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        烏天麻的組織培養(yǎng)技術(shù)研究

        2020-09-26 11:29:04王仙陳西亞袁海燕郭麗娜
        新農(nóng)業(yè) 2020年6期
        關(guān)鍵詞:愈傷組織組織培養(yǎng)培養(yǎng)基

        王仙 陳西亞 袁海燕 郭麗娜

        摘要:考察不同培養(yǎng)基(①1/2MS+6-BA1毫克/升+NAA0.5毫克/升+香蕉50毫克/升;②MS+6-BA2.0毫克/升+NAA0.1毫克/升十蔗糖了0克/升+瓊脂了.2克/升;③MS+NAA2.0毫克/升+6-BA0.5毫克/升+2,4-D1.0毫克/升)對誘導(dǎo)烏天麻愈傷組織生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)③號培養(yǎng)基最適合烏天麻塊莖生長的愈傷組織誘導(dǎo)。

        關(guān)鍵詞:烏天麻,組織培養(yǎng),愈傷組織,培養(yǎng)基

        烏天麻(Gastrodia?elata?Blume),為蘭科天麻屬種應(yīng)用廣泛的名貴中藥。在自然條件下主要通過消化外侵的蜜環(huán)菌菌絲體過異養(yǎng)生活,無法獨立生存。近年來,烏天麻的獲取已經(jīng)從野外采挖發(fā)展為人工栽培,但人工栽培產(chǎn)量低,加之烏天麻市場需求量的不斷增大,無法滿足市場的需求。烏天麻主要通過無性繁殖進行人工栽培,但易感染病毒,經(jīng)過多代帶病毒植株逐年增多,進而引起天麻品種退化和產(chǎn)量下降。目前一般采用有性繁殖方法獲得優(yōu)質(zhì)烏天麻品種,以達到烏天麻高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)的目的,但有性繁殖難度比較大,生產(chǎn)周期長。因此,如何快速繁殖烏天麻是目前產(chǎn)麻區(qū)面臨的一大難題。

        本試驗研究烏天麻組織培養(yǎng)技術(shù),以期找出一條簡便可行的天麻種麻的快繁途徑。

        1材料與方法

        1.1材料

        2018年冬季收獲烏天麻的米麻。

        1.2方法

        將小米麻用自來水沖洗千凈后用洗衣粉水再進行深度清潔,然后自來水沖洗10分鐘以上,切成塊莖,在超凈工作臺中將其放人0.1%HgCl,(隔夜)消毒10分鐘,再用無菌水沖洗7~8次(每次1分鐘)。將塊莖再次切細放入無菌紙中吸千水分,分別將烏天麻塊莖放入培養(yǎng)基中褐化2h,然后置于:①1/2MS+6-BAl毫克/升+NAA0.5毫克/升十香蕉50毫克/升,②MS+6-BA2.0毫克/升+NAA0.1毫克/升+蔗糖30克/升+瓊脂3.2克/升和③MS+NAA2.0毫克/升+6-BA0.5毫克/升+2,4-D1.0毫克/升培養(yǎng)基中培養(yǎng)。MS培養(yǎng)基和1/2MS培養(yǎng)基為植物組織培養(yǎng)中常用的基本培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中均含3%蔗糖,0.8%瓊脂,pH值為5.5~6.0。

        2結(jié)果與分析

        接種50天后,外植體開始出芽,接種60天后,芽長大為白色,平均每個芽有0.5±0.2厘

        米,生長后期芽顏色逐漸加深,生命活力減弱(圖1)。由表1可知,烏天麻外植體成活率從高到低依次為:③》②》①,且①號培養(yǎng)基和②號培養(yǎng)基中烏天麻芽體長勢差,不能成長為新米麻,③號培養(yǎng)基中烏天麻芽體長勢良好,有成長為新米麻的趨勢。因此,③號培養(yǎng)基最有利于烏天麻的人工繁殖。

        3討論

        在自然條件下,烏天麻的生存和生長必須依賴于蜜環(huán)菌,但試驗證明烏天麻在無菌條件下也是可以生存和生長的,與陳永勤等的研究結(jié)果一致。烏天麻的離體培養(yǎng)比較困難,外植體成活率低,生長慢且容易被污染,尤其是在加有植物激素香蕉的①號培養(yǎng)基中。小米麻經(jīng)無菌培養(yǎng)50天后開始生長出新米麻,70天后生長出了多個分枝的新米麻,與本研究結(jié)果基本一致。本研究中烏天麻切塊離體培養(yǎng)60天后在MS和1/2MS培養(yǎng)基上均能出芽,以③號培養(yǎng)基的發(fā)芽率最高,②號培養(yǎng)基次之,①號培養(yǎng)基最差;除了③號培養(yǎng)基上的烏天麻塊莖能繼續(xù)生長成具有分枝、多莖節(jié)的烏天麻塊莖的趨勢外,①號和②號培養(yǎng)基均不能繼續(xù)生長成米

        麻。天麻塊莖離體培養(yǎng)60天后,在MS和1/2MS培養(yǎng)基上均能出芽,且芽長勢以MS培養(yǎng)基最好,本研究結(jié)果與之基本一致。

        基金項目:六盤水師范

        學(xué)院大學(xué)生項目,項目編號:LPSSYDXS18095。

        通訊作者:郭麗娜(1989-),女,博士,副教授,E-mail:15029915935@163.com

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