★ 吳素琪 席藝軒 陳俊 葛海濤*（.中國藥科大學(xué) 南京 98；.江蘇蘇中藥業(yè)集團股份有限公司 南京 006）

慢性腎小球腎炎簡稱慢性腎炎（chronic glomerulonephritis，CGN），是一種原發(fā)性腎小球疾病，由多病因引起，多種病理類型組成，且以慢性腎小球病變?yōu)橹?。常見的臨床癥狀有血尿、蛋白尿、高血壓、水腫等，且多數(shù)癥狀隱匿、發(fā)病緩慢。病程較長者可發(fā)展為不同程度的腎功能減退、腎纖維化，最后導(dǎo)致末期腎衰竭，威脅數(shù)百萬患者的生命。

中醫(yī)藥治療CGN有著悠久的歷史，臨床經(jīng)驗豐富，值得大力推廣，但由于其作用機制未明，影響了中藥在該領(lǐng)域的發(fā)展。有研究發(fā)現(xiàn)，相關(guān)信號通路通過調(diào)節(jié)腫瘤壞死因子TNF-α、轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β、干擾素INF-γ、白細胞介素IL-1、IL-6等的含量表達［1-3］，進而調(diào)控CGN發(fā)病以及發(fā)展。本文通過整理中藥治療CGN所涉及的信號通路及其研究進展，為闡明中藥治療CGN的作用機制提供思路。

1 關(guān)鍵信號通路

1.1 NF-κB信號通路 NF-κB（nuclear factor-kappa B）是核轉(zhuǎn)錄因子Rel家族成員之一，其介導(dǎo)的NF-κB信號通路在免疫炎癥反應(yīng)中具有重要的調(diào)節(jié)作用［4-5］。通常情況下，NF-κB/Rel家族成員首先兩兩結(jié)合形成同源或異源二聚體，然后與抑制性蛋白 IκB（inhibitory protein of NF-κB）結(jié)合成三聚體復(fù)合物，最終以非活性狀態(tài)存在于細胞質(zhì)中。當(dāng)受到某些胞外信號刺激時，IκB激酶（IKK）被激活，使IκB磷酸化進而從三聚體中解離出來，導(dǎo)致NF-κB被活化，進入細胞核內(nèi)，啟動相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，促進IL-6、TNF-α、IL-2、IL-1β、MCP-1 等炎癥因子和介質(zhì)的分泌，導(dǎo)致炎癥發(fā)生［5-6］。因此，通過抑制腎組織NF-κB信號通路，減少相關(guān)炎性因子的釋放，可能是減輕腎小球炎癥損傷的途徑之一。

雷公藤甲素是雷公藤抗炎的主要活性成分。YingZhou等［7］研究雷公藤甲素治療膜性腎小球腎炎小鼠的作用機制時發(fā)現(xiàn)，與模型組相比，雷公藤 甲 素 組 中 NF-κB p65、IκBα、TNF-α、IL-1β、MCP-1表達均顯著下降，提示雷公藤甲素可能通過抑制NF-κB信號通路的激活，減少炎性因子的分泌，從而緩解膜性腎小球腎炎的炎癥反應(yīng)。益腎清利顆粒處方由黃芪、山茱萸、杜仲、白術(shù)、澤瀉、石韋、白花蛇舌草等中藥組成。研究表明，益腎清利顆?？梢越档完栯x子化牛血清白蛋白誘導(dǎo)的CGN大鼠的24h尿蛋白及血清肌酐含量，升高血清白蛋白量，改善膽固醇升高趨勢。其作用機制可能是抑制NF-κB信號通路，從而下調(diào)血清IL-6、TNF-α表達水平，達到減輕腎小球炎癥損傷的目的［8］。CGN常伴有腎小球系膜細胞增生，王強［9］研究升降散對系膜增生大鼠的治療機制時發(fā)現(xiàn)，升降散能明顯降低系膜增生大鼠腎組織中TLR4、NF-κB的表達。提示，升降散可能通過下調(diào)TLR4的水平，進而抑制NF-κB信號通路的激活，從而減少相應(yīng)炎癥因子的釋放，達到抑制系膜細胞增殖的作用。此外，參地顆粒［10］、益腎寧配方顆粒［11］等也可通過調(diào)節(jié)NF-κB信號通路緩解CGN癥狀。

1.2 Wnt信號通路 Wnt信號通路參與了許多重要的生物進程，包括動物胚胎的生長發(fā)育、器官形成、細胞的增殖、分化、遷移、凋亡等，分為經(jīng)典Wnt信號通路（Wnt/β-catenin）和非經(jīng)典Wnt信號通路（Wnt/Ca2+、Wnt/JNK）［12-13］。研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)典Wnt信號通路與CGN的發(fā)病機制密切相關(guān)。病理狀態(tài)下，Wnt信號通路被激活，Wnt蛋白與FZD/LRP受體結(jié)合，激活細胞質(zhì)內(nèi)的DVL蛋白，抑制了與Axin、APC、GSK-3、CK-1等蛋白形成的β-catenin復(fù)合物的降解活性，使β-catenin蛋白在細胞內(nèi)堆積，游離的β-catenin進入細胞核中與轉(zhuǎn)錄因子TCF/LEF結(jié)合，激活下游相關(guān)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄［14-15］。

益氣清熱膏由生黃芪、白術(shù)、穿山龍、白花蛇舌草、防風(fēng)、金銀花等組成。孫雪艷［16］發(fā)現(xiàn)益氣清熱膏對脂多糖誘導(dǎo)的CGN大鼠腎小球系膜細胞的增殖有抑制作用，可明顯降低β-catenin、Wnt4和TGF-β1蛋白的表達水平。表明益氣清熱膏通過抑制CGN大鼠中Wnt信號通路，減少β-catenin的堆積，進而抑制腎小球系膜細胞的增殖。一半湯由大青葉、玄參、浮海石、地膚子、敗醬草、天冬、甘草、半枝蓮、益母草、蒲公英、黃芪、西洋參、菊花組成。劉益源［17］研究一半湯對牛血清白蛋白+四氯化碳+脂多糖誘導(dǎo)的IgA大鼠腎組織的影響，發(fā)現(xiàn)一半湯可減少大鼠血尿、蛋白尿等癥狀，其機制可能是下調(diào)Wnt4、Wnt5a、β-catenin蛋白表達，抑制Wnt信號通路的過度激活，從而治療慢性腎炎。

1.3 MAPK信號通路 由絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是真核細胞最廣泛的調(diào)控機制之一，在CGN發(fā)病機制中占有重要地位。目前，已發(fā)現(xiàn)ERK1/2、JNKs、P38、ERK7/8、ERK3/4、ERK5 6種MAPK信號通路，其中，以ERK1/2、JNKs、P38三條級聯(lián)反應(yīng)研究最多。當(dāng)受到細胞因子、生長因子、炎癥介質(zhì)、射線等刺激時，MAPK激酶激酶（MKKKs/MAP3Ks/MEKKs）、MAPK激 酶（MKKs/MAP2Ks/MEKs）、MAPK（ERK/JNK/ P38）逐級磷酸化，激活轉(zhuǎn)錄因子c-fos、c-Jun、c-myc等，增強AP-1的轉(zhuǎn)錄，進而調(diào)控INF-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等炎癥因子的表達，導(dǎo)致炎癥的發(fā)生［18-19］。

Tu等［20］使用黃葵膠囊（0.5、2 g/kg/d）治療阿霉素誘導(dǎo)的小鼠慢性腎病時發(fā)現(xiàn)，小鼠的精神狀態(tài)、腎形態(tài)外觀、蛋白尿、白蛋白含量、腎硬化得到明顯改善，另外，黃葵膠囊高劑量組還能減少巨噬細胞（ED1+、ED3+）的浸潤，降低腎組織 TNF-α、IL-2含 量 和 TGF-β1、p38MAPK、pp38MAPK的表達，提示黃葵膠囊改善腎臟炎癥和腎小球損傷的作用機制可能是通過抑制p38MAPK信號通路，減少促炎因子TNF-α、IL-2的釋放，從而減輕腎小球炎癥損傷。王朝?。?1］研究腎炎康復(fù)片（由西洋參、人參、生地黃、杜仲、、山藥、白花蛇舌草、黑豆、土茯苓、益母草、丹參、澤瀉、白茅根、桔梗組成）對阿霉素誘導(dǎo)的腎病大鼠模型腎組織炎癥損傷的分子機制時發(fā)現(xiàn)，腎炎康復(fù)片可減少大鼠腎小球內(nèi)巨噬細胞的浸潤，下調(diào)TGF-β1、pp38MAPK蛋白的表達，抑制p38MAPK信號通路的異常激活，發(fā)揮抗炎作用。

1.4 Syk/Ras/c-Fos信號通路 Syk/Ras/c-Fos信號通路不僅參與了自身免疫、免疫反應(yīng)和免疫球蛋白的產(chǎn)生，還與B細胞功能密切相關(guān)。B細胞是體液免疫過程中的重要免疫細胞，脾絡(luò)氨酸激酶（Spleen tyrosine kinase，Syk）是B細胞受體（BCR）信號傳導(dǎo)的關(guān)鍵介質(zhì)，而BCR信號通路對CGN炎癥的發(fā)生具有重要影響。Syk/Ras/c-Fos信號通路能促進活化蛋白-1（AP-1）的形成，對TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8等細胞因子的表達具有重要調(diào)控作用，最后導(dǎo)致CGN炎癥的發(fā)生［22］。

宋俊梅［23］將10只未造模大鼠作為正常對照組，50只阿霉素誘導(dǎo)的CGN大鼠模型隨機分為模型組、芪藤消濁顆粒不同劑量組（5.4、10.8、21.6 g/kg）、黃葵膠囊組（1.0 g/kg）。其中，芪藤消濁顆粒組、黃葵膠囊組給予相應(yīng)劑量的藥物，模型組和正常對照組給予等量溶媒，每天一次，連續(xù)30天后，測定大鼠24 h尿蛋白、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）以及血清中尿素氮、肌酐、胱抑素、視黃醇結(jié)合蛋白的含量，發(fā)現(xiàn)芪藤消濁顆粒中、高劑量組均可顯著降低以上因子的含量。通過檢測Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2和 c-Fos mRNA及相應(yīng)蛋白的表達情況，發(fā)現(xiàn)芪藤消濁顆粒的作用機制可能是抑制上述mRNA及相應(yīng)蛋白的表達量，影響下游信號因子的表達，從而抑制Syk/Ras/c-Fos信號通路，進而起到治療慢性腎炎的作用。

2 其他信號通路

2.1 AGEs/RAGE/NF-κB信號通路 晚期糖基化終末產(chǎn)物（advanced glycation end products，AGEs）與晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（receptor for advanced glycation end products， RAGE）結(jié)合，促進了 NF-κB的核轉(zhuǎn)錄，從而提高TNF-α、IL-1β、IL-6等促炎因子的表達，最終導(dǎo)致炎癥的發(fā)生［24］。真武湯出自《傷寒論》，由茯苓、芍藥、生姜、附子、白術(shù)組成。Wu等［25］研究發(fā)現(xiàn)真武湯可抑制由陽離子化牛血清白蛋白誘導(dǎo)的膜性腎小球腎炎大鼠腎組織中ACGs、RAGE1、NF-κB p65的表達，其作用機制是通過抑制ACGs/RAGE/NF-κB信號通路的激活，降低血清中炎癥介質(zhì)TNF-α、IL-1β和IL-6的水平，進而達到保護腎臟的作用，治療膜性腎小球腎炎。

2.2 P13K/AKT信號通路 磷脂酰肌醇3-激酶/ 蛋白激酶B（P13K/AKT）信號通路與細胞的增殖、分化、凋亡和炎癥的發(fā)生密切相關(guān)。白芍總苷（TGP）是毛茛科植物白芍干燥根中的主要活性成分，具有調(diào)節(jié)機體免疫功能、抗炎的作用。研究表明，白芍總苷可通過P13K/AKT途徑抑制系膜增生性腎炎大鼠血清中IL-1α、IL-2、IL-10、INF-γ的水平，從而抑制腎系膜細胞的過度增殖，改善腎臟炎癥損傷［26］。

3 結(jié)語

慢性腎小球腎炎具有起病隱匿、病程長、復(fù)發(fā)率高、難治愈等特點，另外，其起病原因、作用機制尚未明確，增加了治療的難度。中藥治療著眼于整體調(diào)控，有效成分多樣，相互協(xié)調(diào)，具有多靶點、多環(huán)節(jié)、多系統(tǒng)的優(yōu)勢。中藥治療慢性腎炎涉及的信號通路有NF-κB信號通路、Wnt信號通路、MAPK信號通路、Syk/Ras/c-Fos信號通路等，不同信號通路之間存在相互作用。同時，一種中藥可調(diào)控多條信號通路，如雷公藤可抑制NF-κB和MAPK信號通路，黃葵膠囊可抑制P38MAPK/AKT和P38MAPK信號通路。中藥通過調(diào)控不同信號通路，從而調(diào)節(jié)細胞因子、炎癥介質(zhì)的表達，進而達到緩解腎組織炎癥、恢復(fù)腎小球功能的作用，見表1。因此，通過信號通路研究中藥治療CGN的作用機制，可為CGN的治療提供新的思路，促進中藥在慢性腎小球腎炎方面的應(yīng)用。

表1 治療慢性腎小球腎炎的相關(guān)中藥