錢紅姣，鄭錦利，陳 倫，曾義協(xié)

1.福建醫(yī)科大學(xué)附屬閩東醫(yī)院小兒內(nèi)科，福建福安 355000；2.福建醫(yī)科大學(xué)附屬閩東醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建福安 355000；3.寧德師范學(xué)院醫(yī)學(xué)院，福建寧德 352000

為了解閩東地區(qū)呼吸道感染患兒中，肺炎支原體(MP)、肺炎衣原體(CP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒甲型(IVA)、流感病毒乙型(IVB)、副流感病毒(PIV 1、2、3)、嗜肺軍團(tuán)菌(LP)、Q熱立克次體(Q fever)感染情況，為臨床檢驗(yàn)和用藥提供參考依據(jù)，本文統(tǒng)計(jì)了閩東地區(qū)2017年1月至2018年12月某三甲醫(yī)院7 967例由于呼吸道感染住院的患兒上述9種病原體IgM聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果，然后對(duì)結(jié)果進(jìn)行了分析討論。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017年1月至2018年12月由于呼吸道感染收入福建醫(yī)科大學(xué)附屬閩東醫(yī)院住院的小兒(不包括新生兒)共7 967例為研究對(duì)象，參照第8版《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》標(biāo)準(zhǔn)，均符合小兒呼吸道感染的診斷[1]。2017年3 447例，2018年4 520例；男4 767例，女3 200例，男∶女為1.49∶1；年齡29 d至14歲，其中≤1歲(嬰兒組)3 052例，>1～3歲(幼兒組)3 368例，>3歲(大童組)1 547例。

1.2儀器與試劑 采取間接免疫熒光法(IFA)檢測(cè)9種病原體特異性IgM，試劑盒由鄭州安圖生物工程股份有限公司提供。使用德國(guó)LEICA DM3000熒光顯微鏡進(jìn)行結(jié)果判讀。

1.3方法 用非抗凝真空管取靜脈血3 mL，然后獲得離心血清。嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，按1∶1稀釋血清→加吸附劑混合→離心出上清液→點(diǎn)于載玻片孔上→37 ℃溫育90 min→磷酸鹽緩沖液(PBS)洗2次，蒸餾水洗1次→晾干→加入熒光素標(biāo)記抗人IgM FITC結(jié)合物→37 ℃溫育30 min→PBS洗2次，蒸餾水洗1次→自然晾干→加入封閉介質(zhì)，蓋上玻片→顯微鏡(熒光)下讀片→細(xì)胞膜、胞質(zhì)或細(xì)胞核見(jiàn)綠色熒光，判為陽(yáng)性(有陰性對(duì)照)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Excel 2003和SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1病原體檢出情況 7 967例患兒中，檢出病原體陽(yáng)性共1 639例，其中2017年826例，2018年813例。病原體陽(yáng)性總檢出率為20.57%。9種常見(jiàn)呼吸道病原體檢出率從高到低依次為MP>RSV>PIV>IVB>ADV>LP>CP>Q fever>IVA。MP檢出率為11.64%，明顯高于其余8種病原體(P<0.05)。見(jiàn)表1。

2.2病原體在不同年齡患兒中的分布 MP嬰兒組檢出率明顯低于其他兩組(P<0.05)。RSV嬰兒組檢出率高于其他組(P<0.05)。PIV嬰兒組檢出率低于其他組(P<0.05)。ADV幼兒組檢出率高于其他組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 3個(gè)年齡組病原體檢出率(%)

2.3病原體月份分布 由于其他6種病原體檢出率低，故圖1只呈現(xiàn)了MP、PIV、RSV的月份分布。從該圖可以看出，MP檢出率高峰在2017年4月(18.96%)，低谷在2018年1月和9月，PIV檢出率高峰在2017年6月(11.36%)；RSV整年檢出率都低，變化幅度小，小高峰在2018年2月(6.26%)。

注：1～12代表2017年1～12月，13～24代表2018年1～12月。

2.4病原體季節(jié)分布 從表2可看出，9種病原體檢出率春季為26.3%，夏季為19.2%，秋季為15.4%，冬季為18.4%。9種病原體總檢出率在季節(jié)間進(jìn)行比較，春季和其他三季兩兩相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，春季最高，秋季最低(秋季與冬季、夏季比較，P<0.05)；夏、冬季相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。單項(xiàng)比較，MP檢出率在春季高于其他三季(P<0.05)；RSV檢出率在夏季低于其他三季(P<0.05)；PIV檢出率在春夏高，秋季低(P<0.05)；ADV檢出率在冬季低于春季(P<0.05)。

表2 不同季節(jié)病原體檢出情況(n)

2.5病原體在不同性別患兒中的分布 MP檢出率不同性別中進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，女性檢出率高于男性。IVB、LP、CP、RSV、PIV、ADV檢出率男女比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表3。

表3 男女患兒病原體檢出情況(n)

3 討 論

住院患兒中，呼吸道感染疾病占60%以上，絕大多數(shù)為肺炎，多種病原體可引起急性呼吸道感染，其中90%以上的病原體為病毒[2]。而在實(shí)際臨床工作中，到底是什么病原體導(dǎo)致這些患兒呼吸道感染呢？本研究采用多種病原體聯(lián)合檢測(cè)方法，檢測(cè)9種非典型病原體，兩年內(nèi)病原體總檢出率為20.57%，低于2016-2017年寧德地區(qū)兒童的檢出率(30.94%)[3]，低于2015-2016年?？诘貐^(qū)全年齡段檢出率(29.28%)[4]。不同省市地區(qū)的檢出率有明顯差異，可見(jiàn)，監(jiān)測(cè)的年齡、性別、環(huán)境、地域、氣候不同，結(jié)果可能就有所不同。

本研究檢出率處于前3位的依次是MP、RSV、PIV，與2016-2017年寧德地區(qū)[3]基本一致，與?？诘貐^(qū)[4]差別大。本研究MP檢出率11.64%，明顯高于其余8種病原體，與2016-2017年寧德地區(qū)[3]一致，與?？诘貐^(qū)[4]一致。MP感染已成為醫(yī)師尤其是兒科醫(yī)師關(guān)注的焦點(diǎn)之一，原因在于它的高發(fā)病率和檢出率[1]。姜薇[5]研究顯示，采用血清學(xué)檢測(cè)抗體法，同一患兒間隔1周檢測(cè)兩次MP-IgM，第2次陽(yáng)性率明顯高于第1次，另外微生物培養(yǎng)法檢測(cè)的陽(yáng)性率明顯高于血清學(xué)檢測(cè)的陽(yáng)性率，提示本研究所顯示的MP檢出率可能明顯低于實(shí)際感染率。需要特別提到的是，本研究IVA檢出率為0%、IVB檢出率為1.22%，兩者合并為1.22%，與2016-2017年內(nèi)江市哨點(diǎn)醫(yī)院門診使用咽拭子檢測(cè)IV核酸的檢出率(1.23%)[6]大致相同。而該醫(yī)院篩查出流感樣病例后再留取咽拭子，其IV核酸檢出率為19.30%。由此可見(jiàn)，臨床醫(yī)師對(duì)患兒進(jìn)行流感癥狀篩查之后再進(jìn)行留樣檢測(cè)，可明顯提高檢出率。

本研究顯示，3個(gè)年齡組中，MP檢出率嬰兒組最低，與海口地區(qū)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)大致相同[4]；RSV檢出率嬰兒組高于其他組。RSV對(duì)嬰幼兒呼吸道有強(qiáng)致病力，可以引起小流行，小嬰兒即可發(fā)病。RSV不僅傳染性強(qiáng)，再感染率也高[1]，嬰兒組檢出率高的原因可能在于此。PTASCHINSKI等[7]研究發(fā)現(xiàn)，早年RSV感染，可導(dǎo)致肺部直接受損，引發(fā)潛在的后遺癥，可能和后來(lái)的哮喘發(fā)作有關(guān)。由此可見(jiàn)RSV感染的預(yù)防至關(guān)重要。ADV檢出率幼兒組高于其他組，與重慶地區(qū)一致[8]。人體血清學(xué)研究表明，出生后數(shù)月到2歲，人體ADV抗體缺乏[1]，這與幼兒組檢出率高相符。

本研究中，9種病原體抗體總體檢出率2017年較2018年高；春季檢出率高于其他季節(jié)，與寧德[3]及海口地區(qū)[4]相符；MP是9種病原體中陽(yáng)性率最高的，高峰在2017年4月，低谷在2018年1月和9月，春季檢出率高于其他三季，不符合冬季多發(fā)的特點(diǎn)[1]，與寧德地區(qū)不符[3]，可能與數(shù)據(jù)年份不同有關(guān)；RSV夏季檢出率低于其他三季；PIV檢出率春夏最高；ADV檢出率呈現(xiàn)春季高而冬季低的特點(diǎn)，與《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》[1]所述不同。

本研究中，IVB、LP、CP、RSV、PIV、ADV單項(xiàng)檢出率男女間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),MP檢出率女高于男(P<0.05)，與海口地區(qū)[4]、孝感市[9]報(bào)道一致。關(guān)于男女間MP感染是否存在特定的差別以及是否有特定的原因，目前尚無(wú)權(quán)威性報(bào)道。

本研究檢出率處于相對(duì)低的水平，是否與試劑盒、入選的病例條件不同有關(guān)，尚不確定，需更多數(shù)據(jù)的支持。筆者考慮與抽血時(shí)患兒的病程有關(guān)，因?yàn)椴〕毯涂贵w產(chǎn)生的時(shí)間有很大關(guān)系。感染后IgM的出現(xiàn)時(shí)間，LP、ADV在4～7 d，RSV、IVA、IVB、PIV在4～8 d，MP在1周，Q fever在2周，CP在2～3周[10]。由此認(rèn)為呼吸道病原體試劑的組合有改進(jìn)的空間。

綜上所述，小兒呼吸道感染病原體因年齡、性別、環(huán)境、地域、氣候不同而呈現(xiàn)不一樣的流行特點(diǎn)。本研究提示，疾病的防控應(yīng)以春季防控為主，重點(diǎn)在MP的防控。只有做好呼吸道病原體檢測(cè)工作，醫(yī)師才會(huì)對(duì)當(dāng)?shù)鼗純翰≡w流行情況有良好的認(rèn)知，診療工作中才可以做到有的放矢。為了提高病原體的檢出率，醫(yī)師尚需更準(zhǔn)確地把握標(biāo)本采集的時(shí)機(jī)，也可以考慮選用更優(yōu)化的檢測(cè)項(xiàng)目。