楊秀媚

【摘 要】目的：分析病理術(shù)中特殊組織冰凍切片的制片技巧和應(yīng)用情況。方法：擇取本院病理科2019年1月-2019年12月外檢手術(shù)快速病理樣本共計(jì)7560例開展研究，針對(duì)于不同組織，開展針對(duì)性的冰凍切片制備方式，分析結(jié)果。結(jié)果：針對(duì)于各個(gè)種類組織樣本，應(yīng)使用合適的方式完成切片，鏡下查看組織結(jié)構(gòu)較為清晰，其完全符合病理術(shù)中快速冰凍之診斷要求。結(jié)論：因?yàn)楦鱾€(gè)組織內(nèi)組成成分配比存在差別。所以說，工作人員在開展實(shí)際工作中應(yīng)當(dāng)依照自身性質(zhì)，擇取適宜的制片方式，以取得滿意成效。

【關(guān)鍵詞】特殊組織;冰凍切片;技巧分析;溫度;染色

現(xiàn)如今，冰凍切片已經(jīng)在臨床手術(shù)病理診斷中得以全面應(yīng)用。其所取得的效果獲得了諸多學(xué)者們的肯定與認(rèn)可。但值得說明的是，在這種情況下，針對(duì)于病理醫(yī)師合理掌握冰凍切片診斷技術(shù)也提出了更為嚴(yán)苛的標(biāo)準(zhǔn)與要求。病理科醫(yī)師需要在最短的時(shí)間內(nèi)分辨出送檢樣本具體性質(zhì)，為病患的下一步治療提供證據(jù)[1]。術(shù)中病理快速冰凍切片具體特征為要求明確、材料較少、時(shí)間緊張等等。病理切片的制片技巧會(huì)在很大程度上對(duì)最終病理診斷準(zhǔn)確度造成影響。并且值得注意的是，術(shù)中快速診斷所承擔(dān)的風(fēng)險(xiǎn)較高。由此能夠看出，病理醫(yī)師應(yīng)當(dāng)有效掌握送檢樣本制片技巧，進(jìn)而取得質(zhì)量過關(guān)的冰凍切片。結(jié)合實(shí)際情況，本文全面探究病理術(shù)中冰凍切片特殊組織制片技巧以及應(yīng)用情況，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

擇取本院病理科2019年1月-2019年12月外檢手術(shù)快速病理樣本共計(jì)7560例開展研究。在此其中包含骨組織、淋巴結(jié)、腎臟、大腦、胃腸、乳腺以及甲狀腺等等。本實(shí)驗(yàn)利用ThermoNX50恒溫冰凍設(shè)備完成切片。

1.2 方法 擇取適宜的冷凍時(shí)長以及箱體溫度，將樣本放在冰凍設(shè)備內(nèi)預(yù)冷處理，同時(shí)準(zhǔn)備好乙醇燈染色劑以及固定液等等物品。取材器械和送檢組織應(yīng)當(dāng)盡量避免沾水。具體的組織規(guī)格應(yīng)當(dāng)為2.0cm×2.0cm×2.0cm。切片包埋具體處理方式為：擇取規(guī)格適宜的組織，放入到包埋劑之中。修整組織直至最大面積、細(xì)修。同時(shí)實(shí)現(xiàn)均勻速度切片。

組織染色以及固定方法為：將切片于室溫環(huán)境下自然晾干。片刻之后使用甲醇固定時(shí)間為1min。蘇木精染處理，時(shí)間為0.5min～1min。利用濃度為1%的鹽酸乙醇完成分化，時(shí)間為15s。后開展液返藍(lán)以及碳酸鋰飽處理。使用濃度為1%的乙醇性伊紅20s，濃度為95%的乙醇脫水。利用濾紙吸干處理樣本，二甲苯透明后，使用中性塑膠完成封片。

2 結(jié)果

切片方式冷凍溫度以及冷凍時(shí)間等等因素均會(huì)對(duì)具體的切片治療造成影響。由于切片組織材質(zhì)不均等，使得標(biāo)本質(zhì)量差異顯著。因此，應(yīng)當(dāng)結(jié)合具體組織則取適宜的方式完成制片，通過觀察可以發(fā)現(xiàn)細(xì)胞染色均勻度高，組織形態(tài)完整，細(xì)胞形態(tài)與常規(guī)性切片差異不大。

2.1 溫度與時(shí)間 溫度和時(shí)間對(duì)冰凍切片會(huì)產(chǎn)生較高影響。因?yàn)椴煌慕M織樣本形態(tài)與結(jié)構(gòu)成分存在一定差異。所以說，針對(duì)于冰凍性切片所對(duì)應(yīng)的要求也各不相同[2]。冰凍切片實(shí)現(xiàn)條件有差別。通過實(shí)踐研究證實(shí)：脂肪以及乳腺溫度最低，其遠(yuǎn)低于腎臟、肝臟、大腦、甲狀腺等等樣本箱體溫度。

2.2 其他 除卻冷凍溫度以及時(shí)間以外，在開展病理術(shù)中冰凍切片特殊組織碎片過程中，也應(yīng)當(dāng)注意取材過程中是否充分去掉了異物、鈣化物以及粘液等等。如果囊壁較薄，應(yīng)當(dāng)注意具體的組織包埋方向。完成切片之后，第一時(shí)間做好固定工作，定時(shí)更換染色液確保新鮮度，避免其變質(zhì)，進(jìn)而對(duì)最終診斷結(jié)果造成影響。

3 討論

病理術(shù)中冰凍切片一般應(yīng)用于術(shù)中病理診斷。最近幾年，病理術(shù)中切片愈加受到臨床醫(yī)生的青睞，通過質(zhì)量優(yōu)秀的冰凍切片、精湛的切片技術(shù)實(shí)施病理診斷，要求病理科醫(yī)師于短期內(nèi)對(duì)于送檢樣本開展性質(zhì)鑒別，進(jìn)而為手術(shù)醫(yī)生決定下一步治療提供可靠依據(jù)。

從具體的冰凍切片常見組織和制片技巧方面來看，具體為：

（1）甲狀腺。針對(duì)于甲狀腺樣本，應(yīng)當(dāng)有效掌握溫度以及冷凍時(shí)間。通過嚴(yán)格控制后能夠取得質(zhì)量過關(guān)切片。具體切片要點(diǎn)為必須完整切格甲狀腺包膜，開展組織修片過程中，應(yīng)當(dāng)有效查看切面情況。若發(fā)現(xiàn)小型結(jié)節(jié)，必須要切到，以免影響微小癌疾病診斷[3]。

（2）乳腺。和其他類別切片相比，乳腺纖維瘤切片制備相對(duì)簡單。倘若纖維成分含量較多，例如乳腺髓樣癌、乳腺病等等。經(jīng)過冷凍后組織脆性升高，切片過程中非常容易出現(xiàn)空洞。所以說，應(yīng)當(dāng)將切片溫度控制在-17～-18℃之間，厚度為7μm，勻速慢切。通常要大于6個(gè)切緣，箱溫度應(yīng)調(diào)節(jié)至-25℃，凍頭溫度為-30～-40℃，也可以利用冷凍錘全面催化冷凍過程，降低冰晶形成概率。

（3）腦部組織以及腎穿刺活檢等樣本。這些組織樣本內(nèi)部含有水分較高。如果操作不到位，非常容易生成冰晶。所以說，針對(duì)于大腦組織以及腎活檢穿刺等等要本推薦速凍法加以處理。在對(duì)小型組織開展包埋過程中，應(yīng)當(dāng)上墊底部，預(yù)防切片機(jī)損壞現(xiàn)象發(fā)生。在進(jìn)行樣本上托時(shí)，應(yīng)當(dāng)現(xiàn)放少量包埋劑，大約在50%冷凍時(shí)把組織攤開，后使用冷凍錘輕壓組織，厚度保持在4～5μm。完成切片之后，稍稍晾干后固定，可預(yù)防脫片現(xiàn)象發(fā)生。

（4）囊壁組織。較為常見的囊壁組織包含粘液性纖維瘤、卵巢胎肌瘤等等。上述標(biāo)本外表通常附著大量脂肪、毛發(fā)、血液黏液等成分，因此不可貿(mào)然用水清洗。只需盡量將其剔除干凈。取出病變位置切成長條。制成團(tuán)樣或者U型垂直放于冷凍托上[4-5]。開展切片過程中，應(yīng)當(dāng)確保全層完整度。對(duì)于畸胎瘤，應(yīng)當(dāng)切除具有特點(diǎn)的頭節(jié)區(qū)域。

（5）高脂肪含量樣本。由于此類樣本內(nèi)含有大量的脂質(zhì)，且僅有少量疏松性結(jié)締組織。在切片過程中，如果溫度控制不良，很容易發(fā)生空洞，甚至完全無法切出。所以說，針對(duì)于脂肪組織，箱體溫度必須控制在-35℃左右，開啟設(shè)備功能。切片厚度應(yīng)當(dāng)為15-20μm。凍頭溫度保持在-45～-50℃之間。加長冷凍時(shí)間。當(dāng)取得滿意切片硬度之后，切片過程中必須快速。切片進(jìn)刀要快。

總而言之，因?yàn)楦鱾€(gè)組織內(nèi)組成成分配比存在差別。所以說，工作人員在開展實(shí)際工作中應(yīng)當(dāng)依照自身性質(zhì)，擇取適宜的制片方式，以取得滿意成效。

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