陳 明, 靳曉寧, 馬驍飛, 王 勇

(天津大學(xué)理學(xué)院, 天津 300350)

環(huán)糊精[1](cyclodextrin, CD)是一類環(huán)狀寡聚糖,由呈椅式構(gòu)象的D-吡喃葡萄糖單元以1,4-糖苷鍵[2,3]結(jié)合成環(huán),由于連接葡萄糖單元的糖苷鍵不能自由旋轉(zhuǎn),所以CD分子不是圓筒狀而是略呈錐形的中空?qǐng)A筒立體環(huán)狀結(jié)構(gòu),在其空洞結(jié)構(gòu)中,較大開口端由C-2和C-3的仲羥基構(gòu)成,較小開口端由C-6的伯羥基構(gòu)成,CD最顯著的特征是其親脂性空腔可與眾多非極性分子形成主客體包合物[4]。衍生后的CD除了具有CD本身的主客體包合作用外,還具有π-π相互作用、偶極-偶極相互作用、空間位阻效應(yīng)等多重作用力,在手性分離領(lǐng)域有非常廣泛的應(yīng)用。

高效液相色譜[5,6](HPLC)是目前最常用的分離和純化技術(shù)之一。CD及其衍生物被廣泛用作色譜中的手性選擇劑,通過將CD固載在硅膠上可獲得色譜中的手性固定相(CSP)。CD固載在硅膠上主要有兩種方法,一種是物理涂覆,另一種是化學(xué)鍵合。物理涂覆可以直接將具有官能團(tuán)的CD涂覆于硅膠上從而獲得新型的CSP。化學(xué)鍵合是通過強(qiáng)大且穩(wěn)定的鍵合臂作用將硅膠和CD結(jié)合起來,被認(rèn)為是一種更好的方法用于制備CD-CSP。自1983年Fujimura首次成功地基于氨基合成CD-CSP[7]以來,它們?cè)诜蛛x領(lǐng)域引起了極大的興趣?；瘜W(xué)家們一直在尋找制備穩(wěn)定CD-CSPs的合成方法,具有各種鍵的CD-CSPs得到廣泛開發(fā),例如Armstrong開發(fā)的醚鍵CD-CSPs[8,9], Ng發(fā)展的脲基鍵合臂CD-CSPs[10]等。但是傳統(tǒng)的制備方式存在一系列的問題,如易水解、結(jié)構(gòu)不明確、制備重現(xiàn)性低及條件苛刻[11]等,因此最近的大多數(shù)研究都集中在結(jié)構(gòu)明確的CD-CSPs的開發(fā),其方法是尋求有效溫和的化學(xué)鍵合方法和CD羥基的功能化以提高對(duì)映選擇性。Cu(Ⅰ)催化的1,3-偶極環(huán)加成反應(yīng)[12]的出現(xiàn)成為制備穩(wěn)定CD-CSPs的重要手段。2008年,Liang和Ng兩個(gè)研究組分別利用該反應(yīng)合成了三唑鍵合臂的天然CD-CSP,并成功應(yīng)用于HPLC中,對(duì)多種藥物實(shí)現(xiàn)了分離[13,14]。Ng課題組采用此反應(yīng)合成的苯基異氰酸酯基衍生化CD-CSP實(shí)現(xiàn)了對(duì)6組堿性和中性對(duì)映體的快速拆分[15]。之后,許多課題組對(duì)該反應(yīng)進(jìn)行了深入的研究,并成功制備了衍生化的CD-CSPs,引入了其他功能基團(tuán)[16,17]。隨后,“巰基-烯”的點(diǎn)擊反應(yīng)也得到了廣泛應(yīng)用[18,19]。我們課題組在此基礎(chǔ)上合成了結(jié)構(gòu)明確且性質(zhì)非常穩(wěn)定的CD-CSPs[20,21],并對(duì)異唑啉類、黃烷酮類等多種手性藥品實(shí)現(xiàn)了有效拆分。

上述研究大多集中于對(duì)CD或橋聯(lián)臂進(jìn)行功能衍生引入更多作用位點(diǎn)以提升手性拆分能力,但目前鮮有能夠反映天然CD本征識(shí)別能力的手性固定相的研究報(bào)道,是否引入官能團(tuán)有利于哪些類手性對(duì)映體的拆分并不十分清楚,如何充分發(fā)揮環(huán)糊精本征的手性識(shí)別作用還有待進(jìn)一步研究。本文通過“巰基-烯”點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)合成了能夠反映環(huán)糊精本征手性拆分能力的單(6-巰基-6-去氧)-β-環(huán)糊精手性固定相(CSP1),考察了其對(duì)50多種手性藥物的手性識(shí)別能力,包括異唑啉、手性交酯、手性酮、黃烷酮以及丹磺酰(Dns)氨基酸等,并進(jìn)一步與功能三唑橋聯(lián)CD-CSP(CSP2)及咪唑嗡橋聯(lián)CD-CSP(CSP3)在同一色譜條件下進(jìn)行了對(duì)比,為后期CD色譜固定相結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器、試劑與材料

LCQ Deca XP MAX液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國Thermo Fisher), Infinityplus 300固體核磁共振譜儀(美國瓦里安公司), FTS3000傅里葉紅外光譜儀(天美科學(xué)儀器有限公司), Vario Micro cube元素分析儀(德國Elementar), PHS-2F pH酸度計(jì)(上海雷磁儀器廠), P10SNXP1高壓填柱泵(美國LabAlliance)。

偶氮二異丁腈(AIBN)、偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)、無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)和乙烯基三乙氧基硅烷均購自天津希恩思生化科技有限公司(天津),丙酮、無水乙醚和甲苯均購自利安隆博華醫(yī)藥化學(xué)有限公司(天津),硫脲、三氯乙烯和無水甲醇購自天津市元立化工有限公司(天津),硅膠(5 μm, 10 nm)購自Fuji Silysia (Fuji,日本), HPLC級(jí)甲醇和三乙胺(TEA)購自天津市康科德科技有限公司(天津)。根據(jù)文獻(xiàn)[22]的方法合成了單-6-對(duì)甲苯磺?；?β-CD (TsO-CD)。實(shí)驗(yàn)中用作手性分離的外消旋體的結(jié)構(gòu)如圖1所示,異唑啉類樣品參照文獻(xiàn)[23]報(bào)道合成,手性交酯[24]和手性酮類[25]樣品由中國科學(xué)院福建物質(zhì)結(jié)構(gòu)研究所康強(qiáng)教授提供,丹磺酰氨基酸類樣品購自Sigma-Aldrich公司(上海),黃烷酮類樣品購自上海安耐吉化學(xué)公司(上海)。原裝液相色譜柱(150 mm×4.6 mm)即不銹鋼柱購自Daicel公司(日本)。

1.2 儀器和方法

采用Hitachi液相色譜分析儀進(jìn)行色譜分析,配有二極管陣列檢測器(DAD),檢測波長為254 nm。流動(dòng)相為MeOH/H2O(1∶1, v/v)和MeOH/三乙胺-乙酸緩沖液(1% (v/v) 三乙胺,乙酸調(diào)節(jié)pH至5.30)(1∶1, v/v),流速為0.5 mL/min。每個(gè)樣品均重復(fù)進(jìn)樣3次,所得結(jié)果取平均值。保留因子(k)、選擇因子(α)和分離度(Rs)均采用美國藥典(USP)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)算,所用公式為:k=(tR-t0)/t0(tR為對(duì)映體的保留時(shí)間,t0為死時(shí)間,由基線波動(dòng)所決定);α=k2/k1;Rs=1.18×(t2-t1)/(Wh1+Wh2)(Wh是色譜峰的半峰寬值)。

1.3 CSP1的合成

按圖2所示思路采用“巰基-烯”點(diǎn)擊反應(yīng)進(jìn)行。

1.3.1單(6-巰基-6-去氧)-β-CD的合成[26]

將TsO-CD(3.00 g, 2.33 mmol)和硫脲(1.77 g, 23.3 mmol)溶解在DMF(120 mL)中,在75 ℃下攪拌48 h。在室溫下冷卻后,將混合物加入500 mL乙醚中并攪拌10 min。過濾沉淀物并用100 mL乙醚洗滌,之后懸浮在120 mL丙酮中,并加熱回流2 h。將懸浮液冷卻至室溫并過濾,收集白色固體真空干燥后分批加入含有120 mg Na2S2O5的1 mol/L NaOH(100 mL)溶液中,攪拌30 min后,用濃HCl將溶液酸化至pH=3。將5.3 mL三氯乙烯加入到反應(yīng)混合物中,并將所得懸浮液超聲處理10 min。過濾收集白色固體,真空干燥,得到目標(biāo)產(chǎn)物1.83 g。

圖 1 消旋體的結(jié)構(gòu)式Fig. 1 Structures of the racemates

圖 1 (續(xù))Fig. 1 (Continued)

圖 2 CSP1的合成路線Fig. 2 Synthetic route of CSP1 Ⅰ: synthesized according to reported methods[22]. Ⅱ: synthesized according to reported methods[26]. Ⅲ: anhydrous toluene, heated at 120 ℃ under reflux for 24 h. Ⅳ: mixed solution of methanol and deionized water (1∶1, v/v), azodiisobutyronitrile (AIBN) catalyzed, stirred at 60 ℃ for 24 h. Ts: toluene sulfonyl.

液體核磁共振(1H-NMR)(400 MHz, DMSO-d6)δ: 2.1 (t, SH), 2.7～3.2 (m, 2H, H-6a), 3.2～3.5 (m, 與HDO峰重疊, H-2, H-4), 3.5～3.8(m, 26H, H-3, H-5, H-6b), 5.80～5.61(m, 14H, OH-2, 3), 4.87～4.83(m, 7H, H-1), 4.55～4.47(m, 6H, OH-6)。

紅外光譜(FTIR)(cm-1, KBr): 3 388(O-H伸縮振動(dòng)), 2 923(C-H伸縮振動(dòng)), 2 566(弱吸收峰,SH的伸縮振動(dòng)), 1 651(O-H彎曲振動(dòng)), 1 030(C-O-C對(duì)稱伸縮振動(dòng))。

電噴霧電離質(zhì)譜(ESI-MS)(m/z):計(jì)算值(C42H70O34S)1 151.05 [M+],實(shí)測值1 173.34 [M+Na]+。

1.3.2雙鍵功能化硅膠的合成

將3.0 g活化硅膠(120 ℃真空干燥過夜)均勻分散到30 mL無水甲苯中,向反應(yīng)溶液中加入乙烯基三乙氧基硅烷1.3 mL, N2保護(hù)下,在120 ℃加熱回流24 h,之后過濾得固體粗產(chǎn)物,將粗產(chǎn)物用丙酮索氏提取24 h,真空60 ℃干燥得到目標(biāo)產(chǎn)物2.74 g。

FTIR(cm-1, KBr): 3 443(O-H伸縮振動(dòng)), 2 985(=C-H伸縮振動(dòng)), 2 908(C-H伸縮振動(dòng)), 1 658(O-H彎曲振動(dòng)), 1 068(C-O-C對(duì)稱伸縮振動(dòng))。

1.3.3“巰基-烯”點(diǎn)擊反應(yīng)制備CSP1

向甲醇和去離子水(1∶1, v/v)的混合溶液(40 mL)中加入單(6-巰基-6-去氧)-β-CD 1.5 g,充分?jǐn)嚢枋蛊渫耆芙?。之后向反?yīng)體系中加入3 g雙鍵硅膠和50 mg催化劑AIBN。N2保護(hù)下,在60 ℃下攪拌反應(yīng)24 h。反應(yīng)完成后,將反應(yīng)體系過濾得到粗產(chǎn)物,依次用蒸餾水(2×20 mL)、甲醇(2×20 mL)、丙酮(2×20 mL)洗滌,真空60 ℃干燥得到目標(biāo)產(chǎn)物3.66 g。

表 1 雙鍵功能化硅膠和CSP1的元素分析

1.4 參比手性色譜介質(zhì)的合成

根據(jù)參考文獻(xiàn)[27,28]報(bào)道的方法分別合成了功能三唑橋聯(lián)CD-CSP(CSP2)及咪唑嗡橋聯(lián)CD-CSP(CSP3)作為參比手性介質(zhì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對(duì)照(CSP2和CSP3的表面CD固載量分別為0.51 μmol/m2, 0.46 μmol/m2)。

1.5 色譜柱的填裝

采用高壓勻漿法將所制備的手性介質(zhì)裝入不銹鋼柱(150 mm×4.6 mm)中,甲醇作為分散劑,裝柱壓力為41.37 MPa,裝柱時(shí)間為30 min左右。在使用之前將色譜柱用甲醇沖洗,并采用流動(dòng)相進(jìn)行平衡。

表 2 樣品在CSP1上的分離

圖 3 產(chǎn)物的(a)FTIR和(b)13C SSNMR表征對(duì)比圖Fig. 3 Product characterization comparison chart (a) FTIR, (b) 13C SSNMR

2 結(jié)果與討論

2.1 CSP1的表征

為了證明CSP1可以通過“巰基-烯”點(diǎn)擊反應(yīng)合成,采用FTIR、固體核磁共振(13C SSNMR)和元素分析對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行了表征。在FTIR光譜(見圖3a)中,相比于裸硅膠,雙鍵功能化硅膠在2 985 cm-1處出現(xiàn)了=C-H伸縮振動(dòng)峰,這說明雙鍵已經(jīng)成功地鍵合至硅膠表面。另外,單-6-SH-β-CD在2 566 cm-1處有一個(gè)弱吸收峰,此峰為-SH的伸縮振動(dòng)峰。在進(jìn)行“巰基-烯”點(diǎn)擊反應(yīng)后,在2 930 cm-1附近出現(xiàn)了CD亞甲基的吸收峰,且=C-H和-SH的特征吸收峰均消失。13C SSNMR(圖3b)中,雙鍵功能化硅膠在160～90的雙鍵碳原子信號(hào)峰在合成CSP1后消失,在110～65處出現(xiàn)了新的CD碳原子信號(hào)峰。13C NMR和FTIR結(jié)果表明成功制備了CSP1。元素分析結(jié)果(見表1)表明,與雙鍵功能化硅膠相比,CSP1的C、H、N的百分含量均得到了提高,計(jì)算得出CSP1表面CD固載量為0.82 μmol/m2。

2.2 CSP1的手性識(shí)別能力

為了考察CSP1的本征手性識(shí)別能力,本文選取了5大類包括異唑啉、手性交酯、手性酮類、黃烷酮類,丹磺酰氨基酸等50多種消旋體用于評(píng)價(jià)該手性固定相的拆分性能,結(jié)果見表2。

表 2 (續(xù))

2.2.1異唑啉類樣品的分離

由表2a可知,Ph-Ph類樣品在CSP1上表現(xiàn)出較好的分離效果,其Rs值均大于1,這主要利用的是環(huán)糊精本征的主客體包合作用,該作用與分子間氫鍵、空間位阻效應(yīng)等相結(jié)合,可以形成有效的手性拆分三點(diǎn)作用模型。其中,4ClPh-Ph和4NPh-Ph在CSP1上Rs的值均大于1.5,達(dá)到了基線分離,4ClPh-Ph是由于-Cl基團(tuán)的吸電子效應(yīng),4NPh-Ph是由-NO2與CD形成的氫鍵作用導(dǎo)致的。另外,4ClPh-Ph的Rs值均大于3ClPh-Ph的Rs值,這表明取代基的位置不同會(huì)導(dǎo)致不同的包合作用和分離結(jié)果,客體分子苯環(huán)上的3位取代不利于CSP1手性識(shí)別。綜上所述,環(huán)糊精的本征識(shí)別能力比較有利于含有兩個(gè)疏水苯環(huán)基團(tuán)Ph-Ph類樣品的分離。

由表2b可知,Ph-Py類樣品在CSP1上的分離效果較差,僅4NPh-Py和4MetPh-Py表現(xiàn)出分離跡象,然而其Rs值小于0.8,并未達(dá)到基本分離,這說明吡啶環(huán)對(duì)樣品的分離有一定的抑制作用,由于環(huán)糊精外側(cè)羥基可與吡啶環(huán)氮原子形成氫鍵,阻礙了包合作用的進(jìn)行,進(jìn)而導(dǎo)致該類對(duì)映體分離效果較差。

由表2c可知,除3FPh-OPr外,其他Ph-OPr類樣品在CSP1上均獲得了部分分離,但效果并不理想,未達(dá)到基線分離,這說明樣品分子中吡咯烷酮基團(tuán)雖然也可與環(huán)糊精形成較好的包合,但由于極性較大,與苯環(huán)相比包合作用較弱,無法支撐較好的手性分離結(jié)果。其中,MDOPh-OPr、4ClPh-OPr、4NPh-OP和4MetPh-OPr在CSP1上達(dá)到了較好的分離,這主要是由于這些樣品所連基團(tuán)提供的相應(yīng)作用力提高了分離效果。另外,通過比較4ClPh-OPr和3ClPh-OPr以及4NPh-OPr和3NPh-OPr的Rs值可知,苯環(huán)上4位取代的化合物分離效果均好于3位取代的化合物,這同樣說明苯環(huán)上的3位取代不利于CSP1的手性識(shí)別。

2.2.2手性交酯類樣品的分離

手性交酯類樣品的分離結(jié)果如表2d所示。根據(jù)該類樣品的分子結(jié)構(gòu)特點(diǎn),可以將這12種樣品分為3類,第一類為L-1,該樣品的六元環(huán)和苯并呋喃環(huán)上無任何取代基,其在CSP1上僅僅表現(xiàn)出分離跡象,但未達(dá)到基線分離。第二類為L-2～L-6, L-12,該類樣品的主要特點(diǎn)是六元環(huán)上取代基的種類和位置不同,其中,L-2～L-6為4位取代,L-12為3位取代,分析可知,其分離效果相差無幾,這充分說明六元環(huán)上取代基的位置對(duì)此類樣品的分離效果影響不大。對(duì)于L-2～L-6的分離,僅L-6的Rs值大于1.5,這是由于萘基能夠更好地契合環(huán)糊精空腔大小,起了主導(dǎo)作用;第三類為L-7～L-11,該類樣品的主要結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是苯并呋喃環(huán)所連的取代基不同,該類樣品在CSP1上的分離效果并不是很好,均只表現(xiàn)出分離跡象,但僅有L-8和L-10達(dá)到了基線分離,L-8是由于-F提供的氫鍵作用,L-10是由于-CH3的供電子作用;另外,L-8和L-9均連有-F,但L-8的分離效果比L-9好,這說明苯并呋喃環(huán)上取代基的位置不同會(huì)對(duì)分離效果造成影響。

總之,在手性交酯類樣品的分離中,這3類樣品的分離效果均不是很好,環(huán)糊精的本征識(shí)別能力適用于部分手性交酯樣品的分離。

2.2.3手性酮類樣品的分離

由表2e分析可知,手性酮類樣品在CSP1上均獲得一定分離,個(gè)別樣品達(dá)到了較好的分離效果。其中,D-6的Rs值達(dá)到了5.46,這是由于環(huán)糊精的空腔能夠更好地匹配D-6分子結(jié)構(gòu)以及-Cl的吸電子效應(yīng)起到了主導(dǎo)作用;D-4和D-5的Rs值均大于1,達(dá)到了基本分離,這是由于-CH3的供電子作用和苯環(huán)的共軛效應(yīng),但可能由于-CH3和苯環(huán)的空間位阻效應(yīng),導(dǎo)致其分離效果不如D-6; D-1～D-3僅表現(xiàn)出分離跡象,其Rs值均小于0.8,這說明環(huán)糊精的本征空腔不利于這3個(gè)樣品的分離。

綜上所述,在手性酮類樣品的分離中,樣品較大的空間位阻效應(yīng)抑制了環(huán)糊精的本征識(shí)別能力,因此此類樣品在CSP1上的分離效果并不理想,需要借助外在功能團(tuán)進(jìn)一步調(diào)控其手性識(shí)別性能。

2.2.4丹磺酰氨基酸類樣品的分離

由表2f可知,大部分丹磺酰氨基酸類樣品在CSP1上均實(shí)現(xiàn)了較好的分離,這是由于CD空腔和萘基部分形成了良好的包合作用、靜電作用,并且與手性碳相鄰的脂肪族側(cè)鏈引起的空間效應(yīng)有助于手性選擇性的提高。其中,Dns-DL-Leu、Dns-DL-Aca和Dns-DL-Apa均取得了非常好的分離效果。這除了與環(huán)糊精的本征識(shí)別能力有關(guān)外,還與其自身所連的基團(tuán)有關(guān),Dns-DL-Leu是由于兩個(gè)甲基的空間位阻作用,Dns-DL-Aca是由于其脂肪族側(cè)鏈的疏水作用,Dns-DL-Apa是由于-OH的氫鍵作用和空間位阻效應(yīng);Dns-DL-Val、Dns-DL-Phe、Dns-DL-Nle和Dns-DL-Thr的Rs值大于1,達(dá)到了基本分離,這說明環(huán)糊精的本征識(shí)別能力有利于這4個(gè)樣品的分離,但其所連的基團(tuán)起到了一定的抑制作用;另外,有如下規(guī)律:Rs(Dns-DL-Aca)>Rs(Dns-DL-Nle)>Rs(Dns-DL-Nva)>Rs(Dns-DL-ABa),且Rs(Dns-DL-Leu)>Rs(Dns-DL-Val),這充分說明,脂肪族側(cè)鏈?zhǔn)杷饔迷綇?qiáng),其分離效果越好。

總之,除了環(huán)糊精本征識(shí)別能力產(chǎn)生的影響外,丹磺酰氨基酸的分子結(jié)構(gòu)也會(huì)對(duì)其分離效果產(chǎn)生重要影響,此外,取代基中的側(cè)鏈數(shù)量同樣對(duì)分離效果的好壞產(chǎn)生一定的影響,加長其側(cè)鏈或提高疏水性可有效提升分離效率。

2.2.5黃烷酮類樣品的分離

由表2g可知,黃烷酮類樣品在CSP1上的分離效果一般。其中,6-甲氧基黃烷酮和7-甲氧基黃烷酮的分離效果較為可觀,且7-甲氧基黃烷酮的Rs值大于1,這主要是-OCH3供電子作用力的影響,且其取代基的位置不同也對(duì)分離效果造成了影響。

2.2.6部分樣品在CSP1中分離的典型色譜圖

部分樣品在CSP1中分離的典型色譜圖見圖4。

圖 4 樣品在CSP1上分離的典型色譜圖Fig. 4 Typical chromatogram of sample separation on CSP1

圖 5 消旋體在CSP1～3上的手性分離效果對(duì)比圖Fig. 5 Comparison of chiral separation effects of racemates on CSP1-3a. isoxazolines; b. chiral lactides; c. chiral ketones; d. dansyl amino acids; e. flavanones.

2.3 CSP1與CSP2、CSP3手性識(shí)別能力的對(duì)比

為進(jìn)一步探究環(huán)糊精的本征識(shí)別能力,將CSP2和CSP3的手性色譜柱與CSP1在同一色譜條件下進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)對(duì)照,具體分離效果見圖5。由圖5a可知,在異唑啉3類樣品的分離中,Ph-Ph類樣品在CSP1上的分離效果最好;Ph-Py類樣品CSP1～3上的分離效果均較差,相比之下,在CSP2上的分離效果最好;Ph-OPr類在CSP3上均未分離,在CSP1和CSP2中,除3FPh-OPr外,其他樣品均達(dá)到了一定程度的分離。由圖5b可知,六元環(huán)和苯并呋喃環(huán)上無任何取代基的L-1在CSP1～3上都表現(xiàn)出分離跡象,但均未達(dá)到基本分離;六元環(huán)上含取代基的L-2～L-6, L-12, CSP2的分離效果最好,其次是CSP1,分離效果最差的是CSP3;苯并呋喃環(huán)連有取代基的L-7～L-11在CSP1～3上的分離效果均不是很好。由圖5c可知,手性酮類樣品在CSP2上的分離效果最好,其次是CSP1,而在CSP3上均未出現(xiàn)分離跡象。由圖5d可知,除個(gè)別樣品外,丹磺酰氨基酸類樣品在CSP1～3上均實(shí)現(xiàn)了一定程度的分離,相比之下,此類樣品在CSP2上的分離效果最好,在CSP3上的分離效果最差。由圖5e可知,黃烷酮類樣品在CSP1～3上的分離效果均不理想,其在CSP1上的分離效果最好,但也未達(dá)到基本分離?？傊?環(huán)糊精的本征識(shí)別能力僅利于部分樣品的分離,并不適用于所有樣品,對(duì)橋聯(lián)臂進(jìn)行功能改性雖然能夠提升其對(duì)部分樣品的拆分能力,同時(shí)也會(huì)小幅損失CD色譜固定相的手性識(shí)別能力。

3 結(jié)論

本文通過“巰基-烯”點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)合成了橋聯(lián)臂無官能團(tuán)的單(6-巰基-6-去氧)-β-環(huán)糊精手性固定相 ,其最大限度地保留了環(huán)糊精的本征結(jié)構(gòu),采用HPLC反相模式探究了該手性介質(zhì)對(duì)50多種消旋體的識(shí)別能力,并進(jìn)一步將其與功能三唑橋聯(lián)CD-CSP及咪唑嗡橋聯(lián)CD-CSP在同一色譜條件下進(jìn)行了結(jié)果比對(duì)。通過比較可知,樣品的分離過程除了與手性介質(zhì)的結(jié)構(gòu)有關(guān)外,還與樣品分子的結(jié)構(gòu)有很大關(guān)系,對(duì)橋聯(lián)臂進(jìn)行功能改性可提升對(duì)部分對(duì)映體的選擇性,但同時(shí)會(huì)小幅損失CD的本征手性識(shí)別能力。對(duì)于環(huán)糊精本征識(shí)別能力易于分離的樣品,在設(shè)計(jì)手性介質(zhì)時(shí),其橋聯(lián)臂不需要任何官能團(tuán),探討環(huán)糊精的本征識(shí)別能力也為手性介質(zhì)的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)提供了有益參考。