龔鑫　趙露　陳琳　張倩　宋夢梅　賴寒

摘要：青檸中所含多糖具有調(diào)節(jié)免疫、降血糖、降血脂、抗擊病毒等多種生物活性，為更加有效地提高對青檸中多糖的提取效率和生物活性研究，通過對近年來出現(xiàn)的青檸多糖方法和生物活性研究進(jìn)行整理和對比，總結(jié)出青檸多糖提取的優(yōu)化方法，為青檸多糖的生物活性研究應(yīng)用提供有益的參考。

關(guān)鍵詞：青檸;多糖;提取;活性

青檸又名綠檬、萊檬等，屬蕓香科柑橘屬種。其外形為橢球型或球型，其色為淡黃綠色，直徑大約為4至5cm。青檸主產(chǎn)于印度、巴西等地，青檸在我國盛產(chǎn)于云南等，種類繁多。青檸具有較高的營養(yǎng)價值，富含多種維生素、膳食纖維以及微量元素等其他物質(zhì)。

一、青檸多糖研究背景

青檸多糖是指從青檸皮中所提取的由10個以上單糖通過糖苷鍵連接而成的糖鏈。在水解等作用下均被破壞為單糖，從而可對組成多糖的成分進(jìn)行鑒別。因此，提取青檸中的多糖是青檸利用的一條新途徑。[1]

二、青檸多糖的提取

（一）水溶劑提取法

利用相似相溶的原理，以熱水作為溶劑對多糖物質(zhì)進(jìn)行浸提是比較傳統(tǒng)的浸提方法，由于水分子的極性較強和溶液的加熱處理可是植物細(xì)胞壁破裂從而釋放出多糖物質(zhì)。此方法與其他浸提方法比較成本較低、操作流程較簡單但浸提次數(shù)繁多，而且溶于水的物質(zhì)較多，雜質(zhì)不易區(qū)分、不易清除，需消耗較多的時間且多糖提取率偏低，可造成資源浪費，所得產(chǎn)物提取率不高。

（二）酸堿法提取多糖

可利用植物細(xì)胞在酸性溶液或堿性溶液中均可吸收溶液而膨脹導(dǎo)致細(xì)胞破裂使多糖被提出的原理進(jìn)行多糖提取。酸堿提取可使多糖的糖苷鍵斷裂而形成單糖，其中酸提取法耗費時間較短且相對于傳統(tǒng)的水溶劑提取法所得多糖含量較高，由于形成單糖原因，多糖含量也不可避免降低，另外對于提取條件要求也較為嚴(yán)格。

為了酸堿法提取多糖含量提高，王智榮等人[2]進(jìn)行酸法提取海帶多糖，在進(jìn)行pH、提取溫度、提取時間、料液比的單因素影響過后利用正交試驗優(yōu)化條件，得出最佳提取工藝參數(shù)為料液比25ml/g、提取時間2h、提取溫度100℃和pH2.0，此條件下多糖提取率為12.95%。蔣玉梅等人[3]利用含有檸檬酸鈉的有機弱堿溶液浸泡檸檬提取多糖，得出最佳提取條件是料液比40ml/g、提取時間0.5h、提取溫度75℃和pH28.5，所得多糖提取率為8.81%。以上實驗分別利用酸法堿法優(yōu)化進(jìn)行多糖提取，所得提取率不高，其原因不僅有外界不可逆因素，如：品種、加工、實驗人員不同、實驗儀器等，還有酸堿破壞多糖形成單糖。

（三）超聲輔助提取法

利用超聲產(chǎn)生極大壓力，使植物細(xì)胞壁破裂從而釋放出多糖。與前兩種方法相比實驗成本較低，過程較為安全投資少，大大縮短了提取時間，提取率也較為可觀等優(yōu)點。超聲波輔助提取法尤其適合于熱敏物質(zhì)的提取。黃茜等人[4]通過單因素篩選，利用超聲波對臍橙皮中的多糖成分進(jìn)行萃取，發(fā)現(xiàn)在液固比為20ml/g、超聲波功率為320W、提取溫度為70℃、提取時間為20min的條件下，可得到30.2%的多糖提取率，超聲輔助提取法與傳統(tǒng)水溶劑提取法而言，雜質(zhì)含量降低，資源浪費減少，大幅度縮短了提取時間，同酸堿法相比則沒有多糖形成單糖的風(fēng)險，升高了多糖的提取率。

（四）微波輔助提取法

與超聲作用原理相同但最大的不同在于，微波是產(chǎn)生大量的熱量，以致細(xì)胞壁破損，將細(xì)胞內(nèi)含物溶出，因此微波提取的多糖雜質(zhì)含量較多，其優(yōu)點高速節(jié)能、安全、提取率較高。楊嘉丹等人利用微波提取銀耳中的多糖，所得實驗結(jié)果為液料比為50ml/g、粒度為120目、微波功率為400W、微波時間為2.0h，該條件為提取最佳工藝并且銀耳多糖的提取率達(dá)到（33.25±0.14）%，微波提取法是近幾年才應(yīng)用的實驗方法，與之傳統(tǒng)提取方法相比，優(yōu)點突出，縮短時間，提高提取率等。

三、多糖的藥理作用

青檸多糖屬于植物多糖一類，其藥理作用相似，植物多糖具有抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、抗高血糖等藥理作用，由于植物多糖存在于植物中，所以對人體幾乎沒有副作用。

（一）杭氧化

氧自由基可在正常的新陳代謝中產(chǎn)生，當(dāng)人機體內(nèi)積累一定量的氧自由基時，其可損傷人體組織細(xì)胞或器官還可使其他大分子物質(zhì)發(fā)生變性從而使機體產(chǎn)生疾病?？赏ㄟ^青檸多糖的抗氧化性入手研究青檸多糖對·OH的清除作用，來挖掘青檸多糖的其中一個用途。

（二）抗腫瘤

當(dāng)人機體被體內(nèi)或體外多種不良因素高頻率影響，某一種細(xì)胞變性，體內(nèi)進(jìn)行惡性繁殖時形成腫瘤，危害人體健康。目前除化療外，也可以試用植物多糖進(jìn)行抗腫瘤治療，大多數(shù)植物多糖可通過增強機體免疫能力，殺傷或抑制腫瘤形成從而使機體產(chǎn)生抗腫瘤的機制。根據(jù)青檸多糖的抗腫瘤活性進(jìn)行動物實驗，觀察小鼠腫瘤的生長在青檸多糖的作用下增值效果，研究青檸多糖對腫瘤進(jìn)行清除作用。

（三）抗病毒

目前，認(rèn)可度較高的兩種抗病毒作用機制分別為抑制病毒進(jìn)入細(xì)胞防止病毒隨宿主細(xì)胞的分裂而不斷復(fù)制和增強人體自身的免疫能力防止病毒的入侵。青檸亦可通過提取青檸多糖，青檸多糖進(jìn)入機體后通過調(diào)節(jié)來達(dá)到抗病毒效果，其安全系數(shù)比一般人工合成的抗病毒藥物高，大幅度降低成本、節(jié)約資源。

（四）抗高血糖

現(xiàn)今人們的糖尿病發(fā)病率逐年增加。截止2015年糖尿病患者己達(dá)4%左右，Ⅱ型糖尿病患者占到絕大多數(shù)。到2030年，我國患有糖尿病人將有4200萬，成為世界第二大糖尿病國家，僅次于印度之后，尋找治療糖尿病的方法迫在眉睫。根據(jù)研究顯示多糖類等天然產(chǎn)物能夠降低α-葡萄糖苷酶的活性。通過研究青檸多糖對α-葡萄糖苷酶的抑制率，表明青檸多糖治療糖尿病的效果，為尋找治療糖尿病藥物提供新途徑。

四、結(jié)論

對于傳統(tǒng)水溶液提取方法，雖操作簡便、成本極低而被廣泛利用在不同提取實驗中，但雜質(zhì)含量多、提取率低等缺點也較為突出，酸堿法提取多糖較之水溶劑法減少重復(fù)多次提取問題，節(jié)約資源，但其酸堿易破壞提取成分，不建議使用到多糖提取中。關(guān)于超聲、微波或者超聲微波聯(lián)用，與水提法相比，極大縮短時間，成效顯著，雜質(zhì)含量少，操作更為便捷，可將此類方法應(yīng)用到青檸皮中多糖提取上。青檸多糖具有抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、抗高血糖等藥理作用，無疑會為人類的健康貢獻(xiàn)更大的作用。

參考文獻(xiàn)：

[1]何余堂，潘孝明.植物多糖的結(jié)構(gòu)與活性研究進(jìn)展[J].食品科學(xué)，2010，31（17）：493-496.

[2]王智榮，林宗毅，崔春.酸法提取海帶多糖的效果評價及工藝優(yōu)化[J].中國食品添加劑，2016（2）：126-131.

[3]蔣玉梅，蔣婷婷，岳天寧.堿法提取檸檬中的多糖[J].化學(xué)世界，2017（5）：257-261.

[4]黃茜，李建鳳，廖立敏.超聲波輔助提取臍橙皮多糖研究[J].食品研究與開發(fā)，2016，37（19）：40-43.

（通訊作者：賴寒）

作者簡介：龔鑫，重慶第二師范學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院2016級應(yīng)用化學(xué)專業(yè);趙露，重慶第二師范學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院2017級藥物分析專業(yè);陳琳，重慶第二師范學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院2016級應(yīng)用化學(xué)專業(yè);張倩，重慶第二師范學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院2018級藥物分析專業(yè);宋夢梅，重慶第二師范學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院2018級藥物分析專業(yè);

通訊作者：賴寒，男，四川內(nèi)江人，重慶第二師范學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院副教授。