王秀芬 李靜 方光明

[摘要] 枸杞子為藥食兩用滋補(bǔ)類中藥材，藥用始見于《神農(nóng)本草經(jīng)》。枸杞子中含有枸杞多糖、枸杞黃酮、維生素、微量元素、氨基酸等多種成分，具有較高的藥用價值和營養(yǎng)價值。隨著對枸杞子質(zhì)量評價研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)不同種質(zhì)、產(chǎn)地、采收時間、加工方式對枸杞子外觀形態(tài)特征和營養(yǎng)成分含量有顯著性影響。傅里葉變換紅外光譜學(xué)、高效液相色譜法、NOSE、DNA等技術(shù)被應(yīng)用于枸杞子鑒別及指紋圖譜研究，可快速區(qū)分不同產(chǎn)地和不同品種枸杞。多種新技術(shù)、新方法被應(yīng)用于枸杞多糖、甜菜堿、黃酮類、胡蘿卜素類、有機(jī)酸、維生素、微量元素等活性成分定量檢測中。枸杞有機(jī)氯、有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留組分檢測不斷增加，提升了安全性評價水平。這些相關(guān)研究成果，為枸杞子的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升和產(chǎn)業(yè)的深度發(fā)展提供價值參考。

[關(guān)鍵詞] 枸杞子;質(zhì)量影響因素;定量檢測;質(zhì)量評價;研究進(jìn)展

[中圖分類號] R282? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2020）08（a）-0046-04

[Abstract] Lycium barbarum is food and nutritious Chinese medicinal material， and its medicinal use began in Shen Nong′s Herbal Classic. Lycium barbarum contains many components such as Lycium barbarum polysaccharide， Lycium barbarum medlar flavonoids， vitamins， trace elements， amino acids， etc.， and has high medicinal value and nutritional value. With the deepening of the quality evaluation research， it was found that different germplasm， producing area， harvesting time and processing method had significant influence on the appearance， morphological characteristics and nutrient content of Lycium barbarum. Fourier transform infrared spectroscopy， high performance liquid chromatography， NOSE， DNA and other technologies are applied to the identification and fingerprinting of Lycium barbarum， which can quickly distinguish its origin and variety. A variety of new technologies and methods have been applied to the quantitative detection of active ingredients such as Lycium barbarum polysaccharides， betaines， flavones， carotene， organic acids， vitamins， and trace elements. The detection of organochlorine and organophosphorus pesticide residues in Lycium barbarum has improved the safety evaluation level. These related research results provide a valuable reference for the improvement of the quality standard of Lycium barbarum and the in-depth development of the industry.

[Key words] Lycium barbarum; Quality influencing factors; Quantitative detection; Quality evaluation; Research progress

枸杞子為茄科植物寧夏枸杞（Lycium barbarum L.）的干燥成熟果實(shí)，《神農(nóng)本草經(jīng)》中對枸杞有“久服輕身不老”的評價[1]。枸杞子具有滋補(bǔ)肝腎、益精明目的功效。藥理學(xué)研究顯示，枸杞子具有提高免疫力、清除自由基、抗氧化、抗腫瘤、保肝、神經(jīng)保護(hù)等多種藥理作用[2]。隨著人們保健意識的增強(qiáng)，枸杞子的營養(yǎng)價值日益受到重視，應(yīng)用前景廣闊。本文對枸杞子的產(chǎn)地、種質(zhì)、加工方式、含量檢測、指紋圖譜、安全測評等方面的質(zhì)量評價相關(guān)研究成果進(jìn)行綜述，以期為枸杞的綜合開發(fā)、質(zhì)量控制及進(jìn)一步深入研究提供借鑒和參考。

1 枸杞子質(zhì)量影響因素研究

受種質(zhì)資源、產(chǎn)地、采收時間和加工方式不同，枸杞子質(zhì)量存在一定程度的差異。

1.1 不同種質(zhì)影響

隨著枸杞產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，枸杞栽培面積不斷擴(kuò)大，培育的枸杞新品種被大量栽培種植。枸杞果實(shí)外觀形態(tài)和營養(yǎng)成分含量直接影響枸杞種質(zhì)資源的優(yōu)劣。王秀芬等[3]通過倍體式顯微鏡對寧杞系列不同品種枸杞子的形態(tài)特征進(jìn)行比較研究，發(fā)現(xiàn)不同種質(zhì)枸杞的形狀、縱橫徑、顏色、甜度、果實(shí)百粒重、種子千粒重、籽實(shí)比存在顯著性差異。述小英等[4]對不同種質(zhì)的枸杞果實(shí)營養(yǎng)成分含量測定，利用主成分和聚類分析進(jìn)行綜合評價，發(fā)現(xiàn)不同種質(zhì)間枸杞多糖、甜菜堿、黃酮類化合物、類胡蘿卜素的含量存在顯著性差異，可以此進(jìn)行枸杞新品種選育。枸杞種質(zhì)資源篩選要將枸杞果實(shí)的形態(tài)特征和營養(yǎng)成份含量兩大因素結(jié)合，全面優(yōu)化篩選條件，綜合進(jìn)行品質(zhì)評價。

1.2 不同產(chǎn)地影響

相同的枸杞種質(zhì)在不同地區(qū)進(jìn)行栽培，受水文環(huán)境、氣候等因素影響，枸杞質(zhì)量存在差異。崔治家等[5]以枸杞多糖為指標(biāo)評價不同產(chǎn)地枸杞子的質(zhì)量。高海拔、日照長、早晚溫差大的青海產(chǎn)區(qū)枸杞多糖的含量最高，枸杞多糖含量受地理環(huán)境、氣候因素影響較大。劉毅等[6]采用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法測定國內(nèi)不同產(chǎn)區(qū)枸杞子中微量元素含量，其中鐵、鋅、銅、錳4種微量元素存在顯著性差異。提示枸杞中的微量元素含量與土壤、大氣、水源及植物固有的生物學(xué)特性有關(guān)。李靜等[7]通過對不同產(chǎn)區(qū)枸杞子中枸杞多糖、蛋白質(zhì)、維生素和柚皮苷的含量與生態(tài)環(huán)境因子之間的相關(guān)性進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)枸杞中百分含量占比高的化學(xué)成分受氣候因素影響較大，占比低的化學(xué)成分受土壤因素影響較大，且不同產(chǎn)區(qū)枸杞子4個成分含量存在顯著性差異。中藥材活性物質(zhì)的積累與生長的地域和環(huán)境密切相關(guān)，藥材的質(zhì)量評價需注重生長環(huán)境、療效和活性物質(zhì)的關(guān)聯(lián)性，進(jìn)行綜合評價。

1.3 不同采收時間影響

枸杞果實(shí)為間歇式成熟，其中夏果枸杞果粒飽滿、顏色鮮艷、甜度高，出汁率高;秋果枸杞果粒小、顏色偏黃、籽多、出汁率低。明鶴等[8]分析7月下旬～10月上旬采收的枸杞子樣品中枸杞多糖和甜菜堿含量，發(fā)現(xiàn)7月下旬采收的枸杞子成分含量最高，10月上旬采收的含量最低。隨著枸杞果實(shí)成熟時間推遲，枸杞多糖和甜菜堿的含量逐漸降低。

1.4 不同加工方式影響

枸杞鮮果傳統(tǒng)的加工方法主要是晾曬法，隨著科學(xué)技術(shù)水平不斷進(jìn)步，短時、高效、鎖色的干燥技術(shù)不斷應(yīng)用于枸杞鮮果的加工，不同的加工方法對枸杞品質(zhì)有一定的影響。吳中華等[9]通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)采用恒溫恒濕干燥，枸杞色澤較差、多糖含量低;采用階段變溫干燥，枸杞營養(yǎng)色澤俱佳。艾百拉·熱合曼等[10]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)采用自然晾曬干燥處理的枸杞營養(yǎng)成分損失較小，其色澤、類胡蘿卜素、氨基酸、甜菜堿含量均優(yōu)于除蠟熱烘枸杞，而多糖、抗壞血酸、總酚和總黃酮含量方面無顯著性差異。謝龍[11]采用真空脈動干燥，對枸杞進(jìn)行升降壓循環(huán)，不僅效率高且能較好保留營養(yǎng)成分。劉旭霞等[12]采用高效液相色譜法指紋圖譜對自然晾干、設(shè)備干燥和非脫蠟干燥的枸杞子進(jìn)行識別。自然晾干、設(shè)備干燥樣品相似度均大于0.900，而非脫蠟干燥樣品相似度為0.759。提示自然晾干和設(shè)備干燥與非脫蠟干燥樣品間的營養(yǎng)物質(zhì)含量存在較大差異。枸杞產(chǎn)地加工中，有些農(nóng)戶為了保持枸杞的色澤鮮艷，采用硫磺熏蒸技術(shù)。蔣金花[13]采用不同劑量的硫磺熏蒸枸杞并與未熏枸杞進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)枸杞經(jīng)熏蒸后，色澤鮮亮紅潤，有刺鼻氣味，口感酸澀略苦，含水量、SO2殘留量和重金屬的含量均有增加，甜菜堿、類胡蘿卜素、蛋白質(zhì)含量及抗氧化活性均降低。鮮枸杞的干燥目前是枸杞產(chǎn)地加工過程中一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)，如何做到枸杞鮮果快速干燥、營養(yǎng)成分流失少，仍需要進(jìn)一步進(jìn)行深入研究。

綜上所述，枸杞質(zhì)量的影響因素包括枸杞生長的生態(tài)條件和加工過程的技術(shù)水平。通過對不同種質(zhì)、產(chǎn)地，不同加工方式的枸杞進(jìn)行質(zhì)量評價，以便篩選出最佳的種質(zhì)資源和鮮果制干技術(shù)。

2 枸杞產(chǎn)地快速鑒別研究

隨著檢測分析手段的進(jìn)步，紅外吸收光譜、高效液相色譜、電子鼻技術(shù)不斷被應(yīng)用到枸杞產(chǎn)地的快速鑒別研究中。王秀芬等[14]利用傅里葉變換紅外光譜儀采集寧夏、內(nèi)蒙古、甘肅、青海枸杞子MIR圖譜，采用二維相關(guān)技術(shù)對4個產(chǎn)區(qū)枸杞子進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)寧夏枸杞子的多糖類及糖苷類物質(zhì)的吸收峰高于其他產(chǎn)區(qū);在1520～1800/cm波段內(nèi)，寧夏枸杞子自動吸收峰少于其他產(chǎn)區(qū)，反映不同產(chǎn)區(qū)枸杞子的差異。崔治家等[15]利用電子鼻采集不同產(chǎn)地枸杞子樣品氣味信息，采用主成分分析法分析每個樣品對應(yīng)傳感器的響應(yīng)值，根據(jù)枸杞子氣味差異鑒別不同產(chǎn)區(qū)的枸杞。應(yīng)用先進(jìn)檢測手段能夠快速識別寧夏道地產(chǎn)區(qū)枸杞，但目前的快速鑒別方法局限在實(shí)驗(yàn)室操作，在枸杞流通市場，如何采用手持便攜式儀器現(xiàn)場對不同產(chǎn)區(qū)枸杞藥材進(jìn)行快速區(qū)分，需要進(jìn)一步研究。

3 營養(yǎng)成分定量檢測研究

枸杞中含有的營養(yǎng)成分為枸杞多糖、甜菜堿、胡蘿卜素、有機(jī)酸、維生素、微量元素等，是枸杞子的主要活性成分，目前其質(zhì)量評價研究主要集中在對以上成分的質(zhì)量分析上。

3.1 枸杞多糖

《中國藥典》[16]2015年版規(guī)定采用苯酚-硫酸法，以無水葡萄糖為對照品，利用紫外分光光度法測定枸杞多糖含量。李良等[17]對苯酚-硫酸法進(jìn)行改良，將試驗(yàn)反應(yīng)溫度、終止反應(yīng)方法進(jìn)行優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)改良后的方法相對誤差較小，穩(wěn)定性較好，提高效率。劉源才等[18]對枸杞多糖含量測定方法進(jìn)行改進(jìn)和優(yōu)化，將枸杞多糖進(jìn)行水解和衍生化處理，采用氣相色譜法測定中性糖，高效液相色譜法測定糖醛酸，以各單糖的含量比例配制混合溶液做為標(biāo)準(zhǔn)溶液，用苯酚-硫酸比色法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行枸杞多糖含量測定。改進(jìn)后的方法與以葡萄糖做標(biāo)準(zhǔn)溶液比較，誤差大幅下降，該方法的應(yīng)用為枸杞多糖的質(zhì)量控制提供新的選擇。

3.2 甜菜堿

甜菜堿是枸杞主要的活性成分，《中國藥典》[16]2015年版收載枸杞中甜菜堿的含量測定方法為薄層色譜掃描法。通過文獻(xiàn)整理，甜菜堿的定量測定方法還有高效液相色譜法、LC-MS/MS法和離子色譜法等。陳晶等[19]以甲醇加熱回流提取，堿性氧化鋁柱純化處理樣品，高效液相色譜—紫外法測定枸杞子中甜菜堿的含量，通過優(yōu)化樣品處理，減少干擾因素，提高實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性。莊紅艷等[20]建立離子色譜法分析枸杞子中甜菜堿的含量，采用陽離子交換色譜柱，甲基磺酸為流動相，等度洗脫，可用于枸杞子內(nèi)在質(zhì)量的綜合評價和全面控制。吳英健等[21]采用高效液相色譜-電噴霧檢測器法測定枸杞子中甜菜堿的含量。高效液相色譜法具有簡便、高效、靈敏度及準(zhǔn)確度好的優(yōu)點(diǎn)，可以作為枸杞子中甜菜堿的含量測定方法。

3.3 其他營養(yǎng)成分

隨著枸杞研究的進(jìn)一步深入，枸杞子營養(yǎng)成分含量測定方面的研究逐漸增多。檢測的成分除枸杞多糖、甜菜堿外，還有微量元素、有機(jī)酸類、維生素類及酯類化合物等。何飛龍等[22]以微波消解處理樣品，采用電感耦合等離子體發(fā)射光譜法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法對枸杞子中鎂、鐵、鋅、鉀、鈉等24種元素進(jìn)行檢測，其中鉀、鈉、磷、鎂的含量相對較高。李佳興等[23-24]采用超高液相色譜-三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜法建立枸杞子藥材中12種有機(jī)酸和8種水溶性維生素的含量測定方法，該法可用于對枸杞子中的多種有機(jī)酸如水楊酸、香草酸、肉桂酸和原兒茶酸等和多種維生素核黃素、磷酸腺嘌呤（VB4）、煙酸、維生素C、煙酰胺等同步分析，為枸杞子的營養(yǎng)價值測評，開發(fā)枸杞系列保健食品提供參考。杜娜娜[25]將枸杞子粉末回流提取，采用高效液相色譜-二極管陣列檢測器法梯度洗脫，測定枸杞中黃酮類成分蘆丁的含量。白光燦等[26]以石油醚∶丙酮（2∶1）為提取溶劑，采用高效液相色譜法同時測定枸杞子中色素類成分β-胡蘿卜素、玉米黃素、玉米黃素雙棕櫚酸酯3個組分的含量，該法為進(jìn)一步研究枸杞子在加工貯藏中的顏色變化提供參考。

4 色譜指紋圖譜研究

中藥指紋圖譜技術(shù)可以較全面地反映中藥化學(xué)成分的種類與數(shù)量，能提供大量的有關(guān)化合物組成和結(jié)構(gòu)的信息，進(jìn)而反映中藥材的質(zhì)量和藥效。隨著現(xiàn)代分析技術(shù)的發(fā)展，中藥指紋圖譜技術(shù)已成為國際認(rèn)可的中藥材質(zhì)量控制和分析手段。劉旭霞等[27]采集34批枸杞子樣品，確定28個共有峰做為指紋圖譜的特征峰，構(gòu)建枸杞子的高效液相色譜法指紋圖譜，為枸杞子的質(zhì)量評價提供依據(jù)。劉明地等[28]采用傅里葉變換紅外光譜學(xué)法采集青海不同產(chǎn)地枸杞的紅外譜圖，建立枸杞的對照紅外指紋圖譜，并計算樣品圖譜和對照指紋圖譜的相似度，以此對枸杞藥材進(jìn)行質(zhì)量評價。尹躍等[29]采用簡單重復(fù)序列熒光標(biāo)記技術(shù)建立枸杞子DNA指紋圖譜，其中4對引物SF1、SF30、SF63、SF92可明顯區(qū)分枸杞品種，為枸杞子的質(zhì)量評價及鑒別提供新的方法。

5 安全性評價指標(biāo)研究

隨著中醫(yī)藥現(xiàn)代化和國際化進(jìn)程的加快，中藥材的安全性問題是中藥走向世界的關(guān)鍵。中藥材農(nóng)藥殘留、重金屬及有害元素超標(biāo)等安全性問題日益凸顯。姜濤等[30]利用電感耦合等離子體質(zhì)譜法測定枸杞子中砷、鉛、鎘、汞、銅5種重金屬的含量，該方法檢測的32批樣品重金屬含量均低于中國藥典限度。方翠芬等[31]將枸杞子樣品用乙酸乙酯提取濃縮后，采用GC-MS/MS對枸杞子中有機(jī)氯、有機(jī)磷、擬除蟲菊酯和三唑類的23種農(nóng)藥殘留量進(jìn)行測定，可用于枸杞子中農(nóng)藥殘留量的控制。杜娜娜[25]采用氣相色譜法，電子俘獲檢測器同時對枸杞子中艾氏劑、狄試劑、異狄氏劑進(jìn)行檢測，可用于枸杞藥材安全性評價。

農(nóng)藥殘留是制約中藥材走向世界的一個關(guān)鍵因素。農(nóng)藥的使用方法和使用劑量、生態(tài)環(huán)境因素、農(nóng)藥自身性質(zhì)等都是農(nóng)藥殘留的主要影響因素。枸杞子做為藥食同源品種，需要進(jìn)一步加強(qiáng)安全性評價研究。

6 結(jié)語與展望

中醫(yī)藥真正走向世界舞臺，必須做到安全、有效和質(zhì)量可控。在中藥材走向國際市場的進(jìn)程中，如何進(jìn)行科學(xué)有效的質(zhì)量評價研究是中醫(yī)藥研究的難點(diǎn)之一。隨著現(xiàn)代分析技術(shù)和檢測設(shè)備的快速發(fā)展，枸杞子的質(zhì)量評價及分析方法呈多元化發(fā)展。在選擇評價方法時，應(yīng)綜合考慮藥材本身的生物學(xué)特征，活性成分和藥理作用，選擇適宜的方法評價枸杞子的質(zhì)量。

中藥材因其成分的多樣性，現(xiàn)行的中藥質(zhì)量評價及控制方法難以客觀反映中藥存在的質(zhì)量問題，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中所設(shè)定的評價指標(biāo)和中藥的有效性、安全性關(guān)聯(lián)不強(qiáng)。為提升我國中藥及其成品質(zhì)量，劉昌孝院士對中藥生物屬性、制造過程及配伍理論等自身醫(yī)藥體系的特點(diǎn)，提出中藥質(zhì)量標(biāo)志物的新概念，為中藥質(zhì)量控制提供了新思路。質(zhì)量標(biāo)志物注重“中藥有效性—物質(zhì)基礎(chǔ)—質(zhì)量控制標(biāo)志性成分”的關(guān)聯(lián)度，著眼于中藥材生產(chǎn)全過程物質(zhì)基礎(chǔ)的動態(tài)變化和質(zhì)量的傳遞性及溯源性，有利于建立中藥及其產(chǎn)品全程質(zhì)量控制及質(zhì)量溯源體系[32]。有研究人員通過實(shí)驗(yàn)確定枸杞子水溶性部位中具有紫外吸收的成分為亞精胺類、二咖啡酰亞精胺類及其糖苷類化合物;通過對不同品種的枸杞子進(jìn)行代謝輪廓分析，該類成分的種類及組成比例在寧夏枸杞、中華枸杞和黑果枸杞中存在顯著性差異;二咖啡酰亞精胺類成分具有顯著的抗AD活性，提出亞精胺類成分及其衍生物可作為枸杞子的質(zhì)量控制的標(biāo)志物設(shè)想。枸杞子質(zhì)量標(biāo)志物的提出為建立科學(xué)合理的枸杞子質(zhì)量評價提供了參考，需要進(jìn)一步進(jìn)行深入研究，推進(jìn)枸杞子標(biāo)準(zhǔn)的提升和國際化。

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（收稿日期：2020-02-19）