。丁酸梭菌能夠在動(dòng)物腸道內(nèi)產(chǎn)生B族維生素、維生素K、淀粉酶等多種物質(zhì),具有促進(jìn)消化、改善動(dòng)物腸道菌群平衡等多種生物學(xué)功能(趙敏孟,2018)。本研究以水貂作為試驗(yàn)動(dòng)物,研究丁酸梭菌對(duì)其生長(zhǎng)性能及免疫機(jī)能的影響,以期為研究丁酸梭菌的作用機(jī)制提供理論基礎(chǔ),并為丁酸梭菌在水貂養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供實(shí)踐依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧 將40只(60±5)日齡,體重相近[(1.08±0.05)kg]的健康雄性紅眼白貂,隨機(jī)分為4組,每組水貂數(shù)為10只。其中I組為對(duì)照組,飼喂水貂基礎(chǔ)日糧,II、III、IV組為試驗(yàn)組,分別飼喂添加 0.5×108、1×108、2×108cfu/g 丁酸梭菌的水貂基礎(chǔ)日糧。各組水貂均單籠單只飼養(yǎng),試驗(yàn)期為35 d,試驗(yàn)期間定時(shí)等量飼喂,自由飲水。
1.2 試驗(yàn)材料 丁酸梭菌購(gòu)自河南金百合生物科技有限公司 (1×1010cfu/g),T-SOD、CAT、MDA檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所,IgA檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海朗頓生物技術(shù)有限公司。
1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法
1.3.1 生長(zhǎng)性能 試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)稱(chēng)取每只水貂初始體重,試驗(yàn)結(jié)束后稱(chēng)取每只水貂末重,計(jì)算每組水貂體重變化及平均日增重。
1.3.2 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收水平 試驗(yàn)開(kāi)始第31天開(kāi)始,采用全收糞法收集5 d的糞便,并每天收集剩余料量,將每只水貂收集的全部糞樣和剩料混勻后,各取20 g經(jīng)10%的硫酸處理后,在65℃下烘干,粉碎過(guò)40目篩后測(cè)定各組水貂粗蛋白質(zhì)和粗脂肪的消化率。
1.3.3 血清樣本采集 試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)水貂進(jìn)行空腹采血,采血方法為使用戊巴比妥鈉麻醉后斷趾采血,血液收集完畢后止血,消毒傷口避免感染。所得血液使用3000 r/min離心10 min,收集血清進(jìn)行抗氧化及免疫水平指標(biāo)的測(cè)定。
1.3.4 血清抗氧化水平檢測(cè) 各組水貂血清抗氧化水平均使用試劑盒法測(cè)定,其中丙二醛(MDA)的含量采用硫代巴比妥酸(TBA)法測(cè)定,總超氧化物歧化酶 (T-SOD)活性采用黃嘌呤氧化酶法(羥胺法)測(cè)定,過(guò)氧化氫酶(CAT)活性采用鉬酸銨法測(cè)定。
1.3.5 血清IgA含量的測(cè)定 水貂血液IgA含量使用ELISA方法進(jìn)行測(cè)定。
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均在Excel進(jìn)行初步處理,采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 17.0中的one-way ANOVA過(guò)程進(jìn)行單因素方差分析,并使用GraphPad prism 6制圖。所有數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,其中P<0.05表示具有差異顯著性。
2.1 丁酸梭菌對(duì)水貂生長(zhǎng)性能的影響 丁酸梭菌對(duì)雄性紅眼白貂生長(zhǎng)性能的影響見(jiàn)表1。III、IV組水貂平均日增重較I組相比分別提高了22.4%、28.4%(P < 0.05),II組與 I組相比差異不顯著(P>0.05)。說(shuō)明飼料中添加丁酸梭菌能夠提高水貂生長(zhǎng)性能。
表1 丁酸梭菌對(duì)水貂生長(zhǎng)性能的影響
2.2 丁酸梭菌對(duì)水貂營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響 丁酸梭菌對(duì)水貂飼糧中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪消化率的影響見(jiàn)表 2。與 I組相比,II、III、IV 水貂粗脂肪消化率分別提高了17.2%、17.3%、15.4%(P<0.05)。各組粗蛋白質(zhì)消化率與I組相比差異不顯著。說(shuō)明飼料中添加丁酸梭菌能夠提高水貂脂肪消化率,對(duì)蛋白質(zhì)消化率無(wú)顯著影響。
表2 丁酸梭菌對(duì)水貂粗蛋白質(zhì)、粗脂肪消化率的影響%
2.3 丁酸梭菌對(duì)水貂血清抗氧化性指標(biāo)的影響由圖 1可知,與 I組相比,II、III、IV水貂血清MDA含量分別降低了40.2%、49.4%、51.7%,均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。由圖2可知,與對(duì)照組相比,Ⅱ組水貂血清中T-SOD活性顯著升高(P<0.05),提高了25.3%。Ⅲ、Ⅳ組與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異(P > 0.05)。 與 I組相比,II、III、IV 水貂血清中CAT活性分別提高86.9%、36.6%、36.9%(P<0.05)。說(shuō)明飼料中添加丁酸梭菌能夠增強(qiáng)水貂的抗氧化性能。
2.4 丁酸梭菌對(duì)水貂血清免疫指標(biāo)的影響 由圖 3可知,與 I組相比,II、III、IV 水貂血清 IgA 含量分別提高了 136.1%、383.3%、125.0%(P<0.05),其中Ⅲ組血清中IgA含量最高。說(shuō)明日糧中添加丁酸梭菌后可以提高水貂血清IgA的含量。
3.1 丁酸梭菌對(duì)水貂生長(zhǎng)性能的影響 丁酸梭菌能夠提高多種家畜家禽以及水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能。楊玲(2018)等研究表明,斷奶仔豬飼糧中添加含有丁酸梭菌的復(fù)合益生菌能夠顯著提高仔豬的生長(zhǎng)性能。劉亭婷(2012)等研究表明,蛋用仔公雞飼料中添加1000 mg/kg的丁酸梭菌能夠顯著提高平均體重和平均日增重。賈志新(2014)研究表明,櫻桃谷肉鴨飼料中添加丁酸梭菌能夠促進(jìn)其前期生長(zhǎng),提高平均日增重。動(dòng)物飼料中添加適量的丁酸梭菌能促進(jìn)其生長(zhǎng),原因可能是丁酸梭菌在胃腸道內(nèi)分泌的一些丁酸代謝產(chǎn)物能夠使胃腸道的一些消化酶活性增強(qiáng),從而促進(jìn)動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用,對(duì)家畜生長(zhǎng)起促進(jìn)作用。本研究結(jié)果顯示,丁酸梭菌能夠提高水貂平均日增重,與楊玲(2018)等研究結(jié)果相似。
3.2 丁酸梭菌對(duì)水貂營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響丁酸梭菌能夠分泌多種酶類(lèi),對(duì)動(dòng)物胃腸道內(nèi)源性消化系統(tǒng)起輔助作用,能夠提高多種動(dòng)物腸道消化機(jī)能。袁文華(2018)等研究表明,肉鴿飼料中添加 5×109cfu/kg乳酸菌和 1×108cfu/kg丁酸梭菌能夠顯著提高其十二指腸內(nèi)蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性,促進(jìn)肉鴿對(duì)蛋白質(zhì)、脂肪和淀粉的消化吸收。史煥(2016)研究表明,育成豬飼料中添加丁酸梭菌能夠提高飼料消化性能,降低料重比,提高經(jīng)濟(jì)效益。本研究結(jié)果表明,丁酸梭菌能夠提高水貂脂肪消化率,與袁文華(2018)等研究結(jié)果相似。
3.3 丁酸梭菌對(duì)水貂血清抗氧化性指標(biāo)的影響丁酸梭菌具有提高動(dòng)物抗氧化能力的作用。黃靈(2017)研究表明,虎龍斑幼魚(yú)飼料中添加含有丁酸梭菌的復(fù)合益生菌能夠提高其血清SOD活性。耿正穎(2018)等研究表明,斷奶仔豬飼料中添加丁酸梭菌能夠顯著增加血清T-SOD含量,說(shuō)明日糧中添加丁酸梭菌可以提高斷奶仔豬抗氧化能力。李文茜等研究表明斷奶期犢牛飼糧中添加2.0×108cfu/kg丁酸梭菌能夠降低血清 MDA的含量,有效緩解犢牛的斷奶應(yīng)激。本試驗(yàn)在水貂日糧中添加丁酸梭菌能夠顯著提高水貂血清SOD及CAT活性,顯著降低血清MDA含量,與黃靈(2017)等研究結(jié)果相似。
3.4 丁酸梭菌對(duì)水貂血清免疫指標(biāo)的影響 丁酸梭菌能夠通過(guò)改善腸道結(jié)構(gòu)和屏障功能,提升動(dòng)物機(jī)體免疫能力(林華林,2019)。劉磊(2018)等研究表明,獺兔日糧中添加丁酸梭菌能夠調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡,促進(jìn)緊密連接蛋白表達(dá),從而增強(qiáng)其機(jī)體免疫力。鄭有秀(2018)等研究表明,飼料中添加丁酸梭菌能夠改善斷奶仔豬腸道形態(tài),顯著提高其血清中IgA、IgG濃度,從而減輕仔豬的斷奶應(yīng)激反應(yīng)。本研究結(jié)果表明,丁酸梭菌能夠顯著提高水貂血清IgA含量,提高水貂的免疫力。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧中添加不同水平丁酸梭菌均能提高水貂平均日增重、脂肪消化率、血清中IgA的含量及抗氧化酶活性,均能顯著降低水貂血清MDA水平。說(shuō)明飼料中添加丁酸梭菌能夠提高水貂生長(zhǎng)性能、抗氧化及免疫功能。本試驗(yàn)條件下,以0.5×108cfu/g丁酸梭菌添加劑量效果最佳。